导的转特异性转染靶细胞 体内应用困难 运理论上无DNA大小可能有免疫原性 限制 只有短暂表达 构建灵活 2.目的基因的表达与调控 22转录水平的调节 需要在转录水平提高基因表达,可 将多拷贝的目的基因插入表达载体,也 可将外源基因放在高效启动子之后,常 用的启动子有:人巨细胞病毒(hCVN) 启动子、猴病毒(SV40)启动子、小鼠 金属硫蛋白基因(mMI-1)启动子、逆 转录病毒长末端重复序列(LTR) 其它启动子 CEBP结合序列 内含子序列 调节重组 细胞表达系统的DNA控制元件 启动子 病毒启动子:如LTRS,CMV,SV40启动子在短时间后易 于关闭,尤其是在逆转录病毒中 看家基因启动子:如二氢叶酸还原启动子可长期表达转基 因,但水平很低 组织细胞特异性启动子:一些编码含量丰富蛋白的基因的 启动子如肌肉中肌酸激酶的启动子能够进行特异性强表达 可诱导启动子:如金属硫蛋白基因的启动子,类固醇诱导 的启动子可调节基因表达导的转 运 特异性转染靶细胞 理论上无 DNA 大小 限制 构建灵活 体内应用困难 可能有免疫原性 只有短暂表达 2. 目的基因的表达与调控 2.2 转录水平的调节 需要在转录水平提高基因表达，可 将多拷贝的目的基因插入表达载体，也 可将外源基因放在高效启动子之后，常 用的启动子有：人巨细胞病毒（hCVN） 启动子、猴病毒（SV40）启动子、小鼠 金属硫蛋白基因（mMT-1）启动子、逆 转录病毒长末端重复序列（LTR） 其它启动子 C/EBP 结合序列 内含子序列 调节重组 细胞表达系统的 DNA 控制元件 启动子 病毒启动子：如 LTRS，CMV，SV40 启动子在短时间后易 于关闭，尤其是在逆转录病毒中 看家基因启动子：如二氢叶酸还原启动子可长期表达转基 因，但水平很低。 组织/细胞特异性启动子：一些编码含量丰富蛋白的基因的 启动子如肌肉中肌酸激酶的启动子能够进行特异性强表达 可诱导启动子：如金属硫蛋白基因的启动子，类固醇诱导 的启动子可调节基因表达