(=NGS NGS(高酒量测序技术)是指酒过模板DNA分子的化学修饰。将其锚定在纳米孔或微载体 芯片 利用碱基互补配对原理，在DNA聚合酶链反应或DNA连接酶反应过程中，通过 采集荧光标记信号或化学反应信号，实现碱基序列的解读， -次性可完成几十万至上百万 序列的测定。 NGS是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。一代测序为合成终止测序，而 湿华测艇性的认7可道终止末球一从而安现边合皮边电 二代测序在DNA复制过 所添加的碱基所携带的特殊标记（一般为荧光分子标记）来确定DNA的序 列。 目前高通量测序的主要平合代表有罗氏公司(Rohe)的454测序仪(Roch GS FLX sequencer)),lumina公司的Solexa基因组分析仪(llumina Genome Analyzer)和ABl的 SOLiD测序仪（ABI SOLiD er). 主流NGS测序平台技术原理、特点及适用范围 公司 测序原理 然骑酸测序 可逆晓止亿争反应 4种奖光格纪率植普酸的 连接反应测序 序之前DN板通过乳 头，与DNA片段站合到珠上。 风R扩增。民e454的菜本动剂 且在国相的表面经过桥式扩增。这 CR反应发生在相珠上 网，及是园的更小，买有 形成了份构同的平分 合成边序的才法。根长配对 DNA横板，扩增，每个DN 威蒸蒙光拔针是合物。根展序列 NP原料枝加上去，不配时 分子可以得到寄，年个低味只 成像能能 夏，样品DNA可以被针 将引上d八TP的聚合与觉位 信号的产生 酰可以连行 释载偶联起未。 金D湖序、特录组测小 造用范璃 宏基因组研完等 甲盖化和表观通传学研究等 基回血重测序扣，图特 由于在二代测序中，单个DNA分子必须扩增成由相同DNA组成的基因簇，然后进行同步 复制，来增强荧光信号强度从而读出DNA序列；而随着读长增长，基因簇复制的协同性降 低，导致碱基测序质量下降，目前二代最长的读长是Miseq的600bp。二代测序适合打 增子测序（例如16S、18S、TS的可变区），而基因组、宏基因组DNA则需要使用鸟枪法 打断成小片段，测序完毕后再使用生物信息学方法进行拼接。 NGS原理图 （二）NGS NGS（高通量测序技术）是指通过模板 DNA 分子的化学修饰，将其锚定在纳米孔或微载体 芯片，利用碱基互补配对原理，在 DNA 聚合酶链反应或 DNA 连接酶反应过程 中，通过 采集荧光标记信号或化学反应信号，实现碱基序列的解读，一次性可完成几十 万至上百万 序列的测定。 NGS 是基于 PCR 和基因芯片发展而来的 DNA 测序技术。一代测序为合成终止测 序，而 二代测序开创性的引入了可逆终止末端，从而实现边合成边测序。二代测序在 DNA 复制过 程中通过捕捉新添加的碱基所携带的特殊标记（一般为荧光分子标记）来确定 DNA 的序 列。 目前高通量测序的主要平台代表有罗氏公司(Roche)的 454 测序仪（Roch GS FLX sequencer），Illumina 公司的 Solexa 基因组分析仪（Illumina Genome Analyzer）和 ABI 的 SOLiD 测序仪（ABI SOLiD sequencer）。 主流 NGS 测序平台技术原理、特点及适用范围 由于在二代测序中，单个 DNA 分子必须扩增成由相同 DNA 组成的基因簇，然后进行同步 复制，来增强荧光信号强度从而读出 DNA 序列；而随着读长增长，基因簇复制的协同性降 低，导致碱基测序质量下降，目前二代最长的读长是 Miseq 的 600bp。二代 测序适合扩 增子测序（例如 16S、18S、ITS 的可变区），而基因组、宏基因组 DNA 则需要使用鸟枪法 打断成小片段，测序完毕后再使用生物信息学方法进行拼接。 NGS 原理图