(5) 漂洗液:45ml 乙醇+5ml 冰醋酸+50ml H2O。 2、器材:(1) 平板电泳槽 4 台(2) 滤纸 12cm 1 盒(3)刀片 12 片。 (十五)分光光度法-高锰酸钾吸收曲线的绘制 1、试剂:(1)0.0125% KmnO4 (100ml) :0.0125g KmnO4 加水至 100ml。 2、器材:(1)722 分光光度计 25 台。 (十六)实验二十五、核酸的含量测定 二苯胺显色法测定 DNA 的含量和地衣酚显色法测定 RNA 的含量(测试) 1.试剂: (1) DNA 标准液(1000ml,200μg/ml):取 DNA 钠盐 0.2g 以 0.01N NaOH 溶解至 1000ml 溶液。 (2) 样品液:用 0.01N NaOH 冲稀或用 0.05gDNA 溶解至 500ml 溶液。 (3) 二苯胺试剂(4000ml,分 2 瓶):40g 二苯胺+4000ml 冰乙酸+400ml 高氯酸; 先配 100ml 1.6%乙醛(1.6ml 原液加水至 100ml),临用前 2000ml 加 20ml。 (4) RNA 标准液(1000ml):取 0.1g 加水至 1000ml。 (5) RNA 样品液(500ml):取 0.03g 加水至 500ml。 (6) 地衣酚试剂(2000ml,分 2 瓶):2g 三氯化铁加浓盐酸至 2000ml 溶液。 临用前 1000ml 加 1g 地衣酚。 2.器材:(1)恒温水浴锅 12 台(2) 722 分光光度计 25 台(3)座标纸 48 张。 紫外吸收法测定核酸含量(RNA)(考试) 1.试剂: (1) 0.1N NaOH 100ml。 (2) 0.05N NaOH 100ml。 (3) (白色 250ml) RNA 空白液:0.1N NaOH 2ml +0.05N NaOH 4ml+H2O 至 3000ml。 (4) (白色 250ml)标准 RNA 液 50ug/ml:0.15g+0.1N NaOH 2ml+0.05N NaOH 4ml+H2O 至 3000ml。 (5) (白色 60ml 试剂瓶)待测液 20 种 RNA。 样品液 (50ml) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 标准液 (ml) 35 34 33 32 31 30 29 28 27 26 25 24 23 22 21 20 19 18 17 16 35 34 33 32 31 空白液 (ml) 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 15 16 17 18 19 非考试版 1、 待测液:5mgRNA 用 0.1N NaOH 2ml 使之溶解,再加 0.05N NaOH 4ml,然后用蒸馏水定容 250ml,分 装 6 瓶(待测 RNA),(RNA 50ug/ml) 2、 空白对照液:0.1N NaOH 2ml + 0.05N NaOH 4ml +H2O 至 250ml,分装 6 瓶。 2.器材 (1)752 分光光度计 24 台。(5) 漂洗液:45ml 乙醇+5ml 冰醋酸+50ml H2O。 2、器材:(1) 平板电泳槽 4 台(2) 滤纸 12cm 1 盒(3)刀片 12 片。 (十五)分光光度法-高锰酸钾吸收曲线的绘制 1、试剂:(1)0.0125% KmnO4 (100ml) :0.0125g KmnO4 加水至 100ml。 2、器材:(1)722 分光光度计 25 台。 (十六)实验二十五、核酸的含量测定 二苯胺显色法测定 DNA 的含量和地衣酚显色法测定 RNA 的含量(测试) 1.试剂: (1) DNA 标准液(1000ml,200μg/ml):取 DNA 钠盐 0.2g 以 0.01N NaOH 溶解至 1000ml 溶液。 (2) 样品液:用 0.01N NaOH 冲稀或用 0.05gDNA 溶解至 500ml 溶液。 (3) 二苯胺试剂(4000ml,分 2 瓶):40g 二苯胺+4000ml 冰乙酸+400ml 高氯酸; 先配 100ml 1.6%乙醛(1.6ml 原液加水至 100ml),临用前 2000ml 加 20ml。 (4) RNA 标准液(1000ml):取 0.1g 加水至 1000ml。 (5) RNA 样品液(500ml):取 0.03g 加水至 500ml。 (6) 地衣酚试剂(2000ml,分 2 瓶):2g 三氯化铁加浓盐酸至 2000ml 溶液。 临用前 1000ml 加 1g 地衣酚。 2.器材:(1)恒温水浴锅 12 台(2) 722 分光光度计 25 台(3)座标纸 48 张。 紫外吸收法测定核酸含量(RNA)(考试) 1.试剂: (1) 0.1N NaOH 100ml。 (2) 0.05N NaOH 100ml。 (3) (白色 250ml) RNA 空白液:0.1N NaOH 2ml +0.05N NaOH 4ml+H2O 至 3000ml。 (4) (白色 250ml)标准 RNA 液 50ug/ml:0.15g+0.1N NaOH 2ml+0.05N NaOH 4ml+H2O 至 3000ml。 (5) (白色 60ml 试剂瓶)待测液 20 种 RNA。 样品液 (50ml) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 标准液 (ml) 35 34 33 32 31 30 29 28 27 26 25 24 23 22 21 20 19 18 17 16 35 34 33 32 31 空白液 (ml) 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 15 16 17 18 19 非考试版 1、 待测液:5mgRNA 用 0.1N NaOH 2ml 使之溶解,再加 0.05N NaOH 4ml,然后用蒸馏水定容 250ml,分 装 6 瓶(待测 RNA),(RNA 50ug/ml) 2、 空白对照液:0.1N NaOH 2ml + 0.05N NaOH 4ml +H2O 至 250ml,分装 6 瓶。 2.器材 (1)752 分光光度计 24 台