然后以1对作图,得到一条直线,外推至与x轴相交,直线在-x轴和 y轴的截距分别为上和1,直线的斜率为人。Kn=-1此法方便且最常 ax 用,但实验点过分集中在直线的左端,作图不易十分准确(图6-5)。 斜率= 图6-5双倒数作图法 3. Adic- Hofstee法 Tadic- Hofstee法又名ν-ν/[S]法,是将米氏方程改写为: 以ν对υ作图,得到一条直线,其y轴的截距为V,x轴截距为 斜率为 酶的K值范围很宽,一般在106~10-mol/L之间,表6-4列出了一些酶 的 表6-4一些酶的K值 酶 底物 K.(mo1/L) 过氧化氢酶 H202 2.5×10 转移酶 蔗糖 棉子糖 3.5×10 谷氨酸脱氢酶 谷氨酸 1.2×10 a-酮戊二酸 2.0×10 NAD氧化型 2.5×10 NAD还原型 1.8×10 乳酸脱氢酶 丙酮酸 1.7×10 β-半乳糖苷酶乳糖 4.0×10- 15 - 然后以 [S] 1 1 对 v 作图，得到一条直线，外推至与 x 轴相交，直线在-x 轴和 y 轴的截距分别为 max 1 1 K v m 和 ，直线的斜率为 max v Km 。 x 1 = - Km 此法方便且最常 用,但实验点过分集中在直线的左端，作图不易十分准确(图 6-5)。 v 1 Vmax K m max 1 V S 1 K m 1 − 图 6-5 双倒数作图法 3.Eadic-Hofstee 法 Eadic-Hofstee 法又名 v - v /[S]法，是将米氏方程改写为： max [S] V v v = −Km + 以 v对 [S] υ 作图，得到一条直线，其 y 轴的截距为Vmax，x 轴截距为 Km vmax ， 斜率为- Km。 酶的 Km值范围很宽，一般在 10-6～10-1mol/L之间，表 6-4 列出了一些酶 的 Km。 表 6-4 一些酶的 值 Km 酶 底物 Km (mol/L) 过氧化氢酶 H2O2 2.5×10-2 转移酶 蔗糖 2.8×10-2 棉子糖 3.5×10-1 谷氨酸脱氢酶 谷氨酸 1.2×10-4 α-酮戊二酸 2.0×10-3 NAD 氧化型 2.5×10-5 NAD 还原型 1.8×10-5 乳酸脱氢酶 丙酮酸 1.7×10-5 β-半乳糖苷酶 乳糖 4.0×10-3