学、生物学与医学的重点研究课题之 核酸分为DNA和RNA两大类。提 取纯化核酸关键在于保持核酸的完整 性。但要做到这一点比较困难,一是因 为细胞内存在活性很高的核糖核酸酶; 二是化学因素,过氧过碱以及其它化学 因素;三是物理因素,如高温、机械牵 拉等可使核酸降解 真核细胞基因组DNA的分离与纯化 DNA主要在细胞核内,核外也有 少量称为核外基因的线粒体DNA等。 真核细胞的DNA分子比原核生物的 DNA分子大得多,并且以核蛋白体形 式存在于细胞中。高等动植物细胞中的 染色体含有大量的DNA,对其结构和 功能的研究又是分子生物学的中心课 题。为了在DNA的研究中获得可靠结 果,制备高纯度大分子量的DNA样品 十分重要的 真核细胞基因组DNA提取的主要 步骤是破碎细胞、去处与核酸结合的蛋 白质、多糖、脂类以及其它不需要的核 酸(RNA)等生物大分子。细胞破碎的 手段常为超声波、组织匀浆、液氮破碎 以及包埋组织的超薄切片等方法。为了 获得大量完整的DNA,一般采用蛋白 酶K和去垢剂SDS等温和的方法破碎 细胞。纯化则根据其本身的特征用不同 方法。细胞基因组DNA的提取是多种 分子生物学和细胞生物学研究的重要 步骤。它对于电镜下研究DNA结果及 用DNA介导的基因转移进行人类基因 定位、原位杂交等方面都很有意义 具体操作方法如下:①动物处死 迅速取出组织块,剪碎后,置入液氮中 ②用冰冷的组织捣碎器捣碎 200~1000mg组织,每100mg组织加入 1.2ml消化液 (100mmol/L NaCl 10mmol/L Tris- HCl, pH8.0, 25mmol/L EDTA 0.5%SDS,0. Img/ml蛋白酶K):③将 悬浮细胞收集,500g×5min离心,或贴学、生物学与医学的重点研究课题之 一。核酸分为 DNA 和 RNA 两大类。提 取纯化核酸关键在于保持核酸的完整 性。但要做到这一点比较困难，一是因 为细胞内存在活性很高的核糖核酸酶； 二是化学因素，过氧过碱以及其它化学 因素；三是物理因素，如高温、机械牵 拉等可使核酸降解。 真核细胞基因组 DNA 的分离与纯化 DNA 主要在细胞核内，核外也有 少量称为核外基因的线粒体 DNA 等。 真核细胞的 DNA 分子比原核生物的 DNA 分子大得多，并且以核蛋白体形 式存在于细胞中。高等动植物细胞中的 染色体含有大量的 DNA，对其结构和 功能的研究又是分子生物学的中心课 题。为了在 DNA 的研究中获得可靠结 果，制备高纯度大分子量的 DNA 样品 十分重要的。 真核细胞基因组 DNA 提取的主要 步骤是破碎细胞、去处与核酸结合的蛋 白质、多糖、脂类以及其它不需要的核 酸（RNA）等生物大分子。细胞破碎的 手段常为超声波、组织匀浆、液氮破碎 以及包埋组织的超薄切片等方法。为了 获得大量完整的 DNA，一般采用蛋白 酶 K 和去垢剂 SDS 等温和的方法破碎 细胞。纯化则根据其本身的特征用不同 方法。细胞基因组 DNA 的提取是多种 分子生物学和细胞生物学研究的重要 步骤。它对于电镜下研究 DNA 结果及 用 DNA 介导的基因转移进行人类基因 定位、原位杂交等方面都很有意义。 具体操作方法如下：①动物处死， 迅速取出组织块，剪碎后，置入液氮中； ②用冰冷的组织捣碎器捣碎 200~1000mg 组织，每 100mg 组织加入 1.2ml 消化液 （100mmol/L NaCl,10mmol/L Tris- -HCl，pH8.0，25mmol/L EDTA， 0.5%SDS，0.1mg/ml 蛋白酶 K）；③将 悬浮细胞收集，500g×5min 离心，或贴