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液几乎无色透明或具有淡的乳白色,牛、羊肉的肉浸液呈透明的麦秆黄色,马肉的浸液呈透 明的粉红色。次鲜肉的浸液则呈微混浊,变质肉的浸液呈灰粉红色,且混浊」 ②pH判定:新鲜肉pH5.8~62:次新鲜肉pH6.3~6.6:变质肉pH6.7以上 3.挥发性盐基氨的测定(半微量定氨法) 掌握半微量定氮法测定挥发性盐基氮的基 本原理,熟悉操作步骤和卫生评价」 (1)原理:微生物的代谢可引起肉品蛋白质分解产生多种腐败性产物,如氨、胺类等 碱性含氮物质。这些碱性产物,可以和组织内的酸性物质结合,形成盐基态氮,当在碱性环 境中其易从组织中挥发出来。本实验利用氧化镁(弱碱性)造成碱性环境,使碱性含氮物质 军发性 基总 (TVBN) ,被含有指示剂的 酸溶液吸收,用标 盐酸溶液滴定,通过计算求得TVBN含量,从而来判定肉品的新鲜度。 (2)主要设备与试剂 ①半微量定氨器、微量加样婴(100)。 ②氧化镁混悬液(10g):称取1.0g氧化镁,加100mL水,振摇成混悬液 ③硼酸吸收液(20gL):称取硼酸 加100mL水溶解 ④0.010molL盐酸标准溶液:首先精确量取9mL化学纯浓盐酸(比重1.19)移入】 000mL容量瓶中,加水稀释至刻度,制成0.100mo/L盐酸标准溶液。然后精确量取100mL 0.100moL盐酸标准溶液移入1000mL容量瓶中,再加水稀释至刻度处即可。 ⑤次甲基蓝水指示剂(1gL):取0.1g次甲基蓝,溶于100mL水中。 甲基红乙醇指示剂(2 L):取0.2g甲基红溶于100ml95%乙醇中 ⑦混合指示 :临用时取次甲基蓝水指示剂和甲基红乙醇指示剂等量混合即成 (3)操作步第 ①肉浸液的制备:将样品除去脂肪、骨和筋避后剪碎,纹碎搅匀,称取5g~10g置于 烧杯中,加10倍经煮沸后冷却至室温的中性去离子水,不时振摇,浸渍30m后过滤,滤 夜置干维形瓶中名用 ②样品测定 将盛有1 硼酸吸收液及5~6滴混合指示液的锥形瓶置于冷凝管下 端,并使其下端插入吸收液的液面下。精确吸取5.0mL上述肉浸液小心地从小烧杯处加) 蒸馏器反应室内,加5mL氧化镁混悬液(10gL),迅速盖塞,并加少量水于小烧杯中进 行封闭以防漏气。接通电源,加热蒸气发生器,沸腾后立即关闭螺旋夹开始蒸馏。当冷凝管 出现第一滴冷凝水时,讯速将冷凝管下端插入推形瓶内硼酸的液面下,蒸馏5m。移动接 收瓶,使研酸液面离开冷凝 下口约1cm 并用少量水冲洗冷凝管口外面,继续蒸 馏 先移开接收瓶,用表面皿覆盖瓶口,然后关闭电源。用盐酸标准溶液(0.01moL)滴定 至吸收液由绿色或草绿色变为蓝紫色即为滴定终点。同时用水作试剂空自对照。 ③结果计算:试样中挥发性盐基氮的含量按式(31)进行计算。 X=1-y2)×cx14x100 m×5/100 (3-1-1) 式中: 试样中挥发性盐基氮的含量,单位为毫克每百克(mg100g): -测定样品液消耗盐酸标准溶液体积,单位为亮升(L): V 一试剂空白消耗盐酸标准溶液体积,单位为毫升(mL): 盐酸标准溶液的实际浓度,单位为摩尔每升(m0L): 试样质量,单位为克(g 100 相当的氨的质 单位为毫克 mg (4)结果判定 我国食品 生标准中规定各种贪肉新鲜度判定指标为:新鲜肉 TVBN含量≤15mg/100g(GB2707-2005)· 液几乎无色透明或具有淡的乳白色,牛、羊肉的肉浸液呈透明的麦秆黄色,马肉的浸液呈透 明的粉红色。次鲜肉的浸液则呈微混浊,变质肉的浸液呈灰粉红色,且混浊。 ② pH 判定:新鲜肉 pH5.8~6.2;次新鲜肉 pH6.3~6.6;变质肉 pH6.7 以上。 3. 挥发性盐基氮的测定(半微量定氮法) 掌握半微量定氮法测定挥发性盐基氮的基 本原理,熟悉操作步骤和卫生评价。 (1)原理:微生物的代谢可引起肉品蛋白质分解产生多种腐败性产物,如氨、胺类等 碱性含氮物质。这些碱性产物,可以和组织内的酸性物质结合,形成盐基态氮,当在碱性环 境中其易从组织中挥发出来。本实验利用氧化镁(弱碱性)造成碱性环境,使碱性含氮物质 ——挥发性盐基总氮(TVBN),游离并蒸馏出来,被含有指示剂的硼酸溶液吸收,用标准 盐酸溶液滴定,通过计算求得 TVBN 含量,从而来判定肉品的新鲜度。 (2)主要设备与试剂 ① 半微量定氮器、微量加样器(100 μL)。 ② 氧化镁混悬液(10 g/L):称取 1.0g 氧化镁,加 100 mL 水,振摇成混悬液。 ③ 硼酸吸收液(20 g/L):称取硼酸 2.0g,加 100 mL 水溶解。 ④ 0.010 mol/L 盐酸标准溶液:首先精确量取 9mL 化学纯浓盐酸(比重 1.19) 移入 1 000 mL 容量瓶中,加水稀释至刻度,制成 0.100 mol/L 盐酸标准溶液。然后精确量取 100 mL 0.100 mol/L 盐酸标准溶液移入 1 000 mL 容量瓶中,再加水稀释至刻度处即可。 ⑤ 次甲基蓝水指示剂(1 g/L):取 0.1 g 次甲基蓝,溶于 100 mL 水中。 ⑥ 甲基红乙醇指示剂(2 g/L):取 0. 2 g 甲基红溶于 100 mL 95%乙醇中。 ⑦ 混合指示液:临用时取次甲基蓝水指示剂和甲基红乙醇指示剂等量混合即成。 (3)操作步骤 ① 肉浸液的制备:将样品除去脂肪、骨和筋腱后剪碎,绞碎搅匀,称取 5 g~10 g 置于 烧杯中,加 10 倍经煮沸后冷却至室温的中性去离子水,不时振摇,浸渍 30 min 后过滤,滤 液置于锥形瓶中备用。 ② 样品测定:将盛有 10 mL 硼酸吸收液及 5~6 滴混合指示液的锥形瓶置于冷凝管下 端,并使其下端插入吸收液的液面下。精确吸取 5.0 mL 上述肉浸液小心地从小烧杯处加入 蒸馏器反应室内,加 5 mL 氧化镁混悬液(10 g/L),迅速盖塞,并加少量水于小烧杯中进 行封闭以防漏气。接通电源,加热蒸气发生器,沸腾后立即关闭螺旋夹开始蒸馏。当冷凝管 出现第一滴冷凝水时,迅速将冷凝管下端插入锥形瓶内硼酸的液面下,蒸馏 5 min。移动接 收瓶,使硼酸液面离开冷凝管下口约 1 cm,并用少量水冲洗冷凝管口外面,继续蒸馏 1 min。 先移开接收瓶,用表面皿覆盖瓶口,然后关闭电源。用盐酸标准溶液(0.01 mol/L)滴定, 至吸收液由绿色或草绿色变为蓝紫色即为滴定终点。同时用水作试剂空白对照。 ③ 结果计算:试样中挥发性盐基氮的含量按式(3-1-1)进行计算。 X= 100 5 / 100 ( 1 2) 14      m V V c ………………………………(3-1-1) 式中:X——试样中挥发性盐基氮的含量,单位为毫克每百克(mg/100 g); V1——测定样品液消耗盐酸标准溶液体积,单位为毫升(mL); V2——试剂空白消耗盐酸标准溶液体积,单位为毫升(mL); c——盐酸标准溶液的实际浓度,单位为摩尔每升(mol/L); m——试样质量,单位为克(g); 14——与 1.000mol/L 盐酸标准溶液 1.00 mL 相当的氮的质量,单位为毫克(mg)。 (4) 结果判定 我国食品卫生标准中规定各种畜禽肉新鲜度判定指标为:新鲜肉 TVBN 含量≤15 mg/100 g(GB2707—2005)
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