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琼脂是石花菜等海藻类提取的胶体物质,其化学成分主要是多糖。当温度达到98℃以上 可溶解于水,45℃以下则凝固。琼脂对细菌一般无营养作用(除自然界中极少数菌可利用琼 脂之外),纯属赋形剂。便于人们制做斜面、平板、高层等不同类型的固体培养 【材料与方法】 普通肉汤培养基lo0ml,加入琼脂2~3克,加热溶化,用蒸馏水补足失去水分,调整PH 为76后分装于试管、平皿等器皿中,高压蒸气15磅灭菌20分钟,可制成普通琼脂斜面或普 通琼脂平板 【用途】 供一般细菌培养用,并可作无糖基培养基。 (三)半固体培养基 【材料与方法】 取普通肉汤培养基100m,加入琼脂0.5~0.7克,加热溶化。调整PH为7.6,分装于小试 管内,每管1~5ml,高压蒸气灭菌20分钟,待冷后放入4℃冰箱备用。 【用途】 保存一般菌种用,并可观察细菌的动力及生化反应。 (四)血液琼脂培养基 【材料与方法】 将高压灭菌后普通琼脂培养基。冷至45℃~50℃时以无菌操作加λ5%-10%血液(人或 动物脱纤维无菌血液)。可制成血平板和血斜面 【用途】 供营养要求较高的细菌分离培养用,亦可观察细菌的溶血特征。 (五)伊红美蓝琼脂(EMB琼脂) 【材料与方法】 蛋白胨100g,磷酸氢二钾20g,乳糖10.0g,伊红-Y0.4g,美蓝0.065g,琼脂15.0g,蒸 馏水1000m 将以上各成分(伊红和美蓝除外)煮沸溶解于1000ml水中,调pH7.1±0.1。分别加入2% 伊红-Y水溶液20ml和065%美蓝水溶液10ml,于121℃灭菌l5mind 【用途】 弱选择性平板培养基,主要用于大肠杆菌和产气肠杆菌的分离和鉴别 (六)SS琼脂 SS琼脂对大肠埃希菌有较强的抑制作用,而对肠道病原菌则无明显抑制作用。因此, 可以增加粪便标本的接种量,从而提高病原菌的检出率,故SS琼脂为目前比较满意的肠道 杆菌选择性培养基。 【材料与方法】 际蛋白胨50g,牛肉浸膏50g,乳糖10.0g,胆盐8.5~100g,柠檬酸三钠8.5g,硫代硫 酸钠8.5g,柠檬酸铁1.0g,煌绿0.000393,中性红0.025g,琼脂13.5g,蒸馏水1000ml 除中性红和煌绿外,其余成分混合于100ml水中,煮沸溶解。调pH7.0~7.2。然后加入 05%中性红水溶液45ml及0.1%煌绿水溶液0.3ml,摇匀,煮沸。待冷却至60℃倾入无菌平 皿 【原理】 SS培养基中除含有基础培养基成分外,以中性红作为指示剂,变色范围pH6.880,在12 琼脂是石花菜等海藻类提取的胶体物质,其化学成分主要是多糖。当温度达到98℃以上 可溶解于水,45℃以下则凝固。琼脂对细菌一般无营养作用(除自然界中极少数菌可利用琼 脂之外),纯属赋形剂。便于人们制做斜面、平板、高层等不同类型的固体培养基。 【材料与方法】 普通肉汤培养基100ml,加入琼脂2~3克,加热溶化,用蒸馏水补足失去水分,调整PH 为7.6后分装于试管、平皿等器皿中,高压蒸气15磅灭菌20分钟,可制成普通琼脂斜面或普 通琼脂平板。 【用途】 供一般细菌培养用,并可作无糖基培养基。 (三)半固体培养基 【材料与方法】 取普通肉汤培养基100ml,加入琼脂0.5~0.7克,加热溶化。调整PH为7.6,分装于小试 管内,每管1~5ml,高压蒸气灭菌20分钟,待冷后放入4℃冰箱备用。 【用途】 保存一般菌种用,并可观察细菌的动力及生化反应。 (四)血液琼脂培养基 【材料与方法】 将高压灭菌后普通琼脂培养基。冷至45℃~50℃时以无菌操作加入5%~10%血液(人或 动物脱纤维无菌血液)。可制成血平板和血斜面。 【用途】 供营养要求较高的细菌分离培养用,亦可观察细菌的溶血特征。 (五)伊红美蓝琼脂(EMB琼脂) 【材料与方法】 蛋白胨10.0g,磷酸氢二钾2.0g,乳糖10.0 g,伊红-Y0.4 g,美蓝0.065g,琼脂15.0g,蒸 馏水1000ml。 将以上各成分(伊红和美蓝除外)煮沸溶解于1000ml水中,调pH7.1±0.1。分别加入2% 伊红-Y水溶液20 ml和0.65%美蓝水溶液10ml,于121℃灭菌15min。 【用途】 弱选择性平板培养基,主要用于大肠杆菌和产气肠杆菌的分离和鉴别 (六)SS琼脂 SS琼脂对大肠埃希菌有较强的抑制作用,而对肠道病原菌则无明显抑制作用。因此, 可以增加粪便标本的接种量,从而提高病原菌的检出率,故SS琼脂为目前比较满意的肠道 杆菌选择性培养基。 【材料与方法】 眎蛋白胨5.0g,牛肉浸膏5.0g,乳糖10.0 g,胆盐8.5~10.0g,柠檬酸三钠8.5g,硫代硫 酸钠8.5g,柠檬酸铁1.0g,煌绿0.00033g,中性红0.025g,琼脂13.5g,蒸馏水1000ml。 除中性红和煌绿外,其余成分混合于1000ml水中,煮沸溶解。调pH7.0~7.2。然后加入 0.5%中性红水溶液4.5ml及0.1%煌绿水溶液0.33ml,摇匀,煮沸。待冷却至60℃倾入无菌平 皿。 【原理】 SS 培养基中除含有基础培养基成分外,以中性红作为指示剂,变色范围 pH 6.8-8.0,在
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