4.加样：取10μl酶解液与2如6×上样液混匀，用微量移液枪小心加入 样品槽中（记录顺序）。若DNA含量偏低则可依上述比例增加上样量，但总 体积不可超过样品槽容量。每加完一个样品要更换枪头，以防止互相污染。 5.电泳：加完样后，合上电泳槽盖，立即接通电源（注意正负极，DNA 片段从负极向正极移动)。控制电压保持在60~80V。当溴酚蓝条带移动到距 凝胶前沿约2cm时，停止电泳。 6.染色：未加EB的胶板在电泳完毕后移入0.5ugml的EB溶液中， 室温下染色20-25分钟。 7.观察：在波长为254nm的长波长紫外灯下观察染色后的或己加有 EB的电泳胶板。DNA存在处显示出肉眼可辨的桔红色荧光条带。紫光灯下 观察时应戴上防护眼镜或有机玻璃面罩，以免损伤眼晴 五、作业与思考 假设一种限制性内切酶在重组质粒上有两个酶切位点，如果酶切后的电 泳显示有三条带，分析可能存在的原因有哪些？ (齐冰) 15 4. 加样：取 10μl 酶解液与 2μl 6×上样液混匀,用微量移液枪小心加入 样品槽中（记录顺序）。若 DNA 含量偏低,则可依上述比例增加上样量,但总 体积不可超过样品槽容量。每加完一个样品要更换枪头,以防止互相污染。 5. 电泳：加完样后,合上电泳槽盖，立即接通电源（注意正负极，DNA 片段从负极向正极移动）。控制电压保持在 60~80V。当溴酚蓝条带移动到距 凝胶前沿约 2cm 时,停止电泳。 6. 染色：未加 EB 的胶板在电泳完毕后移入 0.5μg/ml 的 EB 溶液中, 室温下染色 20-25 分钟。 7. 观察：在波长为 254nm 的长波长紫外灯下观察染色后的或已加有 EB 的电泳胶板。DNA 存在处显示出肉眼可辨的桔红色荧光条带。紫光灯下 观察时应戴上防护眼镜或有机玻璃面罩,以免损伤眼睛。 五、作业与思考 假设一种限制性内切酶在重组质粒上有两个酶切位点，如果酶切后的电 泳显示有三条带，分析可能存在的原因有哪些？ （齐冰）