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法去验证上述结论,即通过葡聚糖硫酸钠(DSS)处理小鼠诱导其 得结肠炎(colitis),从而破坏其肠上皮细胞且使Hopx+细胞之一 杯状细胞(globlet cells)丢失,用该种小鼠与未处理(naive)小鼠 对比,发现前者粪便中的mRNA减少了,进一步说明粪便中的 miRNA来源于肠上皮细胞。至此,细心的读者会质疑:粪便中的 miRNA是由上皮细胞分泌进入粪便中的?还是粪便中的miRNA分 离自脱落的上皮细胞本身呢?作者继续比较了上皮细胞与肠内容物 中miRNA的组成,发现有很多miRNA是两者共有的,但肠内容物 中许多种miRNA的丰度比上皮细胞高得多,这说明两者是有区别的, 故排除粪便中的miRNA是分离自脱落的上皮细胞一说,印证粪便中 的miRNA是上皮细胞分泌而来的。 另外作者还考虑淋巴细胞是不是粪便中miRNA的来源,于是其 设计了实验进行检测。Rgl基因被敲除的小鼠不能形成淋巴B、T 细胞,故作者构建了Ragl-与野生型型小鼠(WT进行比较,发现两 者粪便中的miRNA相差不大(图2D),故淋巴细胞不是粪便中 miRNA的来源。 Log2 IFold change(/Dicer1) Log2 [Fold change (Dicer1/Dicer1) 图2肠上皮细胞(IECs)和表达Hopx细胞是粪便中miRNA的 主要来源法去验证上述结论,即通过葡聚糖硫酸钠(DSS)处理小鼠诱导其 得结肠炎(colitis),从而破坏其肠上皮细胞且使 Hopx+细胞之一—— 杯状细胞(globlet cells)丢失,用该种小鼠与未处理(naive)小鼠 对比,发现前者粪便中的 miRNA 减少了,进一步说明粪便中的 miRNA 来源于肠上皮细胞。至此,细心的读者会质疑:粪便中的 miRNA 是由上皮细胞分泌进入粪便中的?还是粪便中的 miRNA 分 离自脱落的上皮细胞本身呢?作者继续比较了上皮细胞与肠内容物 中 miRNA 的组成,发现有很多 miRNA 是两者共有的,但肠内容物 中许多种 miRNA 的丰度比上皮细胞高得多,这说明两者是有区别的, 故排除粪便中的 miRNA 是分离自脱落的上皮细胞一说,印证粪便中 的 miRNA 是上皮细胞分泌而来的。 另外作者还考虑淋巴细胞是不是粪便中 miRNA 的来源,于是其 设计了实验进行检测。Rag1 基因被敲除的小鼠不能形成淋巴 B、T 细胞,故作者构建了 Rag1-/-与野生型型小鼠(WT)进行比较,发现两 者粪便中的 miRNA 相差不大(图 2D),故淋巴细胞不是粪便中 miRNA 的来源。 图 2 肠上皮细胞(IECs)和表达 Hopx 细胞是粪便中 miRNA 的 主要来源
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