再将以上试剂按下述比例混合:淡绿常备液45l,伊红常备液45m,俾氏麦棕常备液10ml。最后将磷钨酸0.2g 溶于少许蒸馏水中加入混合液中,然后再加碳酸锂饱和溶液一滴。 (4)EA31液淡绿常备液50m1伊红常备液40ml,磷钨酸0.17g余者同EA36。 (5)EA65液与EA36相比含淡绿成分一半份量 (6)EA50液3%淡绿10ml,纯甲醇250ml,20%伊红Y20ml,冰醋酸20ml,磷钨酸2.0g,95%乙醇700ml。 2.常规染色步骤 (1)将固定好的涂片投入95%乙醇→80%乙醇→蒸馏水或自来水中,各2min (2) Harris苏木素液浸染3-5min (3)自来水中冲洗3-5min (4)0.25%-0.5%盐酸水溶液分化1-2s (5)自来水洗1-2s。 (6)稀碳酸锂(l00ml蒸馏水中加碳酸锂饱和液1滴)返蓝30s,自来水洗3min (7)依次置入70%乙醇→80%乙醇→95%乙醇各lmin (8)橘黄G6液0.5-1min (9)95%乙醇Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各1min (10)置入入EA类染液(EA36、EA31、EA50、EA65)选其中一种染色3-5min (11)95%乙醇Ⅰ、Ⅱ各lmin (12)无水乙醇I、Ⅱ各1min (13)二甲苯Ⅰ、Ⅱ各2min (14)中性树胶封固 3.染色结果胞核为蓝紫色,核仁深紫色。鱗状上皮细胞表层完全角化细胞为橘黄色;表层不完全角化细胞为粉 红色:中层和外底层细胞为浅绿色和浅蓝色:内底层细胞为蓝灰色 高分化鳞癌细胞可染成粉红色或橘黄色:腺癌胞浆为蓝灰色。 中性粒细胞和淋巴细胞,吞噬细胞浆均为蓝色。 红细胞为粉红色,嗜酸性粒细胞浆内颗粒仍为红色。 该染色方法具有多色性染色特性,色彩多样且鲜艳,细胞核结构清晰,胞浆颗粒分明,涂片染色的透明性好 细胞的角度与细胞重叠不影响检査。适用于上皮细胞染色,尤适用于鳞状上皮的分化程度的观察,如阴道涂片观察 女性激素水平 4注意事项 (1)苏木素液用前须过滤,补充少许新液,以使涂片无苏木素沉渣并保证苏木素液维持足够浓度。 (2)苏木素染液提前月余配制,待苏木精充分氧化为苏木素再将以上试剂按下述比例混合：淡绿常备液45ml，伊红常备液45ml，俾氏麦棕常备液10ml。最后将磷钨酸0.2g 溶于少许蒸馏水中加入混合液中，然后再加碳酸锂饱和溶液一滴。   (4)EA31液淡绿常备液50ml伊红常备液40ml，磷钨酸0.17g余者同EA36。   (5)EA65液与EA36相比含淡绿成分一半份量。   (6)EA50液 3%淡绿10ml，纯甲醇250ml，20%伊红Y20ml，冰醋酸20ml，磷钨酸2.0g，95%乙醇700ml。   2.常规染色步骤   (1)将固定好的涂片投入95%乙醇→80%乙醇→蒸馏水或自来水中，各2min。   (2)Harris苏木素液浸染3-5min。   (3)自来水中冲洗3-5min。   (4)0.25%-0.5%盐酸水溶液分化1-2s。   (5)自来水洗1-2s。   (6)稀碳酸锂（100ml蒸馏水中加碳酸锂饱和液1滴）返蓝30s,自来水洗3min。   (7)依次置入70%乙醇→80%乙醇→95%乙醇各1min。   (8)橘黄G6液0.5-1min。   (9)95%乙醇Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各1min。   (10)置入入EA类染液（EA36、EA31、EA50、EA65)选其中一种染色3-5min。   (11)95%乙醇Ⅰ、Ⅱ各1min。   (12)无水乙醇Ⅰ、Ⅱ各1min。   (13)二甲苯Ⅰ、Ⅱ各2min。   (14)中性树胶封固。   3.染色结果胞核为蓝紫色，核仁深紫色。鳞状上皮细胞表层完全角化细胞为橘黄色；表层不完全角化细胞为粉 红色；中层和外底层细胞为浅绿色和浅蓝色；内底层细胞为蓝灰色。   高分化鳞癌细胞可染成粉红色或橘黄色；腺癌胞浆为蓝灰色。    中性粒细胞和淋巴细胞，吞噬细胞浆均为蓝色。    红细胞为粉红色，嗜酸性粒细胞浆内颗粒仍为红色。    该染色方法具有多色性染色特性，色彩多样且鲜艳，细胞核结构清晰，胞浆颗粒分明，涂片染色的透明性好， 细胞的角度与细胞重叠不影响检查。适用于上皮细胞染色，尤适用于鳞状上皮的分化程度的观察，如阴道涂片观察 女性激素水平。   4.注意事项   (1)苏木素液用前须过滤，补充少许新液，以使涂片无苏木素沉渣并保证苏木素液维持足够浓度。   (2)苏木素染液提前月余配制，待苏木精充分氧化为苏木素