2.培养基和试剂 (1)缓冲蛋白胨水(BPW) ①成分 蛋白胨10.0g,氯化钠50g,磷酸氢二钠（含12个结晶水）90g,磷酸二氢 钾1.5g,蒸馏水1000mL。 ②制法：将各成分加入蒸馏水中，搅混均匀，静置约10mi,煮沸溶解，调节pH 7.240.2,高压灭菌121℃，15min。 (2)四流猫静钠煌绿(TTB)增菌液 ①基础液： 蛋白胨10.0g,牛肉音5.0g,氯化钠3.0g,碳酸钙45.0g, 蒸馏水1000 mL。除碳酸钙外，将各成分加入蒸馏水中，煮沸溶解，再加入碳酸钙，调 pH7.0H02。,高压灭菌121℃，20min ②硫代硫酸钠溶液：硫代硫酸钠（含5个结品水）50.0g,蒸馏水加至100mL。高压 灭南121℃，20min。 ③曲溶液，曲片00。，化钾250。，蒸馏水加至100mL。将独化拥充分溶解干少 量的蒸馏水中，再投入碘片，振摇玻瓶至碘片全部溶解为止，然后加蒸馏水至规定的总 量，贮存于棕色瓶内，塞紧瓶盖备用。 ④0.5%煌绿水溶液：煌绿0.5g,蒸馏水100mL,溶解后，存放暗处，不少于1天，使 其自然灭菌。 ⑤牛胆盐溶液：牛胆盐10.0g,蒸馏水100mL,加热煮沸至完全溶解，高压灭菌 121c,20mim ⑥制法：基础液900mL,硫代硫酸钠溶液100mL,碘溶液20.0mL,煌绿水溶液2.0 mL,牛胆盐溶液50.0mL。临用前，按上列顺序，以无菌操作依次加入基础液中，每加入 一种成分，均应摇匀后再加入另一种成分。 (3)亚晒酸盐胱氨酸(SC)增茵液 ①成分：蛋白胨5.0g,乳糖4.0g,磷酸氢二钠10.0g,亚硒酸氢钠4.0gL胱氨酸 0.01g蒸馏水1000ml ②制法：除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸外，将各成分加入蒸馏水中，煮沸溶解，冷至55℃ 以下，以无菌操作加入亚硒酸氢钠和1gLL-胱氨酸溶液10mL(称取0.1gL胱氨酸，加1 moM氢氧化钠溶液15mL,使溶解，再加无菌蒸馏水至1O0mL即成，如为DL-胱氨酸， 用量应加倍)。摇匀，调节p7.010.2。 (4)亚硫酸铋 (BS)琼脂 ①成分：蛋白胨10.0g,牛肉膏5.0g,葡萄糖5.0g,硫酸亚铁0.3g,磷酸氢二钠4.0 g,煌绿0.025g或5.0gL水溶液5.0mL,柠檬酸铋铵2.0g,亚硫酸纳6.0g,琼脂18.0g~20.0 g,蒸馏水1000mL。 ②制法：将前三种成分加入300mL.蒸馏水（制作基液），硫酸亚铁和磺酸氢二钠 分别加入20mL和30mL蒸馏水中，柠檬酸秘铵和亚硫酸钠分别加入另 20mL和30ml 蒸馏水中，琼脂加入600mL蒸馏水中。然后分别搅拌均匀，煮沸溶解 冷至80C左名 时，先将硫酸亚铁和磷酸氢二钠混匀，倒入基础液中，混匀。将柠檬酸秘铵和亚硫酸钠混 匀，倒入基础液中，再混匀。调节pH7.50.2,随即倾入琼脂液中，混合均匀，冷至50℃~ 55℃。加入煌绿溶液，充分混匀后立即倾注平皿。 注：①本培养基不需要高压灭菌，在制备过程中不宜过分加热，避免降低其达择性，贮于室温暗处 超过48h会降低其选择性。②本培养基宜于当天制备，第2天使用 (5)E琼脂 ①成分：蛋白胨12.0g,牛肉膏3.0g,乳糖12.0g,燕糖12.0g,水杨素2.0g,胆盐 20.0g,氯化钠5.0g,琼脂18.0g~20.0g,蒸馏水1000mL,0.4%溴麝香草酚蓝溶液16.02. 培养基和试剂 （1）缓冲蛋白胨水（BPW） ① 成分：蛋白胨10.0 g，氯化钠5.0 g，磷酸氢二钠（含12个结晶水）9.0 g，磷酸二氢 钾1.5 g，蒸馏水1 000 mL。 ② 制法：将各成分加入蒸馏水中，搅混均匀，静置约10 min，煮沸溶解，调节pH 7.2±0.2，高压灭菌121℃，15 min。 （2）四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液 ① 基础液：蛋白胨10.0 g，牛肉膏5.0 g，氯化钠3.0 g，碳酸钙45.0 g，蒸馏水1 000 mL。除碳酸钙外，将各成分加入蒸馏水中，煮沸溶解，再加入碳酸钙，调节 pH7.0±0.2。，高压灭菌121℃，20 min。 ② 硫代硫酸钠溶液：硫代硫酸钠（含5个结晶水） 50.0 g，蒸馏水加至100 mL。高压 灭菌121℃，20 min。 ③ 碘溶液：碘片20.0 g，碘化钾25.0 g，蒸馏水加至100 mL。将碘化钾充分溶解于少 量的蒸馏水中，再投入碘片，振摇玻瓶至碘片全部溶解为止，然后加蒸馏水至规定的总 量，贮存于棕色瓶内，塞紧瓶盖备用。 ④ 0.5％煌绿水溶液：煌绿0.5 g，蒸馏水100 mL，溶解后，存放暗处，不少于1天，使 其自然灭菌。 ⑤ 牛胆盐溶液：牛胆盐10.0 g，蒸馏水100 mL，加热煮沸至完全溶解，高压灭菌 121℃，20 min。 ⑥ 制法：基础液900 mL，硫代硫酸钠溶液100 mL，碘溶液20.0 mL，煌绿水溶液2.0 mL，牛胆盐溶液50.0 mL。临用前，按上列顺序，以无菌操作依次加入基础液中，每加入 一种成分，均应摇匀后再加入另一种成分。 （3）亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液 ① 成分：蛋白胨5.0 g，乳糖4.0 g，磷酸氢二钠10.0 g，亚硒酸氢钠4.0 g，L-胱氨酸 0.01 g，蒸馏水1 000 mL。 ② 制法：除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸外，将各成分加入蒸馏水中，煮沸溶解，冷至55℃ 以下，以无菌操作加入亚硒酸氢钠和1 g/L L-胱氨酸溶液10 mL（称取0.1 g L-胱氨酸，加1 mol/L 氢氧化钠溶液15 mL，使溶解，再加无菌蒸馏水至100 mL 即成，如为DL-胱氨酸， 用量应加倍）。摇匀，调节pH 7.0±0.2。 （4）亚硫酸铋（BS）琼脂 ① 成分：蛋白胨10.0 g，牛肉膏5.0 g，葡萄糖5.0 g，硫酸亚铁0.3 g，磷酸氢二钠4.0 g，煌绿0.025 g或5.0 g/L水溶液5.0 mL，柠檬酸铋铵2.0 g，亚硫酸钠6.0 g，琼脂18.0 g～20.0 g，蒸馏水1 000 mL。 ② 制法：将前三种成分加入300 mL 蒸馏水（制作基础液），硫酸亚铁和磷酸氢二钠 分别加入20 mL和30 mL 蒸馏水中，柠檬酸铋铵和亚硫酸钠分别加入另一 20 mL和30 mL 蒸馏水中，琼脂加入600 mL 蒸馏水中。然后分别搅拌均匀，煮沸溶解。冷至80℃左右 时，先将硫酸亚铁和磷酸氢二钠混匀，倒入基础液中，混匀。将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠混 匀，倒入基础液中，再混匀。调节pH 7.5±0.2，随即倾入琼脂液中，混合均匀，冷至50℃～ 55℃。加入煌绿溶液，充分混匀后立即倾注平皿。 注：①本培养基不需要高压灭菌，在制备过程中不宜过分加热，避免降低其选择性，贮于室温暗处， 超过48 h 会降低其选择性。②本培养基宜于当天制备，第2天使用。 （5）HE 琼脂 ① 成分：蛋白胨12.0 g，牛肉膏3.0 g，乳糖12.0 g，蔗糖12.0 g，水杨素2 .0 g，胆盐 20.0 g，氯化钠5.0 g，琼脂18.0 g～20.0 g，蒸馏水1 000 mL，0.4％溴麝香草酚蓝溶液16.0