合规定。 凡规定进行无菌检查的鼻用制剂可不进行微乍物限度检查 【无菌】凡标签注明为无菌者,照无菌检查法(附录ⅫA)检查,应符合规定 书页号:2005版药典三部附录76页 附录ⅫC病毒外源因子 检查法 病毒类制品在毒种选育和生产过程中,经常使用动物或细胞基质培养,因 此,有可能造成外源因子(特别是外源病毒因子)的污染。为了保证制品质量,需 要对毒种和细胞进行外源因子的检测 病毒种子批外源因子检查 对病毒主种子批或工作种子批,应抽取足够检测试验需要量的供试品进行 病毒外源因子检测。在试验前应用非人源和非猴源(特殊情况除外)的特异性抗体 中和本病毒。制备抗血清(或单克隆抗体)所用的免疫原应采用与生产疫苗(或制 品)不同种而且无外源因子污染的细胞(或动物)制备。如果病毒曾在禽类组织或细 胞中繁殖过,则抗体不能用禽类来制备。若用鸡胚,应来自SPF鸡群。 1.动物试验法 (1)小鼠试验法取15~2g小鼠至少10只,用经抗血清中和后的病毒悬 液,每 只脑内接种003ml,同时腹腔接种0.5m。至少观察21天。在观察期内至少有80%最 初接种的小鼠存活,试验才有效。如果没有小鼠出现病毒感染,为符合要求 解剖所有在试验24小时后死亡或有患病体征的小鼠,直接肉眼观察其病理改变, 并将有病变的相应的组织悬液通过脑内和腹腔接种另外至少5只15~20g小鼠,并 观察21天,如果没有小鼠出现病毒感染,则符合要求。 (2)乳鼠试验法取出生后24小时内的乳鼠至少10只,用经抗血清中和 后的病 毒悬液,脑内接种0.0lml,同时腹腔接种至少0.lml。每天观察,至少14天。在观察 期内至少有80%最初接种的乳鼠存活,试验才有效。如果没有小鼠出现病毒感染 为符合要求。解剖所有在试验24小时后死亡或有患病体征的乳鼠,直接肉眼观察 其病理改变,并取有病变的相应的组织和脑、脾制备成悬液通过脑内和腹腔接 种另外至少5只出生后24小时内的乳鼠,并每天观察至接种后第14天,如果没有 乳鼠出现病毒感染,则符合要求 2.细胞培养法 (1)非血吸附病毒检查用经抗血清中和后的病毒悬液,分别接种于人源、 猴 源和生产用的同种细胞。用人二倍体细胞生产的,还应接种另外一株人二倍体 细胞。每种细胞至少接种6瓶,每瓶病毒悬液接种量不少于培养液总量的25%。 于36℃±1℃培养,观察14天,必要时可更换细胞培养液,未见细胞病变为阴性, 符合要求 (2)血吸附病毒检査上述接种病毒的各种细胞于第6~8天和第14天, 每种细 胞各取出2瓶进行血吸附病毒检査。用0.2%~0.5%鸡和豚鼠红细胞混合悬液覆盖于合规定。 凡规定进行无菌检查的鼻用制剂可不进行微乍物限度检查。 【无菌】 凡标签注明为无菌者，照无菌检查法(附录ⅫA)检查，应符合规定。 书页号：2005 版药典三部附录 76 页 附录Ⅻ C 病毒外源因子 检查法 病毒类制品在毒种选育和生产过程中，经常使用动物或细胞基质培养，因 此，有可能造成外源因子(特别是外源病毒因子)的污染。为了保证制品质量，需 要对毒种和细胞进行外源因子的检测。 病毒种子批外源因子检查 对病毒主种子批或工作种子批，应抽取足够检测试验需要量的供试品进行 病毒外源因子检测。在试验前应用非人源和非猴源(特殊情况除外)的特异性抗体 中和本病毒。制备抗血清(或单克隆抗体)所用的免疫原应采用与生产疫苗(或制 品)不同种而且无外源因子污染的细胞(或动物)制备。如果病毒曾在禽类组织或细 胞中繁殖过，则抗体不能用禽类来制备。若用鸡胚，应来自 SPF 鸡群。 1．动物试验法 (1) 小鼠试验法 取 15～20g 小鼠至少 10 只，用经抗血清中和后的病毒悬 液，每 只脑内接种 0.03ml，同时腹腔接种 0.5ml。至少观察 21 天。在观察期内至少有 80%最 初接种的小鼠存活，试验才有效。如果没有小鼠出现病毒感染，为符合要求。 解剖所有在试验 24 小时后死亡或有患病体征的小鼠，直接肉眼观察其病理改变， 并将有病变的相应的组织悬液通过脑内和腹腔接种另外至少 5 只 15～20g 小鼠，并 观察 21 天，如果没有小鼠出现病毒感染，则符合要求。 (2) 乳鼠试验法 取出生后 24 小时内的乳鼠至少 10 只，用经抗血清中和 后的病 毒悬液，脑内接种 0.01ml，同时腹腔接种至少 0.1ml。每天观察，至少 14 天。在观察 期内至少有 80%最初接种的乳鼠存活，试验才有效。如果没有小鼠出现病毒感染， 为符合要求。解剖所有在试验 24 小时后死亡或有患病体征的乳鼠，直接肉眼观察 其病理改变，并取有病变的相应的组织和脑、脾制备成悬液通过脑内和腹腔接 种另外至少 5 只出生后 24 小时内的乳鼠，并每天观察至接种后第 14 天，如果没有 乳鼠出现病毒感染，则符合要求。 2．细胞培养法 (1) 非血吸附病毒检查 用经抗血清中和后的病毒悬液，分别接种于人源、 猴 源和生产用的同种细胞。用人二倍体细胞生产的，还应接种另外一株人二倍体 细胞。每种细胞至少接种 6 瓶，每瓶病毒悬液接种量不少于培养液总量的 25%。 于 36℃±1℃培养，观察 14 天，必要时可更换细胞培养液，未见细胞病变为阴性， 符合要求。 (2) 血吸附病毒检查 上述接种病毒的各种细胞于第 6～8 天和第 14 天， 每种细 胞各取出 2 瓶进行血吸附病毒检查。用 0.2%～0.5%鸡和豚鼠红细胞混合悬液覆盖于