199832(4):9~12/叶雪平等 中国兽药杂志 ·11 ZC-7901或CP80细胞病毒株ZV-8909 快、物质消耗低污染机会少,同时还具有容 量大、自动化程度高的将点,从而能满足工厂 细胞瓶静止传代培养 在ZC-7901或CP80 化生产的要求 细胞中吸附培养 通过3种生产草鱼出血病细胞疫苗的方 旋转管扩大培养细胞 在ZC-790或CP80 法比较,结果显示,细胞生物反应器微载体培 细胞中适应培养 养法不仅产量高,而且成本低,表现出其在草 鱼出血病细胞疫苗生产中的优越性。有资料 细胞生物反应器增殖细胞旋转管扩大培养病毒表明,在医学和兽医学方面国外应用细胞生 细胞生物反应器增殖病毒一收获病毒测定毒力 物反应器增殖动物细胞进行了较多的研究, 并已用于各类疫苗、干扰素、单克隆抗体等生 收获病毒并测定毒力 物制品的工厂化生产。国内这方面的研究和 应用也有了较快的发展,但尚无用于鱼类细 福尔马林灭活;加佐剂和增效剂 胞培养和疫苗生产的报道。目前,我国已有国 产的生物反应器和微载体因此应用细胞生 检验(无菌性、安全性、保护率测定 物反应器工厂化生产草鱼出血病细胞疫苗有 分装4C保存 着良好的发展前景 图1细胞疫苗工厂化生产工艺流程图 参考文献 张念慈,杨广智,草鱼出血病病毒在ZC-7901细胞株 讨论 中适应培养及其病毒培养物的某些生物特性,鱼病简 细胞疫苗制备工艺主要有方瓶静置培养 讯,1986(2) 2曹铮,沈锦玉,罗毅志等,鱼类细胞的旋转管培养法 法、旋转管培养法、多表面繁殖器、塑料螺旋 管转瓶法、毛细管繁殖器、悬浮培养法以及细3叶雪平杨广智,罗毅志等.细胞生物反应器大规櫚培 胞生物反应器微载体培养法。其中细胞生物 养草鱼细胞和病毒,水产学报、1992.第16卷第1期 反应器微载体培养法是近期发展起来的先进 杨广智张念慈,叶雪平等,草鱼出血病细胞疫苗制备 技术。由于该技术具有细胞生长面积大、速度 技术研究.鱼病简讯,199041 Studies on Technology of Grass Carp Haemorrhage Inactive Vaccine Production YE Xueping, YANG Guangzhi, LUO Yizhi, CHAO zhen Zhejiang Institute of Freshwater Fisheries, Huzhou 313001 Abstract Studies had been conducted on comparing the efficiency of cell and virus multiplicaion by three culture methods, stationary culture in normal culture flasks, rotating culture in 200ml columned culture flasks and microcarrier suspension culture in bio-reactor Results showed that the last method was most eff Its cell multiplication per unit liquid ulture media was 20 to 25 times. virus reproduction assessed by TCIDso 1.65 common logarithm values and by LDso 1. 45 common logarithm values more than those of the first method. Economically, the cost of liquid culture media for the vaccine prepared by the third1998，32(4)：9～12／叶雪平 等 中国兽 药杂志 zc一7901或 CP80细胞 t 细胞瓶静止 传代培 养 旋转管扩大 培养细胞 病毒株 zv 8909 在 ZC一7901或 CP 80 细胞中吸附培养 在 ZC 790或 CP一80 细胞 中适应培 养 细胞生物反应器增殖细胞 旋转管扩大培养病毒 ‘ 细胞生物反应器增殖病毒一—— 收获病 毒、测定毒力 ‘ 一收获病毒井测定毒力 福尔马林灭 活}加佐剂和增效荆 检验 (无菌性 、安全性 、保护率测 定) + 分装 4c保存 囝 1 细胞疫苗工厂化生产工艺流程囝 3 讨 论 细胞疫苗制备工艺主要有方瓶静置培养 法、旋转管培养法 、多表面繁殖器、塑料螺旋 管转瓶法、毛细管 繁殖器、悬浮培养法以及细 胞生物反应器微载体培养法 其中细胞生物 反应器微载体培养法是近期发展起来的先进 技术 由于该技术具有细胞生长面积太、速度 快 、物质消耗低 、污染机会少 ，同时还具 有容 量大、自动化程度高 的特点 ，从而能满足工厂 化生产的要求 通过 3种生产草鱼出血病细胞疫苗的方 法 比较 ，结果显示 ，细胞生物反应器微载体培 养法不仅产量高 ，而且成本低，表现出其在草 鱼 出血病细胞疫苗生产中的优越性 。有资料 表明，在医学和兽医学方面 ，国外应用细胞生 物 反应器增殖动物细胞进行了较多 的研究 ， 并 已用于各类疫苗 、干扰素、单克隆抗体等生 物制品的工厂化生产 。国内这方面的研究和 应用也有了较快 的发展 ，但 尚无用于鱼类细 胞培养和疫苗生产的报道 目前 ，我国 已有国 产的生物 反应器和微载体 ，因此应用细胞生 物反应器工 厂化生产草鱼出血病细胞疫苗有 着良好的发展前景。 参考 文献 1 张 忠慈，扬广智 草 鱼出血病病 毒在 ZC 7901细 胞株 中适 应培养及其病 毒培养物 的某些 生物特性．鱼病 简 讯 ，1986(2／ 2 曹 铮，沈锦 玉．罗毅志 等．鱼类 细胞 的旋 转管培 养 法． 鱼病简讯 、1988(1) 3 叶雪 平 ，扬广 智 ，罗毅志等 细胞生物 反应器 大规模培 养草鱼细胞和 病毒 水产学报．1992，第 l6卷 第 1期 4 扬广智 ，张念慈 ．叶雪 平等 ．草 鱼出血病 细胞 疫苗制备 技术研 究 鱼病简讯 ，1996(11 Studieson TechnologyofGrassCarp H aem orrhage Inactive Vaceine Production YE Xueping，YANG Guangzhi，LUO Yizhi，CHA0 zhen Z iang Institute ofFreshwaterFisheries．H uzhou 313001 Abstract Studies had been conducted on comparing the efficiency of eell and virus muhiplicaion bythreeculturemethods，stationarycultureinnormalcultureflasks，rotating culture in 200mlpolumned cultureflasksand microcarriersuspension culture in bio—reactor． Resuhsshowed thatthelastmethod Ⅳasmostefficient． Itscellmultiplication perunltliquid culture m edia was 20 to 25 times， virus reproduction assessed by TCID50 1．65 comm on logarithm values and by LD 1 45 comm on logarithm values m ore than those ofthe first m ethod．Econom ically，thecostofliquidculturemediaforthevaccinepreparedby thethird 维普资讯 http://www.cqvip.com