三、微生物的数量测定 1.计数方法 ()稀释涂布平板法统计结果一般用 而不是用 来表示 般统计的菌落数比活菌的实际数目 因为当两个或多个细胞连在一起时 平板上观察到的只是 计算公式：每毫升样品中的菌落数=(C÷门×M,其中C代表某一稀释度下平板上生长 ,V代表涂布平板时所用的 mL)M代 (2)显微镜直接计数法：是一种常用的 的测定微生物数量的方法。 统计的结果一般是 和 的总和。 (3)两种计数方法的比较 方法微镜直接计数法 稀释涂布平板法 生要用显微镜、细菌计数板 或血细胞计数板 计数依 培养基上 数 优点计数方便、操作简单 计数的是 点 操作较复杂 不能区分 且有一定误若 每毫升原液含菌落数=400x1000x每小格平均 每毫升原液含菌落数（平均菌落数÷所用涂布 式 南落数×稀释倍数 液体积)×稀释倍数 2.探究实践 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (1)土壤取 细菌适宜在 接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表3~8cm的 土壤层。因此，取样时一般要铲去 (2)制备培养基 培养基作为」 氨源的 培养基做实验组，用来判断」 是否具有选择作用 (3)样品的稀程 在酒精灯火焰旁称取10g土壤，放入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，振荡使土壤与水充分 混合，将细菌分散，制成10倍土壤稀释液。用一支1mL无菌吸管从中吸取1mL土壤悬液注 入盛有9mL无菌水的试管中，吹吸三次，充分混匀，制成10倍的土壤稀释液。依次类推，制成 103、10 、10倍的土壤稀释液 (4)培养与观察 将平板倒置于 _的温度下培养1~2d,每隔24h统计一次菌落数目。 (⑤)南落计数 当南落数目稳定时洗取菌落数在 的平板进行计数，同一稀释度下至少计 数3个平板，求出 并根据所对应的稀释度计算出样品」 ■■■■课堂探究 一、1，如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来培养基的 配方该如何设计？ 三、微生物的数量测定 1.计数方法 (1)稀释涂布平板法:统计结果一般用 而不是用 来表示。 一般统计的菌落数比活菌的实际数目 ,因为当两个或多个细胞连在一起时, 平板上观察到的只是 。 计算公式:每毫升样品中的菌落数=(C÷V)×M,其中 C 代表某一稀释度下平板上生长 的 ,V 代表涂布平板时所用的 (mL),M 代 表 。 (2)显微镜直接计数法:是一种常用的、 的测定微生物数量的方法。 统计的结果一般是 和 的总和。 (3)两种计数方法的比较 方法 显微镜直接计数法 稀释涂布平板法 主要用 具 显微镜、细菌计数板 或血细胞计数板 计数依 据 培养基上 数 优点 计数方便、操作简单 计数的是 缺点 不能区分 操作较复杂 且有一定误差 计算公 式 每毫升原液含菌落数=400×1 000×每小格平均 菌落数×稀释倍数 每毫升原液含菌落数=(平均菌落数÷所用涂布 液体积)×稀释倍数 2.探究实践——土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (1)土壤取样 细菌适宜在 接近中性的潮湿土壤中生长,绝大多数分布在距地表3~8 cm的 土壤层。因此,取样时一般要铲去 。 (2)制备培养基 用 培养基作为 ,用以 为 氮源的 培养基做实验组,用来判断 是否具有选择作用。 (3)样品的稀释 在酒精灯火焰旁称取10 g土壤,放入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,振荡使土壤与水充分 混合,将细菌分散,制成 101 倍土壤稀释液。用一支 1 mL 无菌吸管从中吸取 1 mL 土壤悬液注 入盛有 9 mL 无菌水的试管中,吹吸三次,充分混匀,制成 102 倍的土壤稀释液。依次类推,制成 103、104、 、 、107 倍的土壤稀释液。 (4)培养与观察 将平板倒置于 的温度下培养 1~2 d,每隔 24 h 统计一次菌落数目。 (5)菌落计数 当菌落数目稳定时,选取菌落数在 的平板进行计数,同一稀释度下至少计 数 3 个平板,求出 ,并根据所对应的稀释度计算出样品中 。 课堂探究 一、1.如果让你配制一种培养基,将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来,培养基的 配方该如何设计?