（1） 10%SDS(200ml)：20g 十二烷基硫酸钠+水至 200ml 溶液。 （2） （神经毒剂）（50ml 棕色）凝胶贮液（400ml）：115.2g+86.4g 丙烯酰胺+3.2g+2.4g 甲叉酰丙烯 酰胺+水至 400+150ml 溶液。 （3） （10ml 离心管）分离胶缓冲液（100ml）：1N HCl 63ml+Tris 54.9g+H2O 至 150ml 溶液，调 PH8.9。 （4） （10ml 离心管）浓缩胶缓冲液（100ml）：1N HCl 72ml+Tris 8.97g+H2O 至 150ml 溶液，调 PH6.7。 （5） （统分老师）10%过硫酸铵（5ml）：0.8g 过硫酸铵+H2O 至 8ml 溶液（当天配制）。 （6） （1.5ml 离心管）10%TEMED（100ml）：10ml TEMED+H2O 至 100ml 溶液。 （7） （边配）电极缓冲液 pH 8.3（7500ml）：Tris45g+Gly210g+10%SDS75ml+H2O 至 7500ml 溶液。 （8） 样品液（10ml）：浓缩胶缓冲液 0.2ml+10%SDS1ml+巯基乙醇 0.1ml+蔗糖 4g+溴酚蓝 2mg+H2O 至 10ml 溶液。 （9） （边配）染色液（500ml）：0.4g考马斯亮兰R250+100ml 冰乙酸+甲醇450ml+水450ml至1000ml 溶液。 （10） （边配统分）1.8%琼脂（500ml）：7.5g 琼脂加水溶解至 500ml 溶液。 2．器材： （1） 12 个电泳槽（2）12 台稳压稳流电泳仪（3）12 支长针头（4）200ul 加样器 12 把（5）刀片 12 片（6）pH 试纸（3—10）12 套（7）细铜丝 180 条。 （八）实验十三、考马斯亮兰测定蛋白浓度 1．试剂： (1) (白色 60ml)标准蛋白液 1mg/ml（400ml）：0.4g 牛血清蛋白+H2O 400ml 溶解。 (2) （手易着色）考马斯亮兰试剂（10000ml）：1.0g G250+500ml 95%乙醇+1000ml 85%H3PO4 溶解 +H2O。 (3) (白色 60ml)待测蛋白液：0.24g 牛血清蛋白+H2O 400ml 溶解。 2．器材：（1）722 分光光度计 25 台 (2)记号笔 12 支。 附：双缩脲法：蛋白质的定量分析 1．试剂： （10） 双缩脲试剂： 500ml ： 0.75gCuSO4·5H2O+3.0g 酒石酸钾钠 +H2O( 溶 解 )+ 150ml 10%NaOH+0.5gKI+H2O 至 500ml。 （11） 生理盐水（0.9% NaCl）：1000ml。 （12） 标准蛋白溶液（2mg/ml，BSA，150ml）：0.3gBSA+150ml 生理盐水（4 0C 保存）。 （13） 待测蛋白液： 1ml 卵清+100ml 生理盐水（4000rpm 离心 2 分钟），吸上清+生理盐水 100ml， （4 0C 保存）。 2．仪器：（1）722 分光光度计 10 台（2）水浴锅 3 台 （九）实验二十二、氨基酸的纸上层析法与酪蛋白氨基酸成分的研究 1． 试剂： （1） （手易着色）0.5%茚三酮（2000ml）：10g 茚三酮+95%乙醇至 2000ml 溶液。 （2） （强酸）0.01N HCl（500ml）：5ml 1N HCl+H2O 495ml。 （3） (10ml 离心管)标准氨基酸溶液：Lys、Ser、Pro、Val、Leu、五种混合物各 0.1g+50ml 0.01N HCl。 （4） 正丁醇 8 瓶，95%乙醇 3 瓶，88%甲酸 2 瓶。 2． 器材：（1） 10%SDS(200ml)：20g 十二烷基硫酸钠+水至 200ml 溶液。 （2） （神经毒剂）（50ml 棕色）凝胶贮液（400ml）：115.2g+86.4g 丙烯酰胺+3.2g+2.4g 甲叉酰丙烯 酰胺+水至 400+150ml 溶液。 （3） （10ml 离心管）分离胶缓冲液（100ml）：1N HCl 63ml+Tris 54.9g+H2O 至 150ml 溶液，调 PH8.9。 （4） （10ml 离心管）浓缩胶缓冲液（100ml）：1N HCl 72ml+Tris 8.97g+H2O 至 150ml 溶液，调 PH6.7。 （5） （统分老师）10%过硫酸铵（5ml）：0.8g 过硫酸铵+H2O 至 8ml 溶液（当天配制）。 （6） （1.5ml 离心管）10%TEMED（100ml）：10ml TEMED+H2O 至 100ml 溶液。 （7） （边配）电极缓冲液 pH 8.3（7500ml）：Tris45g+Gly210g+10%SDS75ml+H2O 至 7500ml 溶液。 （8） 样品液（10ml）：浓缩胶缓冲液 0.2ml+10%SDS1ml+巯基乙醇 0.1ml+蔗糖 4g+溴酚蓝 2mg+H2O 至 10ml 溶液。 （9） （边配）染色液（500ml）：0.4g考马斯亮兰R250+100ml 冰乙酸+甲醇450ml+水450ml至1000ml 溶液。 （10） （边配统分）1.8%琼脂（500ml）：7.5g 琼脂加水溶解至 500ml 溶液。 2．器材： （1） 12 个电泳槽（2）12 台稳压稳流电泳仪（3）12 支长针头（4）200ul 加样器 12 把（5）刀片 12 片（6）pH 试纸（3—10）12 套（7）细铜丝 180 条。 （八）实验十三、考马斯亮兰测定蛋白浓度 1．试剂： (1) (白色 60ml)标准蛋白液 1mg/ml（400ml）：0.4g 牛血清蛋白+H2O 400ml 溶解。 (2) （手易着色）考马斯亮兰试剂（10000ml）：1.0g G250+500ml 95%乙醇+1000ml 85%H3PO4 溶解 +H2O。 (3) (白色 60ml)待测蛋白液：0.24g 牛血清蛋白+H2O 400ml 溶解。 2．器材：（1）722 分光光度计 25 台 (2)记号笔 12 支。 附：双缩脲法：蛋白质的定量分析 1．试剂： （10） 双缩脲试剂： 500ml ： 0.75gCuSO4·5H2O+3.0g 酒石酸钾钠 +H2O( 溶 解 )+ 150ml 10%NaOH+0.5gKI+H2O 至 500ml。 （11） 生理盐水（0.9% NaCl）：1000ml。 （12） 标准蛋白溶液（2mg/ml，BSA，150ml）：0.3gBSA+150ml 生理盐水（4 0C 保存）。 （13） 待测蛋白液： 1ml 卵清+100ml 生理盐水（4000rpm 离心 2 分钟），吸上清+生理盐水 100ml， （4 0C 保存）。 2．仪器：（1）722 分光光度计 10 台（2）水浴锅 3 台 （九）实验二十二、氨基酸的纸上层析法与酪蛋白氨基酸成分的研究 1． 试剂： （1） （手易着色）0.5%茚三酮（2000ml）：10g 茚三酮+95%乙醇至 2000ml 溶液。 （2） （强酸）0.01N HCl（500ml）：5ml 1N HCl+H2O 495ml。 （3） (10ml 离心管)标准氨基酸溶液：Lys、Ser、Pro、Val、Leu、五种混合物各 0.1g+50ml 0.01N HCl。 （4） 正丁醇 8 瓶，95%乙醇 3 瓶，88%甲酸 2 瓶。 2． 器材：