生物 第四节蛋白质的理化性质 及其分庸轮化 选择性沉淀蛋白质的方法 理化性 ①盐析法：大量的中性盐[(NH4)2SO4、Na2SO4 NaC],使蛋白质脱去水化层而聚集沉淀。 酸碱性 ②有机溶剂沉淀法：破坏水化膜，降低介电常数， 分子 PEG、丙酮、乙醇等 胶体性 4 紫外吸 ③重金属盐沉淀：pH>p时带负电荷，与重金属 离子(Hg2+、Pb2+、Cu2+等)结成不溶性沉淀 变性作 ④生物碱试剂和某些酸类沉淀法：pH小于等电时， 化学反 蛋白质带正电荷，易与生物碱试剂和酸类的负离 2分离纯以 子生成不溶性沉淀。生物碱试剂：单宁酸、苦味 3分析鉴 酸、钨酸。酸类：三氯乙酸、磺基水杨酸。 ⑤加热变性沉淀。 ⑥等电点沉淀法 生物 化学 分离纯化 分析鉴定 理化性质 酸碱性质 分子量 胶体性质 紫外吸收 变性作用 化学反应 第四节 蛋白质的理化性质 及其分离纯化 蛋白质的胶体性质与蛋白质沉淀 蛋白质分子直径在1-100nm之间，在水溶液 中具有胶体溶液的通性（布朗运动，丁达耳现象， 不能通过半透膜） 稳定蛋白质胶体溶液的主要因素有： ①水化膜； ②同种电荷的互相排斥； ③布郎运 动 蛋白质的沉淀作用是指改变溶液的条件，影响 蛋白质的溶解性，使其从溶液中沉淀出来。 选择性沉淀蛋白质的方法 ： ①盐析法: 大量的中性盐[(NH4 )2SO4、Na2SO4、 NaCl]，使蛋白质脱去水化层而聚集沉淀。 ②有机溶剂沉淀法： 破坏水化膜，降低介电常数， PEG、丙酮、乙醇等 ③重金属盐沉淀：pH＞pI时带负电荷，与重金属 离子（Hg2+ 、Pb2+ 、Cu2+ 等）结成不溶性沉淀 ④生物碱试剂和某些酸类沉淀法：pH小于等电时， 蛋白质带正电荷，易与生物碱试剂和酸类的负离 子生成不溶性沉淀。生物碱试剂：单宁酸、苦味 酸、钨酸。酸类：三氯乙酸、磺基水杨酸。 ⑤加热变性沉淀。 ⑥等电点沉淀法 (1) (2) (3) 1 (4) (5) (6)