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维素颗粒上的羧甲基负电荷结合。可交换的基团带正电,因此是一种阳离子交换剂。蛋 白质与离子交换纤维素之间结合能力的大小取决于彼此间相反电荷基团之间静电吸引。 (2)一乙氨基乙基纤维素(DEAE纤维素)在中性H条件下,它含有带正申荷的 基团,可与溶液中的带负电荷的蛋白质结合,可交换的基团带负电荷 因此是一种阴 子交换剂。当某一蛋白质混合溶液通过装有DEAE纤维素的层析柱时,带正电荷的蛋白 质不能结合而随着洗脱液的流动先被洗脱下来。带负电荷的蛋白质将被结合到柱上。结 合力取决于彼此相反电荷基团间的静电吸引。然后选用一定pH和离子强度的缓冲液进行 洗脱,改变蛋白质分子所带的静电荷,依次从层析柱流出达到相互分离的目的(图227)。 (a) 纤维素颖粒 纤维素颗粒 城琅脂相 C:H 二乙氨基乙基纤推者(DEAE轩维素) 羧甲基纤维素(CM纤维素) (b) ,蛋白质混合液 >售 带负电药的重白质 收集样品的管 带负电荷的置白质 na梯 带正电 洗脱体积 图2.27纤雄素柱层折示意图 (a)DEAE纤维素和CM纤维素的结构: (b)子交换纤维素尽析示意:()离子交换纤维素层析分离图 59 维素颗粒上的羧甲基负电荷结合。可交换的基团带正电,因此是一种阳离子交换剂。蛋 白质与离子交换纤维素之间结合能力的大小取决于彼此间相反电荷基团之间静电吸引。 (2)二乙氨基乙基纤维素(DEAE-纤维素) 在中性 pH 条件下,它含有带正电荷的 基团,可与溶液中的带负电荷的蛋白质结合,可交换的基团带负电荷,因此是一种阴离 子交换剂。当某一蛋白质混合溶液通过装有 DEAE-纤维素的层析柱时,带正电荷的蛋白 质不能结合而随着洗脱液的流动先被洗脱下来。带负电荷的蛋白质将被结合到柱上。结 合力取决于彼此相反电荷基团间的静电吸引。然后选用一定 pH 和离子强度的缓冲液进行 洗脱,改变蛋白质分子所带的静电荷,依次从层析柱流出达到相互分离的目的(图 2-27)。 图 2-27 纤维素柱层析示意图 (a)DEAE 纤维素和 CM 纤维素的结构;(b)离子交换纤维素层析示意;(c)离子交换纤维素层析分离图谱
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