(1)如D50剂量或7d喂养试验后最小有作用剂量(mgg·体重)小于人的可能摄入量 (mg人g~体重)的10倍者，则放弃该受试物用于食品，不再继续其他毒性试验。 (2)如大于10倍者 可进行下一阶段的毒理学试 (3)凡是D50在10倍左右时，应进行重复试验 或用另一种方法进行验证 由于急性毒性试验不能作为安全评价的依据，在进行下面的遗传毒理学试验和代谢试骆 后，一定条件下就可对受试物作出一定评价。 三、第二阶段：遗传毒性试验（蓄积毒性试验、致突变试验） 遗传毒性试验主要是指 对致突变作用进行测试的试验。以致突变 验来定性表明受试物 是否有突变作用或潜在的致癌作用，进行筛选 可为代谢研究提供方法 。遗传毒性试验的 合必须考虑原核细胞和真核细胞、生殖细跑与体细胞、体内和体外试验相结合的原则。 试验项目包括：①细南致突变试验。首选鼠伤寒沙门氏南/哺乳动物微粒体酶试路 (As),必要时可另选和加选其他试验：②小鼠骨髓微核率测定和骨髓细胞染色体畸变分 析：小鼠精子畸形分析和果丸染色体畸变分析：④其他备选造传毒性试验。包括 HGPRT 基因突变试验 显性致死试验 果蝇 性隐性致 死试验 程序外DNA修复 成试验：⑤传统致畸试验：⑥短期喂养试验，即3喂养试验，如受试物需要进行第三、四 阶段毒性试验者，可不进行这项试验。 在介绍几个致突变试验之前，先介绍蓄积毒性试验。 (一)蓄积毒性试验 蓄积毒性试验目的是了解受试物在体内的蓄积情况 如果一种外来化学物质经常多次进入机体，其前次进入剂量尚未完全消除，后一次剂 又己经进入，则这一化学物质在体内的总量将不断增加，此种现象称为蓄积性。当有毒化号 物质每次在体内蓄积一定数量后，蓄积总量超过中毒闭剂量，即超过能使机体开始出现毒性 反应的最低剂量时，机体就可呈现毒性作用。蓄积性的大小主要取决于化学物质进入机体的 速度和体内消除速度大小。化学物质进入机体的速度主要由物质每次给予机体的间隔时间法 定，化学物质体内消除速度主要由机体状态和化学物质本身性质所决定。蓄积分为物质蓄 和功能蓄积。物质蓄积是量的变化，化学物质进入机体后，化学物质在体内贮留的量随消除 量不及进入量而逐渐增加。化学物质进入机体引起一定的功能或结构形态的变化，并逐渐积 累，造成功能蓄积。 蓄积试验桶常采用蓄积系数法或20武哈法。蓄积系数法是将某种化学物质按一定时间 间隔，分次给予动物，经过一定时间反复多次给予后 ,如果该物质全部在体内蓄积 ,则多 给予的总剂量与一次给予同等剂量的毒性相当：反之，如果该化学物质在体内仅有一部分蓄 积，则分次给予总量的毒性作用与一次给子同等剂量的毒性作用将有一定程度的差别，而且 蓄积性越小，相差程度越大。因此，用蓄积系数K来表示一种化学物质蓄积性大小，K等 于一次给予所需的剂量LD50与分次给予所需的总剂量LD50(D)之比，即K=LD50(D/LD50 1)。K值拔大， 表示蓄积性越弱，K值越小 表示蓄积性 一般K值估计蓄积性方法 为：1≤K<3表示强蓄积，3≤K<5表示中等蓄积，K≥5表示轻度蓄积 20d试验法是20d给子药物进行试验。以成年大鼠（体重20馆左右）每组10只，雌组 分别同时进行，设剂量分别为LD50的1/20,1/10,1/5,1/2的五个处理试验，另设对照，连续 20d每天灌胃一次。各组累积总剂量可达1、2.4.10LD50.停药后观察7d如120LD50组动物 有死亡，且有剂量反应关系，则为强蓄积性：如120LD50组动物无死亡，则为弱蓄积性 致突变试 致突变试验目的是对受试动物是否具有致癌作用的可能性进行筛选。 突变是细胞的遗传物质发生改变所引起的一种生物学现象，可观察。发生变化的遗传物 质在细胞分裂繁殖过程中可被传递到后代细胞，使后代细胞及生物具有新的特性。能引起生 (1)如 LD50 剂量或 7d 喂养试验后最小有作用剂量(mg/kg•体重）小于人的可能摄入量 (mg/kg•体重）的 10 倍者，则放弃该受试物用于食品，不再继续其他毒性试验。 (2)如大于 10 倍者，可进行下一阶段的毒理学试验。 (3)凡是 LD50 在 10 倍左右时，应进行重复试验，或用另一种方法进行验证。 由于急性毒性试验不能作为安全评价的依据，在进行下面的遗传毒理学试验和代谢试验 后，一定条件下就可对受试物作出一定评价。 三、第二阶段：遗传毒性试验（蓄积毒性试验、致突变试验） 遗传毒性试验主要是指对致突变作用进行测试的试验。以致突变试验来定性表明受试物 是否有突变作用或潜在的致癌作用，进行筛选，可为代谢研究提供方法。遗传毒性试验的组 合必须考虑原核细胞和真核细胞、生殖细胞与体细胞、体内和体外试验相结合的原则。 试验项目包括：①细菌致突变试验。首选鼠伤寒沙门氏菌／哺乳动物微粒体酶试验 (Ames )，必要时可另选和加选其他试验；②小鼠骨髓微核率测定和骨髓细胞染色体畸变分 析；③小鼠精子畸形分析和果丸染色体畸变分析；④其他备选遗传毒性试验。包括 V79/HGPRT 基因突变试验、显性致死试验、果蝇伴性隐性致死试验、程序外 DNA 修复合 成试验；⑤传统致畸试验；⑥短期喂养试验，即 30d 喂养试验，如受试物需要进行第三、四 阶段毒性试验者，可不进行这项试验。 在介绍几个致突变试验之前，先介绍蓄积毒性试验。 （一）蓄积毒性试验 蓄积毒性试验目的是了解受试物在体内的蓄积情况。 如果一种外来化学物质经常多次进入机体，其前次进入剂量尚未完全消除，后一次剂量 又已经进入，则这一化学物质在体内的总量将不断增加，此种现象称为蓄积性。当有毒化学 物质每次在体内蓄积一定数量后，蓄积总量超过中毒闭剂量，即超过能使机体开始出现毒性 反应的最低剂量时，机体就可呈现毒性作用。蓄积性的大小主要取决于化学物质进入机体的 速度和体内消除速度大小。化学物质进入机体的速度主要由物质每次给予机体的间隔时间决 定，化学物质体内消除速度主要由机体状态和化学物质本身性质所决定。蓄积分为物质蓄积 和功能蓄积。物质蓄积是量的变化，化学物质进入机体后，化学物质在体内贮留的量随消除 量不及进入量而逐渐增加。化学物质进入机体引起一定的功能或结构形态的变化，并逐渐积 累，造成功能蓄积。 蓄积试验通常采用蓄积系数法或 20d 试验法。蓄积系数法是将某种化学物质按一定时间 间隔，分次给予动物，经过一定时间反复多次给予后，如果该物质全部在体内蓄积，则多次 给予的总剂量与一次给予同等剂量的毒性相当；反之，如果该化学物质在体内仅有一部分蓄 积，则分次给予总量的毒性作用与一次给予同等剂量的毒性作用将有一定程度的差别，而且 蓄积性越小，相差程度越大。因此，用蓄积系数 K 来表示一种化学物质蓄积性大小，K 等 于一次给予所需的剂量LD50与分次给予所需的总剂量 LD50 (n)之比，即K=LD50 (n)／LD50 (1）。K 值越大，表示蓄积性越弱，K 值越小，表示蓄积性越强。一般 K 值估计蓄积性方法 为：1≤K<3 表示强蓄积，3≤K<5 表示中等蓄积，K≥5 表示轻度蓄积。 20d 试验法是 20d 给予药物进行试验。以成年大鼠（体重 20 馆左右）每组 10 只，雌雄 分别同时进行，设剂量分别为 LD50 的 1/20, 1/10, 1/5, 1/2 的五个处理试验，另设对照，连续 20d 每天灌胃一次。各组累积总剂量可达 1、2, 4, l0LD50,停药后观察 7d.如 1/20LD50 组动物 有死亡，且有剂量反应关系，则为强蓄积性；如 1/20LD50 组动物无死亡，则为弱蓄积性。 （二）致突变试验 致突变试验目的是对受试动物是否具有致癌作用的可能性进行筛选。 突变是细胞的遗传物质发生改变所引起的一种生物学现象，可观察。发生变化的遗传物 质在细胞分裂繁殖过程中可被传递到后代细胞，使后代细胞及生物具有新的特性。能引起生