3.压拉法适用于较黏稠液体或块标本的制片。将标本夹于横竖交叉的两张玻片之间,然后移动上下玻片,使 其重叠,再边压边拉,一次可得两张涂片。 4.喷射法适用于各种吸取的液体标本制片。距玻片2~3cm高处,将吸管内的标本反复喷射在玻片上,喷射涂 抹要均匀,每边距离片缘2cm为宜 5.印片法为活体组织检查的辅助方法。将切取的病变组织块,用手术刀切开,立即将切面平放于玻片上,轻 轻按印。 6.自动涂片机用机器进行自动制片。如液基细胞学技术( liquid basedcytology,LBC),是一种半自动或全 自动标本处理新技术,将刷取或灌洗法采集的标本,放在特殊的运送液或保存液中,制成细胞悬液,经过进一步处 理,除去血液、蛋白和炎性渗出物,制成分布均匀的薄片。其优点是:①涂片上细胞分布均匀、分布范围小、背景 清晰。②标本筛査简便、快速。③能提髙诊断灵敏度和特异度。④能显著降低标本的不满意率。⑤能用于原位杂交 和免疫细胞化学染色。LBC技术是对传统标本处理方法的有效补充,但对某些非妇科标本,因LBC涂片缺乏背景成 分,会影响细胞学诊断 (三)固定方法 细胞学标本制成涂片后要立即固定。目的主要是保持细胞形态尽量与生活时相似,防止细胞自溶和细菌所致腐 败。固定愈及时,细胞愈新鲜,染色效果愈好。固定方法: 1.湿固定涂片不待干燥,即放入固定液内,细胞着色鲜艳,结构清晰。适宜用巴氏染色或染色。在痰、阴道 和食管拉网涂片中较常用。 2.干固定待涂片稍干后再放入固定液,适用端氏( Wright)、姬姆萨( Giemasa)染色。 因固定液和标本性质不同而异,一般需要固定15-30min以上。 常用固定液: 1.等量95%乙醇和乙醚混合液95%乙醇49.5m1,乙醚49.5m1,冰醋酸1.0m1 2.氯仿乙醇固定液( Carnoy固定液)无水乙醇60ml,氯仿30m1,冰醋酸10ml。 3.95%乙醇固定液 4.福尔马林固定液福尔马林原液稀释5-10倍。多聚甲醛(用于原位PCR) (四)染色方法 巴氏( Papanicoloan)染色的操作方法 1.试剂配制 (1) Harris苏木素染液(配l00om1)苏木素5g,95%乙醇50ml,亚明矾(硫酸铝氨)100g,蒸馏水1000ml,黄 色氧化汞2.5g。详见第一章第三节 (2)橘黄Gδ取橘黄G0.5g溶解于5ml蒸馏水中,完全溶解后加入无水乙醇至100m,再加入0.015g磷钨酸。使用 前过滤,存储在深棕色瓶中 (3)EA36溶液配制为三种染料配合而成,先配制原液(常备液)。 ①淡绿:0.5g溶在5ml蒸馏水中,可温水浴使之完全溶解,然后把无水乙醇加至100ml ②伊红:0.5g溶于5m1蒸馏水,然后加无水乙醇至100ml。 ③俾氏麦棕:0.5g溶于5m1蒸馏水,然后加无水乙醇至100m13.压拉法 适用于较黏稠液体或块标本的制片。将标本夹于横竖交叉的两张玻片之间,然后移动上下玻片,使 其重叠,再边压边拉,一次可得两张涂片。 4.喷射法 适用于各种吸取的液体标本制片。距玻片2~3cm高处,将吸管内的标本反复喷射在玻片上,喷射涂 抹要均匀,每边距离片缘2cm为宜。 5.印片法 为活体组织检查的辅助方法。将切取的病变组织块,用手术刀切开,立即将切面平放于玻片上,轻 轻按印。 6.自动涂片机用机器进行自动制片。如液基细胞学技术(liquid basedcytology,LBC),是一种半自动或全 自动标本处理新技术,将刷取或灌洗法采集的标本,放在特殊的运送液或保存液中,制成细胞悬液,经过进一步处 理,除去血液、蛋白和炎性渗出物,制成分布均匀的薄片。其优点是:①涂片上细胞分布均匀、分布范围小、背景 清晰。②标本筛查简便、快速。③能提高诊断灵敏度和特异度。④能显著降低标本的不满意率。⑤能用于原位杂交 和免疫细胞化学染色。LBC技术是对传统标本处理方法的有效补充,但对某些非妇科标本,因LBC涂片缺乏背景成 分,会影响细胞学诊断。 (三)固定方法 细胞学标本制成涂片后要立即固定。目的主要是保持细胞形态尽量与生活时相似,防止细胞自溶和细菌所致腐 败。固定愈及时,细胞愈新鲜,染色效果愈好。固定方法: 1.湿固定涂片不待干燥,即放入固定液内,细胞着色鲜艳,结构清晰。适宜用巴氏染色或HE染色。在痰、阴道 和食管拉网涂片中较常用。 2.干固定待涂片稍干后再放入固定液,适用端氏(Wright)、姬姆萨(Giemasa)染色。 因固定液和标本性质不同而异,一般需要固定15-30min以上。 常用固定液: 1.等量95%乙醇和乙醚混合液 95%乙醇49.5ml,乙醚49.5ml,冰醋酸1.0ml。 2.氯仿乙醇固定液(Carnoy固定液)无水乙醇60ml,氯仿30ml,冰醋酸10ml。 3.95%乙醇固定液。 4.福尔马林固定液福尔马林原液稀释5-10倍。多聚甲醛(用于原位PCR)。 (四)染色方法 巴氏(Papanicoloan)染色的操作方法 1.试剂配制 (1)Harris苏木素染液(配1000ml) 苏木素5g,95%乙醇50ml,亚明矾(硫酸铝氨)100g,蒸馏水1000ml,黄 色氧化汞2.5g。详见第一章第三节。 (2)橘黄G6 取橘黄G 0.5g溶解于5ml蒸馏水中,完全溶解后加入无水乙醇至100ml,再加入0.015g磷钨酸。使用 前过滤,存储在深棕色瓶中。 (3)EA36溶液配制为三种染料配合而成,先配制原液(常备液)。 ①淡绿:0.5g溶在5ml蒸馏水中,可温水浴使之完全溶解,然后把无水乙醇加至100ml。 ②伊红:0.5g溶于5ml蒸馏水,然后加无水乙醇至100ml。 ③俾氏麦棕:0.5g溶于5ml蒸馏水,然后加无水乙醇至100ml