所受到的离心力越大。计算时通常采用平均距离 根据离心机转速的不同，常将离心机分为普通离心机（最高转速4000rmi)、高速离 心机（最高转速20000rmim)和超高速离心机（最高转速60000r/min以上）。超速离心机 又可分为分析超速离心机和制备超速离心机两类，前者能精确控制离心力，并且可用照相方 法或者电子技术记录沉降粒子在离心过程中的行为，对这些记录进行分析，可以测定粒子的 物理性质，如沉降系数、分子量、扩散系数、沉降物质的不均一性等。 制备离心技术包括两种方法：一种是分级离心法，另一种是密度梯度离心法。 一、分级离心法 非均一的粒子悬浮液在离心机中离心时，各种粒子以各自的沉降速度移向离心管底部， 逐步在底部形成一层沉淀物质。这层沉淀物质含有各种组分，但是最多的是那些沉降得最 快的组分（图2）。为了分出某一特定组分，需要进行一系列离心。通常先选择一个离心速 度和离心时间，进行第一次离心，把大部分不需要的大粒子沉降去掉，这时所需要的组分 大部分仍留在上清液内：然后将收集到的上清液用更高的转速离心，把需要的粒子沉积下 来。离心时间要选择得当，使大部分不需要的小粒子仍留在上清液中。经过较高速度离心 后，倾去上清液，把沉淀悬浮起来，再用较低转速离心。如此反复高速、低速离心，直至 达到所需粒子的纯度为止。这种基于粒子沉降速度不同而分离的方法，用得非常普遍，对 病毒和亚细胞组分的浓缩特别有用：但是要得到一个纯组分较困难，即使沉降最慢的组分 较纯，它的收得率也是很低的。 1 2 3 图2分级离心法 二、密度梯度离心法 密度梯度离心法较分级离心法复杂，但是具有很好的分辨能力。密度梯度离心可以同时 使样品中几个或全部组分分离，这是分级离心法所不及的。这个方法是把样品粒子在一个密 度梯度介质中离心，这个介质由一合适的可使小分子和样品粒子在其中悬浮的溶剂组成。离 心时，离轴心愈远介质密度愈大。密度梯度离心法又可分为两种操作方法：速率区带离心技 所受到的离心力越大。计算时通常采用平均距离。 根据离心机转速的不同，常将离心机分为普通离心机（最高转速 4 000 r/min）、高速离 心机（最高转速 20 000r/min）和超高速离心机（最高转速 60 000r/min 以上）。超速离心机 又可分为分析超速离心机和制备超速离心机两类，前者能精确控制离心力，并且可用照相方 法或者电子技术记录沉降粒子在离心过程中的行为，对这些记录进行分析，可以测定粒子的 物理性质，如沉降系数、分子量、扩散系数、沉降物质的不均一性等。 制备离心技术包括两种方法：一种是分级离心法，另一种是密度梯度离心法。 一、分级离心法 非均一的粒子悬浮液在离心机中离心时，各种粒子以各自的沉降速度移向离心管底部， 逐步在底部形成一层沉淀物质。这层沉淀物质含有各种组分，但是最多的是那些沉降得最 快的组分（图 2）。为了分出某一特定组分，需要进行一系列离心。通常先选择一个离心速 度和离心时间，进行第一次离心，把大部分不需要的大粒子沉降去掉，这时所需要的组分 大部分仍留在上清液内；然后将收集到的上清液用更高的转速离心，把需要的粒子沉积下 来。离心时间要选择得当，使大部分不需要的小粒子仍留在上清液中。经过较高速度离心 后，倾去上清液，把沉淀悬浮起来，再用较低转速离心。如此反复高速、低速离心，直至 达到所需粒子的纯度为止。这种基于粒子沉降速度不同而分离的方法，用得非常普遍，对 病毒和亚细胞组分的浓缩特别有用；但是要得到一个纯组分较困难，即使沉降最慢的组分 较纯，它的收得率也是很低的。 二、密度梯度离心法 密度梯度离心法较分级离心法复杂，但是具有很好的分辨能力。密度梯度离心可以同时 使样品中几个或全部组分分离，这是分级离心法所不及的。这个方法是把样品粒子在一个密 度梯度介质中离心，这个介质由一合适的可使小分子和样品粒子在其中悬浮的溶剂组成。离 心时，离轴心愈远介质密度愈大。密度梯度离心法又可分为两种操作方法：速率区带离心技 1 2 3 4 图 2 分级离心法