γδT细胞是免疫系统中的一个独特的群体,在外周淋巴细胞库中是数量较小 的亚群,约占正常人外周血CD3T淋巴细胞总数的1%~10%。y6T细胞被视为 处于免疫防御系统的第一线,在抗感染和抗肿瘤过程中起到重要的防御作用凹。 近年来γ6T细胞在肿瘤免疫中的积极作用备受关注。在体内外的实验表明,y6T 细胞对不同性质的多种肿瘤细胞,如黑色素瘤、淋巴瘤凹]、卵巢癌和肺癌刂等均 具有良好的细胞毒作用。TCRy6与 TCRab不同,其识别抗原不具有MHC分子的 限制性,可以直接识别肿瘤细胞抗原凹。为此,我们建立了一个构建新型抗肿瘤 抗体的新策略一将人类TCRγ6识别肿瘤的特性通过基因工程的方法移植到一个 基因工程抗体中,这样将γ6T细胞和抗体二者的优点集于一身,从而形成一种新 型完全人源化的抗肿瘤抗体。TCRγδ识别肿瘤抗原的主要结构域是CDR3δ,本 项目前期发现了卵巢上皮癌组织浸润的γ6T细胞TCR的一个CDR3δ的基因优势 序列(OT3)l5,因此我们利用昆虫表达系统表达了TCR962(OT3}Fc融合蛋白, 既保留完整TCR6识别肿瘤抗原的特点,又兼有抗体的Fc片段。本研究主要通 过同位素标记技术观察TCRγ962(OT3)-Fc在荷瘤裸鼠体内的显像和分布,及 TCRγ962(OT3}Fc融合蛋白在荷瘤裸鼠体内的治疗效果,从而初步研究 ICRγ9/62(0OT3}Fc在体内的抗肿瘤效果。 1材料和方法 1实验动物 BALB裸鼠,4~6周,雌性,均购自中国药品和生物制品检定所啮齿类实 验动物中心。饲养于中国医学科学院基础医学研究所动物中心二级动物房 12细胞株 SKOV3,人类卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株,以含10%FCS的 DMEM-F12 培养基进行贴壁培养 13主要试剂和仪器 SnCl,无水乙醇,葡庚糖酸钠(GH),2-亚氨基噻吩(2-I)均为AR,Si 公司产品,C-18纯化柱( Sigma公司产品),Na9mcO4(北京原子高科奶站)。 淋巴细胞分离液(天津瀚洋生物有限公司,中国)。ck-8(同仁化学,日本)。 LKBy计数器(瑞典), ICON SPECT(西门子,德国),R905活度计(中 国计量科学研究院),HP100, Zorbax SB-C18 column,EG& E Radioflow Dectector LB509。 T 细胞是免疫系统中的一个独特的群体，在外周淋巴细胞库中是数量较小 的亚群，约占正常人外周血 CD3+ T 淋巴细胞总数的 1%～10%。 T 细胞被视为 处于免疫防御系统的第一线，在抗感染和抗肿瘤过程中起到重要的防御作用[1]。 近年来  细胞在肿瘤免疫中的积极作用备受关注。在体内外的实验表明，  细胞对不同性质的多种肿瘤细胞，如黑色素瘤、淋巴瘤、卵巢癌和肺癌等均 具有良好的细胞毒作用。TCR与 TCRab 不同，其识别抗原不具有 MHC 分子的 限制性，可以直接识别肿瘤细胞抗原[4]。为此，我们建立了一个构建新型抗肿瘤 抗体的新策略－将人类 TCR识别肿瘤的特性通过基因工程的方法移植到一个 基因工程抗体中，这样将  细胞和抗体二者的优点集于一身，从而形成一种新 型完全人源化的抗肿瘤抗体。TCR识别肿瘤抗原的主要结构域是 CDR3δ，本 项目前期发现了卵巢上皮癌组织浸润的 γδT细胞 TCR 的一个 CDR3δ 的基因优势 序列（OT3）[5]，因此我们利用昆虫表达系统表达了 TCR9/2(OT3)-Fc 融合蛋白， 既保留完整 TCR识别肿瘤抗原的特点，又兼有抗体的 Fc 片段。本研究主要通 过同位素标记技术观察 TCR9/2(OT3)-Fc 在荷瘤裸鼠体内的显像和分布，及 TCR9/2(OT3)-Fc 融合蛋白 在荷瘤裸鼠 体内的治疗 效果，从而 初步研究 TCR9/2(OT3)-Fc 在体内的抗肿瘤效果。 1 材料和方法 1.1 实验动物 BALB/c 裸鼠，4～6 周，雌性，均购自中国药品和生物制品检定所啮齿类实 验动物中心。饲养于中国医学科学院基础医学研究所动物中心二级动物房。 1.2 细胞株 SKOV3，人类卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株，以含 10%FCS 的 DMEM-F12 培养基进行贴壁培养。 1.3 主要试剂和仪器 SnCl2，无水乙醇，葡庚糖酸钠（GH），2-亚氨基噻吩（2-IT）均为 A.R，Sigma 公司产品，C-18 纯化柱（Sigma 公司产品），Na99mTcO4（北京原子高科奶站）。 淋巴细胞分离液（ 天津瀚洋生物有限公司，中国）。cck-8（同仁化学，日本）。 LKB γ 计数器（瑞典），ICON SPECT（西门子，德国），R-905 活度计（中 国计量科学研究院），HP 1100，Zorbax SB-C18 column, EG&E Radioflow Dectector LB509