mL,Andrade指示剂20.0mL,甲液20.0mL,乙液20.0mL. ②制法：将前面七种成分溶解于400mL张馏水内作为基出液：将琼脂加入于600m 蒸馏水内。然后分别搅拌均匀，煮沸溶解 ,加入甲液和乙液于基础液内，调节pH7.50.2 再加入指示剂，并与琼脂液合并，待冷至50℃~55℃倾注平皿 注：①本培养基不需要高压灭菌，在制备过程中不宜过分加热，避免降低其选择性。②甲液的配制： 硫代硫酸钠34.0g,柠檬酸铁铵4.0g,蒸馏水100mL。③乙液的配制：去氧胆酸钠10.0g,蒸缩水100 mL。④Andrade指示剂：酸性复红0.5g,1 mol/L氢氧化钠溶液16.0mL,蒸馏水100mL。将复红溶解 于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液。数小时后如复红课色不全，再加氢氧化钠溶液1mL2mL, (6)木糖赖氨酸脱氧胆盐(XLD)琼脂 ①成分：酵母膏3.0g,L赖氨酸5.0g,木糖3.75g,乳糖7.5g,蔗糖7.5g,去氧胆酸 钠2.5g,柠檬酸铁铵0.8g,硫代硫酸钠6.8g,氯化钠5.0g,琼脂15.0g,酚红0.08g,蒸馏 水1000mLe ②制法：除粉红和琼脂外，将其他成分加入400mL蒸馏水中，者沸溶解，调节H 7,4402。另将琼脂加入600mL蒸馏水中，煮沸溶解。将上述两溶液混合均匀后，再加入指 示剂，待冷至50℃一55℃倾注平皿 注：①本培养基不需要高压灭菌，在制备过程中不宜过分加热，避免降低其选择性，贮于室温暗处。 ②本培养基宜于当天制备，第2天使用。 (7)三糖铁(TS)琼脂 ①成分：蛋白胨20.0g,牛肉膏5.0g乳糖10.0g 鸭00装。心牌0 g,琼脂12.0g,蒸馏水1000mL。 ②制法：除酚红和琼脂外，将其他成分加入4O0mL蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH 7,4+02。另将琼脂加入600mL蒸馏水中，煮沸溶解。将上述两溶液混合均匀后，再加入指 示剂，混匀，分装试管，每管约2mL~4mL,高压灭菌121℃10min或115℃15min,灭 菌后置成高层斜面 呈桔红色 (8)蛋白陈水（靛基质试验用）、靛基质试剂 ①蛋白胨水的制备 a.成分：蛋白陈（或胰蛋白陈）20.0g,氯化钠5.0g,蒸馏水1000mL。 .制法：将上述成分加入蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH7.402,分装小试管，121℃ 高压灭菌15 ②靛基质试剂 a.柯凡克试剂：将5g对二甲氨基甲醛溶解于75L戊醇中，然后缓慢加入浓盐酸25 mL。 b欧-波试剂：将1e对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内。然后缓慢加入浓盐 酸20mL 试验方法 用接种环将待检菌新鲜培养物接种于蛋白胨水溶液中，在36℃±1℃培养1d~2d,必要 时可培养4d~5d。于培养液中加入戊醇或二甲苯2mL~3mL,摇匀，静置片刻后，沿试管 壁加入柯凡克试剂或欧-波试剂约0.5mL,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。 (9)尿素琼脂(H72) ①成分：蛋白胨1.0g,氯化钠5.0g,葡萄糖1.0g,磷酸二氢钾2.0g,04%酚红3.0 mL,琼脂20.0g,蒸馏水1000mL,20%尿素溶液100mL。 ②制法：除尿素、琼脂和酚红外，将其他成分加入400mL蒸馏水中，煮沸溶解，调 节pH7.240.2。另将琼脂加入600mL蒸馏水中，煮沸溶解。将上述两溶液混合均匀后，再加 mL，Andrade 指示剂20.0 mL，甲液20.0 mL，乙液20.0 mL。 ② 制法：将前面七种成分溶解于400 mL 蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600 mL 蒸馏水内。然后分别搅拌均匀，煮沸溶解。加入甲液和乙液于基础液内，调节pH 7.5±0.2。 再加入指示剂，并与琼脂液合并，待冷至50℃～55℃倾注平皿。 注：①本培养基不需要高压灭菌，在制备过程中不宜过分加热，避免降低其选择性。②甲液的配制： 硫代硫酸钠 34.0 g，柠檬酸铁铵 4.0 g，蒸馏水 100 mL。③乙液的配制：去氧胆酸钠 10.0 g，蒸馏水 100 mL。④ Andrade 指示剂：酸性复红 0.5 g，1mol/L 氢氧化钠溶液 16.0 mL，蒸馏水 100 mL。将复红溶解 于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液。数小时后如复红褪色不全，再加氢氧化钠溶液1 mL～2 mL。 （6）木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂 ① 成分：酵母膏3.0 g，L-赖氨酸5.0 g，木糖3.75 g，乳糖7.5 g，蔗糖7.5 g，去氧胆酸 钠2.5 g，柠檬酸铁铵0.8 g，硫代硫酸钠6.8 g，氯化钠5.0 g，琼脂15.0 g，酚红0.08 g，蒸馏 水1 000 mL。 ② 制法：除酚红和琼脂外，将其他成分加入400 mL 蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH 7.4±0.2。另将琼脂加入600 mL蒸馏水中，煮沸溶解。将上述两溶液混合均匀后，再加入指 示剂，待冷至50℃～55℃倾注平皿。 注：①本培养基不需要高压灭菌，在制备过程中不宜过分加热，避免降低其选择性，贮于室温暗处。 ②本培养基宜于当天制备，第2天使用。 （7） 三糖铁（TSI）琼脂 ① 成分：蛋白胨20.0 g，牛肉膏5.0 g，乳 糖10.0 g，蔗糖10.0 g，葡萄糖1.0 g，硫酸亚 铁铵（含6个结晶水）0.2 g，酚红0.025 g或5.0 g/L溶液5.0 mL，氯化钠5.0 g，硫代硫酸钠0.2 g，琼脂12.0 g，蒸馏水1 000 mL。 ② 制法：除酚红和琼脂外，将其他成分加入400 mL蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH 7.4±0.2。另将琼脂加入600 mL蒸馏水中，煮沸溶解。将上述两溶液混合均匀后，再加入指 示剂，混匀，分装试管，每管约2 mL～4 mL，高压灭菌121℃ 10 min 或115℃ 15 min，灭 菌后置成高层斜面，呈桔红色。 （8）蛋白胨水（靛基质试验用）、靛基质试剂 ① 蛋白胨水的制备 a. 成分：蛋白胨（或胰蛋白胨） 20.0 g，氯化钠 5.0 g，蒸馏水 1 000 mL。 b. 制法：将上述成分加入蒸馏水中，煮沸溶解，调节pH 7.4±0.2，分装小试管，121℃ 高压灭菌15 min。 ② 靛基质试剂 a. 柯凡克试剂：将5 g对二甲氨基甲醛溶解于75 mL戊醇中，然后缓慢加入浓盐酸25 mL。 b. 欧-波试剂：将1 g对二甲氨基苯甲醛溶解于95 mL 95%乙醇内。然后缓慢加入浓盐 酸20mL。 ③ 试验方法 用接种环将待检菌新鲜培养物接种于蛋白胨水溶液中，在36℃±1℃培养1 d～2 d，必要 时可培养4 d～5 d。于培养液中加入戊醇或二甲苯2 mL～3mL，摇匀，静置片刻后，沿试管 壁加入柯凡克试剂或欧-波试剂约0.5 mL，阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。 （9）尿素琼脂（pH 7.2） ① 成分：蛋白胨1.0 g，氯化钠5.0 g，葡萄糖1.0 g，磷酸二氢钾2.0 g，0.4%酚红3.0 mL，琼脂20.0 g，蒸馏水1 000 mL，20%尿素溶液100 mL。 ② 制法：除尿素、琼脂和酚红外，将其他成分加入400 mL 蒸馏水中，煮沸溶解，调 节pH7.2±0.2。另将琼脂加入600 mL蒸馏水中，煮沸溶解。将上述两溶液混合均匀后，再加