填充料构成的柱床可以设想为由无数的连续的板层组成，每一板层起着微观的“分溶管作用。当流动相移动时，加在柱上端的氨基酸 混合样品在两相之间发生连续的分配，分配系数不同的各成分以不同的速度沿柱向下移动。 收集成分用茚三酮显色，以氨基酸量对洗脱体积作图，得洗脱曲线。 3滤纸层析 滤纸层析也是分配层析的一种。固定相：滤纸纤维素上吸附的水。流动相：与水互不相溶的溶剂。 4.薄层层析 薄层层析把支持剂（如纤维素粉、硅胶、氧化铝等）涂布在玻璃板上使成一个均匀的薄层，把要分析的样品滴加在薄层的一端，然后 用合适的溶剂在密闭的容器中进行展层，使样品中各个成分分离开来，最后进行鉴定和定量测定。 5.离子交换层析 离子交换层析是一种用离子交换树脂作支持剂的层析法。 离子交换树脂是具有酸性或碱性基团的人工合成的聚苯乙烯-苯二乙烯（交联剂）等不溶性高分子化合物。分为： 阳离子交换树脂：SO3H(强酸型)COOH(弱酸型) 阴离子交换树脂：N(CH3)3OH(强碱型)NH3OH(弱碱型)如：磺酸型阳离子交换树脂。 分离氨基酸常用强酸型阳离子交换树脂，其基本过程： ①树脂用碱敖处理成钠型 ②将氨基酸混合液(pH2-3,为阳离子)上柱，氨基酸与钠离子交换被“挂”上。结合力取决与静电吸引和疏水作用。一般吸附顺序！ 碱性氨基碱>中性氨基酸酸>酸性氨基酸 ③洗脱：用洗脱液将氨基酸从柱上洗脱下来，一般逐步提高H和盐浓度，洗脱顺序： 酸性氨基酸>中性氨基酸>碱性氨基酸 四、肽 (一）肽(peptide)的定义 一个氨基酸的a-氨基与另一个氨基酸的α羧基之间脱水缩合而形成的化合物称之为肽。氨基酸之间的连接键称为肽键，又称酰胺键。 由2个氨基酸组成的肽为二肽(dipeptide),如由丙氨酸和甘氨酸形成的 二肽：丙氨酰甘氨酸 寡肽(oligopeptide):l0个以下氨基酸缩合。 多肽(polypeptide):l0个以上氨基酸形成。 (二)天然存在的活性肽 许多分子量比较小的多肽常以游离状态存在，它们通常都具有特殊的生理功能，称为活性肽(active peptide)。 常见的如：脑啡肽、激素类多肽、抗生素类多肽、谷胱甘肽、蛇毒多肽等。 l.谷胱甘肽(glutathione,GSH) 由Glu、Cys、Gly组成的三肽，含一个Y-肽键。 G$H广泛存在于生物细胞中。含有疏基，有很强的还原性，可作为体内重要的还原剂，保护某些蛋白质中的疏基免遭氧化，使其处于 活性状态。还可清除内源性过氧化物和自由基。 2.催产素、加压素 均为九肽，分子中含一个二硫键，两者结构类似。 催产素刺激子宫的收缩，促进分娩。 加压素促进小动脉收缩，使血压升高。 3.脑啡肽(5肽)Met一—脑啡肽：Tyr一Gy-Gy-Phe-Met填充料构成的柱床可以设想为由无数的连续的板层组成，每一板层起着微观的“分溶管”作用。当流动相移动时，加在柱上端的氨基酸 混合样品在两相之间发生连续的分配，分配系数不同的各成分以不同的速度沿柱向下移动。 收集成分用茚三酮显色，以氨基酸量对洗脱体积作图，得洗脱曲线。 3. 滤纸层析 滤纸层析也是分配层析的一种。固定相：滤纸纤维素上吸附的水。流动相：与水互不相溶的溶剂。 4. 薄层层析 薄层层析把支持剂（如纤维素粉、硅胶、氧化铝等）涂布在玻璃板上使成一个均匀的薄层，把要分析的样品滴加在薄层的一端，然后 用合适的溶剂在密闭的容器中进行展层，使样品中各个成分分离开来，最后进行鉴定和定量测定。 5. 离子交换层析 离子交换层析是一种用离子交换树脂作支持剂的层析法。 离子交换树脂是具有酸性或碱性基团的人工合成的聚苯乙烯 – 苯二乙烯（交联剂）等不溶性高分子化合物。分为： 阳离子交换树脂：-SO3H （强酸型） -COOH（弱酸型） 阴离子交换树脂：-N（CH3）3OH（强碱型） -NH3OH（弱碱型）如：磺酸型阳离子交换树脂。 分离氨基酸常用强酸型阳离子交换树脂，其基本过程： ① 树脂用碱处理成钠型， ② 将氨基酸混合液（pH2-3，为阳离子）上柱，氨基酸与钠离子交换被“挂”上。结合力取决与静电吸引和疏水作用。一般吸附顺序： 碱性氨基碱＞中性氨基酸酸＞酸性氨基酸 ③ 洗脱：用洗脱液将氨基酸从柱上洗脱下来，一般逐步提高pH和盐浓度，洗脱顺序： 酸性氨基酸＞ 中性氨基酸＞碱性氨基酸 四、肽 （一）肽（peptide）的定义 一个氨基酸的α- 氨基与另一个氨基酸的α-羧基之间脱水缩合而形成的化合物称之为肽。氨基酸之间的连接键称为肽键，又称酰胺键。 由2个氨基酸组成的肽为二肽（dipeptide），如由丙氨酸和甘氨酸形成的 二肽：丙氨酰甘氨酸 寡肽（oligopeptide）：10个以下氨基酸缩合。 多肽（polypeptide）： 10个以上氨基酸形成。 （二）天然存在的活性肽 许多分子量比较小的多肽常以游离状态存在，它们通常都具有特殊的生理功能，称为活性肽（active peptide）。 常见的如：脑啡肽、激素类多肽、抗生素类多肽、谷胱甘肽、蛇毒多肽等。 1. 谷胱甘肽（glutathione，GSH） 由Glu、Cys、Gly组成的三肽，含一个 γ –肽键。 GSH广泛存在于生物细胞中。含有巯基，有很强的还原性，可作为体内重要的还原剂，保护某些蛋白质中的巯基免遭氧化，使其处于 活性状态。还可清除内源性过氧化物和自由基 。 2. 催产素、加压素 均为九肽，分子中含一个二硫键，两者结构类似。 催产素 刺激子宫的收缩，促进分娩。 加压素 促进小动脉收缩，使血压升高。 3. 脑啡肽（5肽）Met——脑啡肽：Tyr—Gly—Gly—Phe—Met