(8)显色:(以辣根过氧化物酶标记的抗体为例,常采用二氨基联苯胺 (DAB)为底物:称取6 mg daB溶于10ml50mM的 Tris-HCI中经 Whatman 滤纸过滤后,加入10u30%过氧化氢即可)。 9)方法:将膜置入一适当容器中,按照10ml/15×15cm2膜加入底物溶液 在室温下摇动显色至样品带出现时,随后用含20 MM EDTA的PBS停止反应, 室温晾干保存滤膜用于结果分析。 第五节抗体芯片 、蛋白芯片与抗体芯片 (一)蛋白芯片概述 由于基因转录水平的研究只能在一定程度上反映基因表达产物的变化,而真 正发挥功能的蛋白要经过转录后加工、翻译调控以及翻译后加工等许多步骤和调 控才能形成,因而对蛋白质的直接研究才能真实的解释各种生命现象。但是目前 研究蛋白质的手段和方法还没有很大的发展,所以寻找有效、快捷的蛋白分析技 术成为了至关重要的一个环节。蛋白芯片技术的出现给蛋白组学研究带来新思 路。蛋白质芯片也叫蛋白质微阵列( protein microarray),是将大量蛋白质有规律 地固定到某种介质载体上,利用蛋白质与蛋白质、酶与底物、受体与配体、抗原 与抗体、蛋白质与其他小分子之间的相互作用,借以检测和分析蛋白质的一种技 术 蛋白质芯片的应运而生既是基因芯片功能的延续又是进行蛋白组学研究的 需要。作为一种高通量的生物芯片技术,蛋白质芯片被广泛应用于构建蛋白质表 达谱,进行抗原-抗体筛选,药物靶点筛选,蛋白质-蛋白质相互作用等蛋白组学 研究。 蛋白质芯片主要有无活性( non living)和活性( liv ing)两种形式。无活性 的蛋白质芯片是通过将已经合成好的蛋白质探针点在芯片上制成,而有活性的芯 片则是在芯片上直接点上生物体(如细菌),通过在芯片上原位表达蛋白质来 发挥作用。活性芯片可以提供模拟的机体内环境,对于蛋白质功能分析更为有利（8）显色：（以辣根过氧化物酶标记的抗体为例，常采用二氨基联苯胺 （DAB）为底物：称取 6mg DAB 溶于 10ml 50mM 的 Tris-HCl 中,经 Whatman 滤纸过滤后,加入 10μl 30%过氧化氢即可）。 （9）方法：将膜置入一适当容器中，按照 10ml/15×15cm2 膜加入底物溶液， 在室温下摇动显色至样品带出现时，随后用含 20mM EDTA 的 PBS 停止反应， 室温晾干保存滤膜用于结果分析。 第五节 抗体芯片 一、蛋白芯片与抗体芯片 （一）蛋白芯片概述 由于基因转录水平的研究只能在一定程度上反映基因表达产物的变化，而真 正发挥功能的蛋白要经过转录后加工、翻译调控以及翻译后加工等许多步骤和调 控才能形成，因而对蛋白质的直接研究才能真实的解释各种生命现象。但是目前 研究蛋白质的手段和方法还没有很大的发展，所以寻找有效、快捷的蛋白分析技 术成为了至关重要的一个环节。蛋白芯片技术的出现给蛋白组学研究带来新思 路。蛋白质芯片也叫蛋白质微阵列 ( protein microarray)，是将大量蛋白质有规律 地固定到某种介质载体上，利用蛋白质与蛋白质、酶与底物、受体与配体、抗原 与抗体、蛋白质与其他小分子之间的相互作用，借以检测和分析蛋白质的一种技 术。 蛋白质芯片的应运而生既是基因芯片功能的延续又是进行蛋白组学研究的 需要。作为一种高通量的生物芯片技术，蛋白质芯片被广泛应用于构建蛋白质表 达谱，进行抗原-抗体筛选，药物靶点筛选，蛋白质-蛋白质相互作用等蛋白组学 研究。 蛋白质芯片主要有无活性（non living）和活性（living）两种形式。无活性 的蛋白质芯片是通过将已经合成好的蛋白质探针点在芯片上制成，而有活性的芯 片则是在芯片上直接点上生物体 (如细菌 ) ，通过在芯片上原位表达蛋白质来 发挥作用。活性芯片可以提供模拟的机体内环境，对于蛋白质功能分析更为有利 一些