图5-2平板划线法的各种姿势 1焦性没食子酸法利用焦性没食子酸在碱性溶液内能大量地吸收氧的原理进行厌氧培 养。通常100cm3空间用焦性没食子酸1g,10%氢氧化钠或氢氧化钾10ml。具体方法有下列几 种： (1)平板培养法将厌氧菌划线接种于适宜的琼脂平板。取一小团直径约2cm的脱脂棉，置 于平皿盖的内面中央，其上滴加10%氢氧化钠溶液约5ml:在靠近脱脂棉的一侧放置焦性没 食子酸约0.5g,注意暂勿使两者接触。立即将已接种的平板覆盖于平皿盖上，迅速用融化的石 蜡密封平皿边缘周围。封毕，轻轻摇动平皿，使被氢氧化钠溶液浸湿的脱脂棉与焦性没食子 酸接触，然后置37℃恒温箱中培养。 (2)干燥器培养法于干燥器底部放入氢氧化钠溶液适量，然后再放入2-3个略高于液面 的玻璃圆柱（可利用链霉素小瓶），将适量焦性没食子酸用纸或纱布包好，放置于圆柱上面使 暂勿与氢氧化钠接触。然后放下隔板，将己接种的培养皿或试管置于隔板上，待一切准备好 后，将盖盖好密封，并轻轻摇动干燥器，使焦性没食子酸落入氢氧化钠溶液中。 2.高层琼脂柱摇震培养分离法 (I)取长约15cm的玻璃管一支，一端塞以小胶塞或小木塞，另一端塞以棉花塞，高压灭 菌备用。 (2)加热融化一管适合分离厌氧菌用的琼脂培养基，待冷至50℃左右，接入少许经适当稀 释的待分离的培养物或含菌材料，充分摇震均匀。 ()在琼脂凝固前，迅速以无菌滴管吸取上述已接种的琼脂培养基，注入上述(1)准备 好的玻璃管内，装至4/5左右之处，塞好棉花塞，放在大试管或玻璃筒内，置37℃恒温箱中 培养。 (4)长出菌落后，拔去胶塞和棉花塞，以无茵玻棒将琼脂柱推出于无菌平皿中，再用灭菌 接种环钓取独立菌落作厌氧纯培养。 3.连二亚硫酸钠法将已接种的平板或斜面培养基，置于一玻璃干燥器内（预先测出体 积)，按每1000ml容积称取连二亚硫酸钠（又称保险粉）和无水碳酸钠各4g,并分别研细均10 图 5-2 平板划线法的各种姿势 1.焦性没食子酸法 利用焦性没食子酸在碱性溶液内能大量地吸收氧的原理进行厌氧培 养。通常 100cm3 空间用焦性没食子酸 1g，10%氢氧化钠或氢氧化钾 l0ml。具体方法有下列几 种： (1)平板培养法将厌氧菌划线接种于适宜的琼脂平板。取一小团直径约 2cm 的脱脂棉，置 于平皿盖的内面中央，其上滴加 10%氢氧化钠溶液约 5ml；在靠近脱脂棉的一侧放置焦性没 食子酸约 0.5g,注意暂勿使两者接触。立即将已接种的平板覆盖于平皿盖上，迅速用融化的石 蜡密封平皿边缘周围。封毕，轻轻摇动平皿，使被氢氧化钠溶液浸湿的脱脂棉与焦性没食子 酸接触，然后置 37℃恒温箱中培养。 (2)干燥器培养法 于干燥器底部放入氢氧化钠溶液适量，然后再放入 2-3 个略高于液面 的玻璃圆柱（可利用链霉素小瓶），将适量焦性没食子酸用纸或纱布包好，放置于圆柱上面使 暂勿与氢氧化钠接触。然后放下隔板，将已接种的培养皿或试管置于隔板上，待一切准备好 后，将盖盖好密封，并轻轻摇动干燥器，使焦性没食子酸落入氢氧化钠溶液中。 2．高层琼脂柱摇震培养分离法 (1)取长约 15 cm 的玻璃管一支，一端塞以小胶塞或小木塞，另一端塞以棉花塞，高压灭 菌备用。 (2)加热融化一管适合分离厌氧菌用的琼脂培养基，待冷至 50℃左右，接入少许经适当稀 释的待分离的培养物或含菌材料，充分摇震均匀。 (3)在琼脂凝固前，迅速以无菌滴管吸取上述已接种的琼脂培养基，注入上述（1）准备 好的玻璃管内，装至 4/5 左右之处，塞好棉花塞，放在大试管或玻璃筒内，置 37℃恒温箱中 培养。 (4)长出菌落后，拔去胶塞和棉花塞，以无菌玻棒将琼脂柱推出于无菌平皿中，再用灭菌 接种环钓取独立菌落作厌氧纯培养。 3．连二亚硫酸钠法 将已接种的平板或斜面培养基，置于一玻璃干燥器内（预先测出体 积），按每 1000rnI 容积称取连二亚硫酸钠（又称保险粉）和无水碳酸钠各 4g，并分别研细均