物又称为“自杀底物( suicide substrate)”。如3,5/4,6-环己烯四醇B环氧化物具有与葡萄糖吡喃 环相似的结构,它对糖苷酶有很高的亲和力,分子内潜在的化学活性基团——环氧环在酶的催化 作用下,发生类似底物质子化的变化而受到活化,变成对酶有高度反应活性的基团,能专一地不 可逆地作用不同来源的β葡萄糖苷酶 C.光亲和标记 个在无光时稳定的化合物可逆地结合到酶的活性中心,照光后受光解激活,产生高反应性 基团,与酶的活性中心共价结合。0 hy 常见的试剂是光解时给出高度易 R-C-CH R-M3—)R-N: 碳烯 硝烯 反应的碳烯的重氮化合物或硝烯 的叠氮化合物。 在植物生理学中,用氚偶氮一IAA作光亲和标记试剂,经紫外光照射后,从番茄茎细胞质膜 上分离出了IAA受体蛋白。 表、某些常用的修饰剂 氨基酸残基 修饰剂 C 汞制剂,如对氯汞苯甲酸;二硫化物,如5,5′—二硫二(2-硝基苯甲酸) 碘乙酰胺 L 24,6-三硝基苯磺酸:磷酸吡哆醛(±还原试剂如NaBH4) His 二乙基焦碳酸盐:光氧化 Ar 苯乙二醛;2,3-丁二酮 四硝基甲烷:N-乙酰咪唑 Trp ;N-溴代丁二酰亚胺 A9,Gu水溶性碳二亚胺+亲核试剂如Gly甲酯 鉴别化学修饰剂是否已经引入酶的10 with substrate 活性中心,有下列两个标准 No substrate a.酶活性的丧失程度与修饰的程度成正 比 degree of mo duficaf5 物又称为“自杀底物（suicide substrate）”。如 3,5/4,6-环己烯四醇 B 环氧化物具有与葡萄糖吡喃 环相似的结构，它对糖苷酶有很高的亲和力，分子内潜在的化学活性基团——环氧环在酶的催化 作用下，发生类似底物质子化的变化而受到活化，变成对酶有高度反应活性的基团，能专一地不 可逆地作用不同来源的β－葡萄糖苷酶。 C．光亲和标记 一个在无光时稳定的化合物可逆地结合到酶的活性中心，照光后受光解激活，产生高反应性 基团，与酶的活性中心共价结合。 常见的试剂是光解时给出高度易 反应的碳烯的重氮化合物或硝烯 的叠氮化合物。 在植物生理学中，用氚偶氮—IAA 作光亲和标记试剂，经紫外光照射后，从番茄茎细胞质膜 上分离出了 IAA 受体蛋白。 表、某些常用的修饰剂 氨基酸残基 修 饰 剂 Cys 汞制剂，如对氯汞苯甲酸；二硫化物，如 5,5＇－二硫二（2-硝基苯甲酸）； 碘乙酰胺 Lys 2,4,6-三硝基苯磺酸；磷酸吡哆醛（±还原试剂如 NaBH4） His 二乙基焦碳酸盐；光氧化 Arg 苯乙二醛；2,3-丁二酮 Tyr 四硝基甲烷；N-乙酰咪唑 Trp 碘；N-溴代丁二酰亚胺 Asp, Glu 水溶性碳二亚胺＋亲核试剂如 Gly 甲酯 鉴别化学修饰剂是否已经引入酶的 活性中心，有下列两个标准： a．酶活性的丧失程度与修饰的程度成正 比