(③)吸附剂的活性与相对湿度对薄层色谱的影响：吸附剂的活性是由表面能与表面积决定的。表面 能越大，单位重量的表面积（比表面积越大，吸附力越大，即活性越高，反之，吸附力越小，活性越 低。如硅胶之所以有吸附力，是由于其表面含众多的硅醇基，硅醇基的活泼羟基及游离羟基与极性 化合物或不饱和化合物形成氢键。活泼型及游离型的硅醇基数目决定着硅胶的活性。硅醇基是亲水 性基团，很容易吸附水而成为水合硅醇基而失去活性。自制的薄层板在105~110°℃C烘干，就是使水 合硅醇基变为游离硅醇基而活化，反之，活化后的硅胶薄层板可以吸附大气中的水蒸气分子降低活 性。也就是说硅胶表面吸附水分的作用是可逆的，在不同的相对湿度下，可以达到不同程度的吸附 亚衡， 在相对湿度改变的情况下会重新达到新的吸附平衡， 而不论在此以前硅胶板是处于何种相 湿度状态。在日常实践中，当活化后的硅胶（或氧化铝）薄层板从干燥器中取出，从准备点样到展开 前，薄层板是暴露在实验室的大气中，薄层板的活性就取决于实验环境的相对湿度。其他条件相同 的情况下，相对湿度对色谱质量的影响是很明显的。通常认为薄层色谱的重现性差，薄层板处在不 同相对湿度下操作是主要的原因之 加厚从的层鉴别厚A需在相显度85%上展开 整个 色谱的分离度才有明显改善 赤芍与 在低湿度<30% 展开 不易区分 在高湿度(80%)下 展开，色谱的分离度提高，从而显示出两者的差异部分。相反，万应锭中熊胆的鉴别，必须在低湿 度下展开，方可达到较为满意的结果，在32%相对湿度下展开，熊胆中的各游离胆酸（包括处方中的 牛胆汁和人工牛黄的游离胆酸)，如胆酸、猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸，可以 清楚地加以辨认， 而在70%相对湿度下展开，色谱质量明显降低，难以辨别 n妇显度在80%心 上展开，则色谱面目全非。苍术正己烷提取物的薄层鉴别，相对湿度对分辨率影响也是很明显的 有些样品的成分和所选用的展开剂对相对湿度有较宽的适应能力 即对相对湿度的要求不甚严 大致在相对湿度30% 70% 境条 (温度和 相对湿度)恰好 适合的情况下，似乎不必控制条件也能把试验做好，但为了不同实验室之间及不同季节均可重现试 验结果，应尽可能在相对湿度可控的条件下展开为宜。至少必须记录试验时实际的相对湿度。 相对湿度的控制方法，可在双槽展开箱的一侧槽中加入适当浓度的硫酸，将点样后的薄层板放入 另一侧槽中，密闭放置15~30分钟，再加展开剂展开；另一种方法是在预先准备好的条件控制箱（状 如平卧式展开箱，内盛适当浓度的硫酸，或用大小适宜的干燥器)内进行。 控制相对湿度用的硫酸溶液如下表。 相对湿度 所需硫酸浓度(VW) 硫酸(ml)+水(ml) 32% 42% 58% 65 72% 88%68 100 57 100 39.5 100 34 100 275 100 10.8 100 硫酸：D=1.86(96%~97%) (4)溶剂蒸气在薄层色谱中的作用：薄层色谱与柱色谱的区别之一就是溶剂的蒸气相在展开箱中也 参与色谱展开而形成三维的层析过程，展开箱的气体空间在层析过程中起着重要的作用。 (3)吸附剂的活性与相对湿度对薄层色谱的影响：吸附剂的活性是由表面能与表面积决定的。表面 能越大，单位重量的表面积(比表面积)越大，吸附力越大，即活性越高，反之，吸附力越小，活性越 低。如硅胶之所以有吸附力，是由于其表面含众多的硅醇基，硅醇基的活泼羟基及游离羟基与极性 化合物或不饱和化合物形成氢键。活泼型及游离型的硅醇基数目决定着硅胶的活性。硅醇基是亲水 性基团，很容易吸附水而成为水合硅醇基而失去活性。自制的薄层板在105～110℃烘干，就是使水 合硅醇基变为游离硅醇基而活化，反之，活化后的硅胶薄层板可以吸附大气中的水蒸气分子降低活 性。也就是说硅胶表面吸附水分的作用是可逆的，在不同的相对湿度下，可以达到不同程度的吸附 平衡，在相对湿度改变的情况下会重新达到新的吸附平衡，而不论在此以前硅胶板是处于何种相对 湿度状态。在日常实践中，当活化后的硅胶(或氧化铝)薄层板从干燥器中取出，从准备点样到展开 前，薄层板是暴露在实验室的大气中，薄层板的活性就取决于实验环境的相对湿度。其他条件相同 的情况下，相对湿度对色谱质量的影响是很明显的。通常认为薄层色谱的重现性差，薄层板处在不 同相对湿度下操作是主要的原因之一。如厚朴的薄层鉴别厚朴酚需在相对湿度85％以上展开，整个 色谱的分离度才有明显改善。赤芍与白芍在低湿度＜30％下展开，二者不易区分；在高湿度(80％)下 展开，色谱的分离度提高，从而显示出两者的差异部分。相反，万应锭中熊胆的鉴别，必须在低湿 度下展开，方可达到较为满意的结果，在32％相对湿度下展开，熊胆中的各游离胆酸(包括处方中的 牛胆汁和人工牛黄的游离胆酸)，如胆酸、猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸，可以 清楚地加以辨认，而在70％相对湿度下展开，色谱质量明显降低，难以辨别。如相对湿度在80％以 上展开，则色谱面目全非。苍术正己烷提取物的薄层鉴别，相对湿度对分辨率影响也是很明显的。 有些样品的成分和所选用的展开剂对相对湿度有较宽的适应能力，即对相对湿度的要求不甚严 格，大致在相对湿度30％～70％下得到相当稳定的色谱。有的样品在环境条件(温度和相对湿度)恰好 适合的情况下，似乎不必控制条件也能把试验做好，但为了不同实验室之间及不同季节均可重现试 验结果，应尽可能在相对湿度可控的条件下展开为宜。至少必须记录试验时实际的相对湿度。 相对湿度的控制方法，可在双槽展开箱的一侧槽中加入适当浓度的硫酸，将点样后的薄层板放入 另一侧槽中，密闭放置15～30分钟，再加展开剂展开；另一种方法是在预先准备好的条件控制箱(状 如平卧式展开箱，内盛适当浓度的硫酸，或用大小适宜的干燥器)内进行。 控制相对湿度用的硫酸溶液如下表。 相对湿度 所需硫酸浓度（V/V） 硫酸（ml） + 水（ml） 32% 42% 58% 65% 72% 88% 68 100 57 100 39.5 100 34 100 27.5 100 10.8 100 硫酸：D＝1.86(96%～97%) (4)溶剂蒸气在薄层色谱中的作用：薄层色谱与柱色谱的区别之一就是溶剂的蒸气相在展开箱中也 参与色谱展开而形成三维的层析过程，展开箱的气体空间在层析过程中起着重要的作用