设还产生了良好的国际影响。中华骨髓库已为来自美国、加拿大、新加坡、英国、法国、德国、澳大利 亚、挪威、日本、瑞士、韩国、阿富汗等国家,以及台湾、香港地区的患者提供了检索査询服务,其中 70多名捐献者为境外患者捐献造血干细胞,预计到2015年中华骨髓捐赠志愿者数量将达200万人。目前中华 骨髓库每月开展供者检索服务200余例,初次检索符合率达60%以上,寻求到合适供者的时间约为2个月。 无关供者的选择 (一)人类白细胞抗原( human leukocyte antigen,HA) HLA是迄今已知人类基因组中最复杂的基因位点,具有高度的多态性,在兔疫反应中起着重要的作 用,HAI类基因(HA-A、HLAB、HLA-C基因位点)和HLAⅡ类基因(HLA-DRB1、HLA-DQB1、 HLA-DPBI基因位点)对造血干细胞移植疗效的影响最大。应用微量淋巴细胞毒试验鉴定T或B淋巴细胞 上的HLA抗原的血清学方法是HLA分型的经典技术。由于HLA抗血清本身的交叉反应,弱反应以及额外 反应等特性造成HLA血清学分型错误率高达25%。随着造血干细胞移植和器官移植的日趋发展,单纯的 传统方法已无法满足临床需要。现代科学研究发现,HLA的多态性取决于基因产物的碱基序列,因此将 分子生物学技术应用于HLA领域是非常必要的,其特点是:能直接从基因水平对HLA基因多态性做出 分析,方法准确而灵敏,能检出血清学方法所无法检出的基因型别。HLA血清学配型相合的供受者仍然 有30%基因学分型不相合。自1999年起,美国NMDP以及世界骨髓供者协会(WMDA)都明确要求以DNA 方法对干细胞供者做HLA分型。 供、受者HLA-和∏类抗原的不同是导致供者T淋巴细胞活化,触发GⅤHD反应的核心,因此精确的 供{受者HLA基因检测及最适的供者选择直接影响移植预后。最近Lee等对NMDP1988年至2003年间3860 例无关供者造血干细胞移植进行回顾性分析,结果表明:HLA-A、-B、C和HLA-DRB1基因位点不合患 者的aGⅤHD的发生率和移植相关死亡率明显增加,而HLA-DQBl基因位点不合则无明显影响,此外,不 同的临床研究表明HLA-A基因位点不合和慢性GVHD密切相关,HLA-C基因位点不合患者植入失败发生 率明显增加 全球造血干细胞资料库的建立和完善为供者的寻找提供了便利,高分辨率的分子分型技术为精确配 型奠定了基础。通过大样本回顾性分析以进一步鉴定允许和非允许不相合的HLA等位基因,将进一步阐 明HA位点不相合对移植疗效的影响并指导临床供者的选择。最近 Kawase等对JMDP1993年至2006年间 5210例HLA-A,-B和-DR抗原位点相合的供受者进行回顾性分析,结果表明15个HLA等位基因是非允许 不相合的位点,其中包括4个HLA-A,1个HLA-B,7个HLAC,1个HLA-DRB1,2个HLA-DPB1等位 基因和1个HLA-DRB1-DQB连锁等位基因,若供受者存在非允许不相合的位点则重度aGⅤHD的发生风 险明显增加。 (二)非HLA基因多态性 即使在HLA全相合的异基因造血干细胞移植中仍有一定比例的病人发生GVHD反应,随着人类基因 组计划的提前完成和基因分型技术的发展,个体化的基因背景分析成为可能,目前发现供受者非HLA基 因的多态性对GⅤHD的发生风险、预处理相关毒性反应及感染性疾病的发生风险均具有重要作用。 1.杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR) 2002年,《 SCIENCE》杂志首次报道了HLA半相合移植中供者抑制性KIR配体不相合可以显著改善 移植预后,并将该重大发现称之为“完美的不相合”。该项研究对接受HA半相合同胞供者allo-HSCT的 急性髓细胞白血病(AML)的研究显示,当供者KIR与受者MHC-1类分子不相合时,GVHD的发生降低 91994-2013ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreservedhttp://www.cnki.net设还产生了良好的国际影响。中华骨髓库已为来自美国、加拿大、新加坡、英国、法国、德国、澳大利 亚、挪威、日本、瑞士、韩国、阿富汗等国家，以及台湾、香港地区的患者提供了检索查询服务，其中 70多名捐献者为境外患者捐献造血干细胞，预计到2015年中华骨髓捐赠志愿者数量将达200万人。目前中华 骨髓库每月开展供者检索服务200余例，初次检索符合率达60%以上，寻求到合适供者的时间约为2个月。 二、无关供者的选择 (一)人类白细胞抗原（human leukocyte antigen， HLA） HLA是迄今已知人类基因组中最复杂的基因位点，具有高度的多态性，在免疫反应中起着重要的作 用，HLAⅠ类基因（HLA-A、HLA-B、HLA-C基因位点）和HLAⅡ类基因（HLA-DRB1、HLA-DQB1、 HLA-DPB1基因位点）对造血干细胞移植疗效的影响最大。应用微量淋巴细胞毒试验鉴定T 或 B淋巴细胞 上的HLA抗原的血清学方法是 HLA 分型的经典技术。由于HLA抗血清本身的交叉反应，弱反应以及额外 反应等特性造成 HLA血清学分型错误率高达 25%。随着造血干细胞移植和器官移植的日趋发展，单纯的 传统方法已无法满足临床需要。现代科学研究发现，HLA 的多态性取决于基因产物的碱基序列，因此将 分子生物学技术应用于 HLA 领域是非常必要的，其特点是：能直接从基因水平对 HLA 基因多态性做出 分析，方法准确而灵敏，能检出血清学方法所无法检出的基因型别。HLA血清学配型相合的供受者仍然 有30%基因学分型不相合。自1999年起，美国 NMDP以及世界骨髓供者协会 (WMDA ) 都明确要求以DNA 方法对干细胞供者做HLA分型。 供、受者HLA-I和II类抗原的不同是导致供者T淋巴细胞活化，触发GVHD反应的核心，因此精确的 供/受者HLA基因检测及最适的供者选择直接影响移植预后。最近Lee等对NMDP 1988年至2003年间3860 例无关供者造血干细胞移植进行回顾性分析，结果表明：HLA-A、-B、-C和HLA-DRB1基因位点不合患 者的aGVHD的发生率和移植相关死亡率明显增加，而HLA-DQB1基因位点不合则无明显影响，此外，不 同的临床研究表明HLA-A基因位点不合和慢性GVHD密切相关，HLA-C基因位点不合患者植入失败发生 率明显增加。 全球造血干细胞资料库的建立和完善为供者的寻找提供了便利，高分辨率的分子分型技术为精确配 型奠定了基础。通过大样本回顾性分析以进一步鉴定允许和非允许不相合的HLA等位基因，将进一步阐 明HLA位点不相合对移植疗效的影响并指导临床供者的选择。最近Kawase 等对JMDP 1993年至2006年间 5210例HLA-A， -B和 -DR抗原位点相合的供受者进行回顾性分析，结果表明15个HLA等位基因是非允许 不相合的位点，其中包括4个 HLA-A， 1个 HLA-B， 7个 HLA-C， 1个HLA-DRB1， 2个 HLA-DPB1等位 基因和1 个HLA-DRB1-DQB1连锁等位基因，若供受者存在非允许不相合的位点则重度aGVHD的发生风 险明显增加。 （二）非HLA基因多态性 即使在HLA全相合的异基因造血干细胞移植中仍有一定比例的病人发生GVHD反应，随着人类基因 组计划的提前完成和基因分型技术的发展，个体化的基因背景分析成为可能，目前发现供受者非HLA基 因的多态性对GVHD的发生风险、预处理相关毒性反应及感染性疾病的发生风险均具有重要作用。 1．杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR） 2002年，《SCIENCE》杂志首次报道了HLA半相合移植中供者抑制性KIR-配体不相合可以显著改善 移植预后，并将该重大发现称之为“完美的不相合”。该项研究对接受HLA半相合同胞供者allo-HSCT的 急性髓细胞白血病（AML）的研究显示，当供者KIR与受者MHC-I类分子不相合时，GVHD的发生降低， ·10·