《工业微生物学》 待在皿盖平板上接入待培养的厌氧菌后,立即密闭。摇动使焦性没食子酸和NaOH溶液 接触,发生吸氧反应,从而造成无氧环境(例如 Spray皿和Bray皿,见图33.5)。 皿盖 焦性没食子酸 琼脂平板 狭窄空间 NaOH 焦性没食子酸 琼脂平板 Brewer皿 Spray皿 图33.5三钟厌氧培养皿 3)厌氧罐厌氧罐的类型很多,一般都有一个用聚碳酸酯制成的透明罐体,上面是一 个用螺旋夹紧密夹住的罐盖,盖内的中央有不锈钢丝织成的网袋,内放钯催化剂。罐内 放有含美蓝的氧化还原指示剂,见图33.6。使用时,先装入待培养物,然后密闭罐盖 接着抽真空→灌氮→抽真空→灌氮→抽真空→灌混合气体(N:CO2:H2=8010:I0ⅴ/V 罐内少量剩余氧在钯催化剂作用下,可被灌入的混合气体中的H2还原成水,从而造成 很高的无氧状态。真空度低于26664Pa(20mmHg)时,指示剂美蓝被还原成无色。罐内 一般可以放10只培养皿或其它液体培养物。也可以在罐内放入商品化的“ Gaspak”产 气袋,将袋口剪开一只角,加入适量的水后,即会自动放出H2和CO 螺旋夹钯催化剂粒 带0形垫的盖 充满无氧空气 厌氧度指示剂 (美蓝) 倒置的培养皿 物料进出口 图3.3.6厌氧罐的一般构造 图3.37手套厌氧箱的一般构造 (4)厌氧手套箱( anaerobic glove box)手套箱是由透明的材料制成的箱式结构,箱体结 构严密,可以通过与箱壁相连的手套进行箱内的操作。箱内充满85%氮气、5%二氧化 碳和10%的氢气,同时,还用钯催化剂清除氧气,使箱内保持严格的无氧状态。物料可 以通过特殊的交换室进出,见图3.3.7 3312生产中常见的固体培养 在生产实践中,好氧真菌的固体培养方法都是将接种后的固体基质薄薄地摊铺在容 器的表面,这样,既可使菌体获得充足的氧气,又可以将生长过程中产生的热量及时释 改,这就是传统的曲法培养的基本原理 固体培养使用的基本培养基原料是小麦麸皮。将麸皮和水混合,必要时添加一些辅 助的营养物和缓冲剂,灭菌后待冷却到合适温度便可接种。疏松的麸皮培养基的多孔结 构便于空气透入,为好氧微生物提供生长必需的氧气。这时,固体培养基中的含水量控 制在40%-80%之间(典型的液体培养基含水量在95%以上),细菌和酵母菌将无法忍受 如此低水含量的环境,所以,固体培养被细菌或酵母菌污染的可能性大大降低。这也是《工业微生物学》 第三章 3 待在皿盖平板上接入待培养的厌氧菌后，立即密闭。摇动使焦性没食子酸和 NaOH 溶液 接触，发生吸氧反应，从而造成无氧环境（例如 Spray 皿和 Bray 皿，见图 3.3.5）。 图 3.3.5 三钟厌氧培养皿 （3）厌氧罐 厌氧罐的类型很多，一般都有一个用聚碳酸酯制成的透明罐体，上面是一 个用螺旋夹紧密夹住的罐盖，盖内的中央有不锈钢丝织成的网袋，内放钯催化剂。罐内 放有含美蓝的氧化还原指示剂，见图 3.3.6。使用时，先装入待培养物，然后密闭罐盖， 接着抽真空→灌氮→抽真空→灌氮→抽真空→灌混合气体（N2:CO2:H2 = 80:10:10V/V)。 罐内少量剩余氧在钯催化剂作用下，可被灌入的混合气体中的 H2 还原成水，从而造成 很高的无氧状态。真空度低于 266.64Pa(20mmHg)时，指示剂美蓝被还原成无色。罐内 一般可以放 10 只培养皿或其它液体培养物。也可以在罐内放入商品化的“Gaspak”产 气袋，将袋口剪开一只角，加入适量的水后，即会自动放出 H2 和 CO2。 图 3.3.6 厌氧罐的一般构造 图 3.3.7 手套厌氧箱的一般构造 (4) 厌氧手套箱（anaerobic glove box）手套箱是由透明的材料制成的箱式结构，箱体结 构严密，可以通过与箱壁相连的手套进行箱内的操作。箱内充满 85% 氮气、5%二氧化 碳和 10%的氢气，同时，还用钯催化剂清除氧气，使箱内保持严格的无氧状态。物料可 以通过特殊的交换室进出，见图 3.3.7。 3.3.1.2 生产中常见的固体培养 在生产实践中，好氧真菌的固体培养方法都是将接种后的固体基质薄薄地摊铺在容 器的表面，这样，既可使菌体获得充足的氧气，又可以将生长过程中产生的热量及时释 放，这就是传统的曲法培养的基本原理。 固体培养使用的基本培养基原料是小麦麸皮。将麸皮和水混合，必要时添加一些辅 助的营养物和缓冲剂，灭菌后待冷却到合适温度便可接种。疏松的麸皮培养基的多孔结 构便于空气透入，为好氧微生物提供生长必需的氧气。这时，固体培养基中的含水量控 制在 40%~80%之间（典型的液体培养基含水量在 95%以上），细菌和酵母菌将无法忍受 如此低水含量的环境，所以，固体培养被细菌或酵母菌污染的可能性大大降低。这也是