类。因此2,4-二硝基氟苯法可用于鉴定多肽或蛋白质的N-末端氨基酸（图24）。 H O 0 ON〈-F+HN Gly-Asp-PheArg一GlyC pH8-9 H HO 0 ON〉-N-C-C-Gly-Asp-Phe-Arg-Gly-C 0 0N-NCC0 Gly. he.Gily NO:CH 图242.4二硝基氟苯法 (三)氨基酸与苯异硫氰酸(PITC)的反应 此反应叉称艾德曼反应(Eman eaction心。在弱碱性条件下，氨基酸的a复基可与 苯异硫氰酸(phenylisothiocyanate,PTG)反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸（简称PTC 氨基酸)。在酸性条件下，PTC氨基酸环化形成在酸中稳定的苯乙内酰硫脲氨基酸 (phenylthiohydantoin,简称PTH)。蛋白质多肽链N-末端氨基酸的a-氨基也可有此反应， 生成TC肽，在酸性溶液中释放出末端的TH氨基酸和比原来少一个氨基酸残基的名 肽链（图25）。PTH氨基酸在酸性条件下极稳定并可溶于乙酸乙酯，用乙酸乙酯抽提后 经高压液相层析鉴定就可以确定肽链N末端氨基酸的种类。该法的优点是可连续分析出 N端的十几个氨基酸.瑞典科学家P.Edman首先使用该反应测定蛋白质N-末端的氨基酸。 氨基酸自动顺序分析仪就是根据该反应原理而设计的。 2424 类。因此 2,4-二硝基氟苯法可用于鉴定多肽或蛋白质的 N-末端氨基酸（图 2-4）。 图 2-4 2,4-二硝基氟苯法 （三）氨基酸与苯异硫氰酸（PITC）的反应 此反应又称艾德曼反应（Edman reaction）。在弱碱性条件下，氨基酸的α-氨基可与 苯异硫氰酸（phenylisothiocyanate, PITG）反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸（简称 PTC- 氨基酸）。在酸性条件下，PTC-氨基酸环化形成在酸中稳定的苯乙内酰硫脲氨基酸 （phenylthiohydantoin，简称 PTH）。蛋白质多肽链 N-末端氨基酸的α-氨基也可有此反应， 生成 PTC-肽，在酸性溶液中释放出末端的 PTH-氨基酸和比原来少一个氨基酸残基的多 肽链（图 2-5）。PTH-氨基酸在酸性条件下极稳定并可溶于乙酸乙酯，用乙酸乙酯抽提后， 经高压液相层析鉴定就可以确定肽链 N-末端氨基酸的种类。该法的优点是可连续分析出 N 端的十几个氨基酸。瑞典科学家 P. Edman 首先使用该反应测定蛋白质 N-末端的氨基酸。 氨基酸自动顺序分析仪就是根据该反应原理而设计的