(7)离心管 (8)离心机(4000rmin (9)烧杯(250mL,50mL.10mL) (10)滴管及玻棒 (11)吸滤瓶(500mL) (12)布氏漏斗(60mm) (13)表面皿(8cm (14)烘箱 (15)干操器 (16)紫外可见分光光度计 3.试剂 (1)NaCI(化学纯) (2)6mol/L HCI (3)95%乙醇（化学纯） 四、操作步骤 1.提取 活性干酵母粉5g,倒入100mL三角瓶中，加NaC15g,水50mL,搅拌均匀，置于沸 水浴中提取1h。 2.分离 将上述提取液取出，立即用自来水冷却，装入大离心管内，以3500rmin离心10min, 使提取液与菌体残渣等分离。 3.沉淀RNA 将离心得到的上清液倾于50mL烧杯中，并置于放有冰块的250mL烧杯中冷却，待冷 至10℃以下时，用6 mol/L HCI小心地调节pH至2.0~2.5。随着pH下降，溶液中白色沉 淀逐渐增加，到等电点时沉淀量最多（注意严格控制pH)。调好后继续于冰水中静置1Omim 使沉淀充分，颗粒变大。 4.抽滤和洗涤 上述悬浮液以3000r/min离心10min,得到RNA沉淀，将沉淀物放在10mL小烧杯内， 用95%的乙醇5~I0mL充分搅拌洗涤，然后在铺有己称重滤纸的布氏漏斗上用真空泵抽 气过滤，再用95%乙醇5一I0mL淋洗3次。由于RNA不溶于乙醇，洗涤不仅可脱水，使 沉淀物疏松，便于过滤、干燥，而且可除去可溶性的脂类及色素等杂质，提高了制品的纯 度。 5.干燥 从布氏漏斗上取下有沉淀物的滤纸，放在8cm表面皿上，置于80℃烘箱内干燥。将 17 17 （7）离心管 （8）离心机（4 000r/min） （9）烧杯（250mL, 50mL, 10mL） （10）滴管及玻棒 （11）吸滤瓶（500mL） （12）布氏漏斗（60mm） （13）表面皿（8cm） （14）烘箱 （15）干燥器 （16）紫外可见分光光度计 3．试剂 （1）NaCl（化学纯） （2）6mol/L HCl （3）95％乙醇（化学纯） 四、操作步骤 1．提取 活性干酵母粉 5g，倒入 100mL 三角瓶中，加 NaCl 5g，水 50mL，搅拌均匀，置于沸 水浴中提取 1h。 2．分离 将上述提取液取出，立即用自来水冷却，装入大离心管内，以 3 500r/min 离心 10min， 使提取液与菌体残渣等分离。 3．沉淀 RNA 将离心得到的上清液倾于 50mL 烧杯中，并置于放有冰块的 250mL 烧杯中冷却，待冷 至 10℃以下时，用 6mol/L HCl 小心地调节 pH 至 2.0～2.5。随着 pH 下降，溶液中白色沉 淀逐渐增加，到等电点时沉淀量最多（注意严格控制 pH）。调好后继续于冰水中静置 10min， 使沉淀充分，颗粒变大。 4．抽滤和洗涤 上述悬浮液以 3 000r/min 离心 10min，得到 RNA 沉淀。将沉淀物放在 10mL 小烧杯内， 用 95％的乙醇 5～10mL 充分搅拌洗涤，然后在铺有已称重滤纸的布氏漏斗上用真空泵抽 气过滤，再用 95％乙醇 5～10mL 淋洗 3 次。由于 RNA 不溶于乙醇，洗涤不仅可脱水，使 沉淀物疏松，便于过滤、干燥，而且可除去可溶性的脂类及色素等杂质，提高了制品的纯 度。 5．干燥 从布氏漏斗上取下有沉淀物的滤纸，放在 8cm 表面皿上，置于 80℃烘箱内干燥。将