正常牛乳中体细胞含量一般每毫升不超过50万个,平均每毫升26万个。当奶牛患有乳房炎 时,乳中体细胞数每毫升超过50万个。为了防止乳房炎乳混入原料乳中,可采取体细胞计 数(somatic llcount)的方法检测乳房炎乳 5.电导率测定正常牛乳的电导率为0.004~0.005Scm。奶牛忠乳房疾病时,乳中盐 类含量增加,电导率增高为0.0065~0.0130S/cm。可用电导率仪测定乳的电导率来检测乳房 炎乳。 此外,还可采取用浪鹰香草酚蓝(BTB)检验法、过氧化氢酯法(H,O,玻片法)、羟过 (烷基)硫酸盐检测法(CMT)等方法检测乳房炎乳 三、原料乳与乳制品中三聚氰胺的测定 GB/T22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》规定了原料乳、乳制品以 及含乳制品中三聚氰胺的三种测定方法,即高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱-质谱/度 谱法(LC MS/MS) 和气相色谱质谱联用法包括气相色谱-质谱法(GC.MS ,气相色谱 质谱/质谱法(GC-MSMS)。 高效液相色谱法的定量限为2mgkg,液相色谱-质谱/质谱法的定量限为0.01mg/kg,气 相色谱-质谱法的定量限为0.05mgkg(其中气相色谱-质谱/质谱法的定量限为0.005 吧kg)。具体应用时应根据检测对象及其限量的规定以及实验室条件,选用与其相适应 的检测方法。现仅介绍第 一种方法即高效液相色谱法(HPLC)。 原理 试样用三氯乙酸溶液-乙睛提取,经阳离子交换固相萃取柱净化后,用高效液相色谱测 定,外标法定量。 (二)试剂 除另有说明,所有试剂均为分析纯,水为GBT6682规定的一级水 (1)甲醇 色谱纯 (2)乙晴:色谱纯 (3)氨水:含量为25%28% (4)三氯乙酸 (5)柠檬酸。 (6)辛 磺酸钠色谱纯 (7)甲醇水溶液准确量取50mL甲醇和50mL水,混匀后备用。 (8)三氯乙酸溶液(1%)准确称取10g三氯乙酸于1L容量瓶中,用水溶解并定容 至刻度,混匀后备用。 (9)氨化甲醇溶液(5%)准确量取5mL.氨水和95mL甲,混匀后各用 (10)离子对试剂缓冲液准确称取2.10柠檬酸和2.16g辛烷磺酸钠,加入约980ml 水溶解,调节pH至3.0后 ,定容至1L备用。 (11)三聚氯胺标准品CAS108-78-01,纯度大于99.0%。 (12)三聚氰胺标准储备液准确称取100mg(精确到0.1mg)三聚氰胺标准品于100 mL容量瓶中,用甲醇水溶液溶解并定容至刻度,配制成浓度为1mgmL的标准储备液 千4℃避光保存 (13)海 化学纯,粒度0.65mm~0.85mm, 氧化硅(Si02)含量为99% (三)器材 (1)高效液相色谱(HPLC)仪:配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 (2)分析天平:感量为0.0001g和0.01g。正常牛乳中体细胞含量一般每毫升不超过 50 万个,平均每毫升 26 万个。当奶牛患有乳房炎 时,乳中体细胞数每毫升超过 50 万个。为了防止乳房炎乳混入原料乳中,可采取体细胞计 数(somatic cell count)的方法检测乳房炎乳。 5.电导率测定 正常牛乳的电导率为 0.004~0.005 S/cm。奶牛患乳房疾病时,乳中盐 类含量增加,电导率增高为 0.0065~0.0130 S/cm。可用电导率仪测定乳的电导率来检测乳房 炎乳。 此外,还可采取用溴麝香草酚蓝(BTB)检验法、过氧化氢酶法(H2O2 玻片法)、羟基 (烷基)硫酸盐检测法(CMT)等方法检测乳房炎乳。 三、原料乳与乳制品中三聚氰胺的测定 GB/T 22388—2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》规定了原料乳、乳制品以 及含乳制品中三聚氰胺的三种测定方法,即高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱-质谱/质 谱法(LC-MS/MS)和气相色谱-质谱联用法[包括气相色谱-质谱法(GC-MS),气相色谱- 质谱/质谱法(GC-MS/MS)。 高效液相色谱法的定量限为2 mg/kg,液相色谱-质谱/质谱法的定量限为0.01 mg/kg,气 相色谱-质谱法的定量限为0.05 mg/kg(其中气相色谱-质谱/质谱法的定量限为0.005 mg/kg)。具体应用时应根据检测对象及其限量的规定以及实验室条件,选用与其相适应 的检测方法。现仅介绍第一种方法即高效液相色谱法(HPLC)。 (一)原理 试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取,经阳离子交换固相萃取柱净化后,用高效液相色谱测 定,外标法定量。 (二)试剂 除另有说明,所有试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。 (1)甲醇:色谱纯。 (2)乙腈:色谱纯。 (3)氨水:含量为25%~28%。 (4)三氯乙酸。 (5)柠檬酸。 (6)辛烷磺酸钠 色谱纯。 (7)甲醇水溶液 准确量取50 mL 甲醇和50 mL 水,混匀后备用。 (8)三氯乙酸溶液(1%) 准确称取10 g三氯乙酸于1 L 容量瓶中,用水溶解并定容 至刻度,混匀后备用。 (9)氨化甲醇溶液(5%) 准确量取5 mL 氨水和95 mL 甲醇,混匀后备用。 (10)离子对试剂缓冲液 准确称取2.10 g柠檬酸和2.16 g辛烷磺酸钠,加入约980 mL 水溶解,调节pH 至3.0后,定容至1 L备用。 (11)三聚氰胺标准品 CAS 108-78-01,纯度大于99.0%。 (12)三聚氰胺标准储备液 准确称取100 mg(精确到0.1 mg)三聚氰胺标准品于100 mL 容量瓶中,用甲醇水溶液溶解并定容至刻度,配制成浓度为1 mg/mL 的标准储备液, 于4℃避光保存。 (13)海砂 化学纯,粒度0.65 mm~0.85 mm,二氧化硅(SiO2)含量为99%。 (三)器材 (1)高效液相色谱(HPLC)仪:配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 (2)分析天平:感量为0.0001 g和0.01 g