4.肉中氨含量的测定掌握纳氏试剂测定氨的方法,判定肉品中氨的含量,为综合判 定肉的新鲜度提供依据。 主要设备与试剂 分光光度计、碘化钾、氢氧化 、饱和升汞溶液 、酒石酸钾气 溶液(称取50g酒石酸钾钠溶于100mL去离子水中,加热煮沸以除去氨,放冷,定容至 100mL)。 (2)操作步壕 ①配制纳氏试剂:取10g氢氢化钾(KOH)溶解于10mL热蒸榴水中,向此溶液中 加入80mL碱溶液(其中溶液中有30gKOH和2mL 3mL饱和升汞溶液),待溶液冷生 后,用蒸馏水将其稀释至200mlL即可。此溶液应装在棕色玻塞瓶内,放凉爽处保存,使用 时取其上清透明液。 ②取小试管2支,在一支内加入肉浸液1mL:另一支内加入煮沸两次冷却至室温的去 离子水1mL,作为对照。用移液管吸取纳氏试剂,轮流向上述两试管内滴入,每滴一滴都 要振荡,并观察比较两试管中溶液颜色的变化,溶液颜色深浅程度、透明度、有无浑浊或沉 淀等,每管各滴入 0滴为止 ③采用分光光度法 a.铵标准溶液制备:称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵(NH,C1)溶于水中,移入1 000mL容量瓶中,稀释至刻度。此溶液每毫升含1.00mg氨氮为铵标准贮备液。移取5.00 m铵标准量贮各液干500mL容量瓶中,用水稀释至刻度,此溶液每亮升含0010m氨氢为 铵标准溶液。 b.标准曲线的绘制:吸取0mL、0.50mL、1.00mL、3.00mL、5.00mL、7.00mL和10.( mL铵标准使用液于50mL比色管中,加水至刻度,加1.0mL酒石酸钾钠溶液,混匀。加 1.5mL纳氏试剂,混匀。放置10min后,在波长420nm处,用20mm比色皿,以去离子 水为参比,测定吸光度。 ,肉浸液测定:取适量的肉浸液(使氨氮含量不超过0.1 mg)于50mL比色管中,加 水至刻度,加10mL酒石酸钾钠溶液,混匀:加15ml纳氏试剂,混匀。放置10mm后 同标准曲线步骤测量吸光度。 ④结果计算:从标准曲线上查得氨氮含量(mg)。 (3)结果判定:结果判定见表3-1-3。氨反应的判定原则虽如表所述,但肉的最后评价 应以全部综合检验的结果为依据。 表313肉中氨含量检测结果判定 肉中氨与胺化合物的含 添加试剂滴数 浸出液的变化 肉的新鲜度评价 mg/100g 10 语明度无变化 6以下 完新鲜 10-2 肉处于败初斯 应迅速利用 10 淡黄色、浑浊 21-30 同B 有条件利用的肉,须经处理后食 6 明显的黄色、浑浊 31-45 大量黄色或色沉京 46以上 不可食用 5.球蛋白沉淀试验通过硫酸铜沉淀法判定肉新鲜度 (1)主要设备与试剂:电子秤,移液管,蒸馏水,小试管,锥形瓶,玻璃棒,CSO:等。 (2)操作步骤:取硫酸铜10g溶于100mL蒸馏水中,即制成10%CuS04溶液。取小 试管2支,一支注入肉浸液2L(肉浸液制备方法同“挥发性盐基氮的测定”),另一支注入 去离子水2mL,作为对照。用移液管吸取10%CuS0,溶液,向上述两试管中各滴入5滴,充4. 肉中氨含量的测定 掌握纳氏试剂测定氨的方法,判定肉品中氨的含量,为综合判 定肉的新鲜度提供依据。 (1)主要设备与试剂:分光光度计、碘化钾、氢氧化钾、饱和升汞溶液、酒石酸钾钠 溶液(称取 50 g 酒石酸钾钠溶于 100 mL 去离子水中,加热煮沸以除去氨,放冷,定容至 100 mL)。 (2)操作步骤 ① 配制纳氏试剂:取 10 g 氢氧化钾(KOH)溶解于 10 mL 热蒸馏水中,向此溶液中 加入 80 mL 碱溶液(其中溶液中有 30 g KOH 和 2 mL~3 mL 饱和升汞溶液),待溶液冷却 后,用蒸馏水将其稀释至 200 mL 即可。此溶液应装在棕色玻塞瓶内,放凉爽处保存,使用 时取其上清透明液。 ② 取小试管 2 支,在一支内加入肉浸液 1 mL;另一支内加入煮沸两次冷却至室温的去 离子水 1 mL,作为对照。用移液管吸取纳氏试剂,轮流向上述两试管内滴入,每滴一滴都 要振荡,并观察比较两试管中溶液颜色的变化,溶液颜色深浅程度、透明度、有无浑浊或沉 淀等,每管各滴入 10 滴为止。 ③ 采用分光光度法 a. 铵标准溶液制备:称取 3.819 g 经 100℃干燥过的氯化铵(NH4Cl)溶于水中,移入 1 000 mL 容量瓶中,稀释至刻度。此溶液每毫升含 1.00 mg 氨氮为铵标准贮备液。移取 5.00 mL 铵标准贮备液于 500 mL 容量瓶中,用水稀释至刻度,此溶液每毫升含 0.010 mg 氨氮为 铵标准溶液。 b. 标准曲线的绘制:吸取 0 mL、0.50 mL、1.00 mL、3.00 mL、5.00 mL、7.00 mL 和 10.0 mL 铵标准使用液于 50 mL 比色管中,加水至刻度,加 1.0 mL 酒石酸钾钠溶液,混匀。加 1.5 mL 纳氏试剂,混匀。放置 10 min 后,在波长 420 nm 处,用 20 mm 比色皿,以去离子 水为参比,测定吸光度。 c. 肉浸液测定:取适量的肉浸液(使氨氮含量不超过 0.1 mg)于 50 mL 比色管中,加 水至刻度,加 1.0 mL 酒石酸钾钠溶液,混匀;加 1.5 mL 纳氏试剂,混匀。放置 10 min 后, 同标准曲线步骤测量吸光度。 ④ 结果计算:从标准曲线上查得氨氮含量(mg)。 (3)结果判定:结果判定见表 3-1-3。氨反应的判定原则虽如表所述,但肉的最后评价, 应以全部综合检验的结果为依据。 表 3-1-3 肉中氨含量检测结果判定 添加试剂滴数 浸出液的变化 肉中氨与胺化合物的含 量 mg/100g 肉的新鲜度评价 10 透明度无变化 6 以下 完全新鲜 10 透明、黄色 10~20 肉处于腐败初期,应迅速利用 10 淡黄色、浑浊 21~30 同上 6 明显的黄色、浑浊 31~45 有条件利用的肉,须经处理后食 用 1~5 大量黄色或黄色沉淀 46 以上 不可食用 5. 球蛋白沉淀试验 通过硫酸铜沉淀法判定肉新鲜度。 (1)主要设备与试剂:电子秤,移液管,蒸馏水,小试管,锥形瓶,玻璃棒,CuSO4等。 (2)操作步骤:取硫酸铜 10 g 溶于 100 mL 蒸馏水中,即制成 10% CuSO4溶液。取小 试管 2 支,一支注入肉浸液 2 mL(肉浸液制备方法同“挥发性盐基氮的测定”),另一支注入 去离子水 2 mL,作为对照。用移液管吸取 10% CuSO4 溶液,向上述两试管中各滴入 5 滴,充