RNA,2ul5×甲醛胶电泳缓冲液,35ul 37%甲醛,10u甲酰胺,离心混匀,65℃ 变性15min后,迅速置冰浴中;再加入 2山lRNA上样缓冲液,离心混匀后上样 6Vcm电压,电泳1~2h;暗室内紫外 光下观察,拍照;如果观察到清晰的 18S、28SRNA电泳带,无大量小分子 RNA,说明RNA无明显降解,样品 70℃保存备用。 随着科技的发展,也有许多新型 纯化方法,使用试剂盒即可简单的 成分离纯化步骤,如使用纤维素柱纯 化mRNA 使用 Oligo(dn-纤维素层析法提取 poly (A)+RNA Poly(A)-O ligo(dn) 100mM NaCl AIRNA 1mM EDTA 鲜编景搞纯化Poly()mE删圆[ Poly(A)mRNA 1.3.1.2蛋白质的分离、纯化 蛋白质的分离纯化方法很多 根据蛋白质溶解度不同,有 1、盐析法 中性盐对蛋白质的溶解度有显著 影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升RNA，2ul 5×甲醛胶电泳缓冲液，3.5μl 37%甲醛，10ul 甲酰胺，离心混匀，65℃ 变性 15min 后，迅速置冰浴中；再加入 2μl RNA 上样缓冲液，离心混匀后上样， 6V/cm 电压，电泳 1～2h；暗室内紫外 光下观察，拍照；如果观察到清晰的 18S、28S RNA 电泳带，无大量小分子 RNA，说明 RNA 无明显降解，样品－ 70℃保存备用。 随着科技的发展，也有许多新型 纯化方法，使用试剂盒即可简单的完 成分离纯化步骤，如使用纤维素柱纯 化 mRNA： 使用 Poligo(dT)-纤维素层析法提取 poly(A)+RNA TTTTTT TTTTTT TTTTTT TTTTTT AAAAA AAAAA Oligo(dT) 纤维素 Poly(A)--Oligo(dT) 100mM NaCl 洗脱 10mM Tris rRNA/tRNA 1mM EDTA Poly(A)mRNA Total RNA 纤维素柱纯化Poly(A)mRNA 流程图 1.3.1.2 蛋白质的分离、纯化 蛋白质的分离纯化方法很多： 根据蛋白质溶解度不同，有 1、盐析法 中性盐对蛋白质的溶解度有显著 影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升