最大的优点为能准确整合于宿主细胞的染色体中,所携带的外源目的基因及有关序列不 会发生重排,因而能长期稳定表达。感染细胞范围较广,感染率比较高,由于结构基因均被 删除,因此免疫原性较低。对感染细胞无毒性作用。可附加不同的调控元件来提高外源基因 的表达效率,并对之进行调控。 局限性:逆转录病毒只能在核膜尚未形成时,才能进入核内,因此它只能将外源基因转 移至增殖分裂的细胞,而对静止细胞转录效果不佳。由于该病毒基因本身不大,故能容纳外 源基因的大小有限,应小于8kb。逆转录病毒稳定性较差,难耐受体外的操作,在纯化或浓缩 过程常使其感染性降低。病毒颗粒能迅速被补体破坏。因为是随机整合,所以具有插入突变 的危险,特别是病毒制剂中污染着RCRa (二)其他病毒载体 1.腺病毒 感染人的腺病毒( adenovirus)有50余种血清型,能感染多种组织器官,产生类似感冒或类 似流感症状,目前多数采用无致病性的5型及2型腺病毒作为载体。构建载体时IR及包装 信号应保存,其余的部分有些可删除,供外源基因的插入,插入片段的大小可达8kb。腺病毒 载体较稳定,能耐受纯化浓缩等操作,可获得髙滴度的病毒颗粒,感染宿主细胞范围较广,感 染效率高,既能感染分裂相细胞,也能感染非分裂相细胞,但腺病毒不整合于宿主细胞染色体 故只能短暂表达外源基因,最大的缺点为引起机体的免疫反应和毒副作用 腺相关病毒 属微小病毒科,不致病,为单链DNA约47kb,腺相关病毒( adeno- associated virus),作 为载体最大的优点能感染分裂相和非分裂相细胞,并整合于宿主细胞染色体,能长期稳定表 达,无不良反应,适合于一些遗传性疾病如甲型和乙型血友病的基因治疗。但腺相关病毒载 体的制备因需要辅助病毒的参与,有污染的可能性。 3.其他 慢病毒(如H)、Ⅰ型单纯性疱疹病毒、痘病毒和杄状病毒等都被硏究发展作为转移基 因的载体。 (三)脂质体10 最大的优点为能准确整合于宿主细胞的染色体中，所携带的外源目的基因及有关序列不 会发生重排，因而能长期稳定表达。感染细胞范围较广，感染率比较高，由于结构基因均被 删除，因此免疫原性较低。对感染细胞无毒性作用。可附加不同的调控元件来提高外源基因 的表达效率，并对之进行调控。 局限性：逆转录病毒只能在核膜尚未形成时，才能进入核内，因此它只能将外源基因转 移至增殖分裂的细胞，而对静止细胞转录效果不佳。由于该病毒基因本身不大，故能容纳外 源基因的大小有限，应小于 8kb。逆转录病毒稳定性较差，难耐受体外的操作，在纯化或浓缩 过程常使其感染性降低。病毒颗粒能迅速被补体破坏。因为是随机整合，所以具有插入突变 的危险，特别是病毒制剂中污染着 RCR。 （二）其他病毒载体 1. 腺病毒 感染人的腺病毒(adenovirus)有 50 余种血清型，能感染多种组织器官，产生类似感冒或类 似流感症状，目前多数采用无致病性的 5 型及 2 型腺病毒作为载体。构建载体时 ITR 及包装 信号应保存，其余的部分有些可删除，供外源基因的插入，插入片段的大小可达８kb。腺病毒 载体较稳定，能耐受纯化浓缩等操作，可获得高滴度的病毒颗粒，感染宿主细胞范围较广，感 染效率高，既能感染分裂相细胞，也能感染非分裂相细胞，但腺病毒不整合于宿主细胞染色体， 故只能短暂表达外源基因，最大的缺点为引起机体的免疫反应和毒副作用。 ２. 腺相关病毒 属微小病毒科，不致病，为单链 DNA 约 4.7 kb，腺相关病毒(adeno-associated virus)，作 为载体最大的优点能感染分裂相和非分裂相细胞，并整合于宿主细胞染色体，能长期稳定表 达，无不良反应，适合于一些遗传性疾病如甲型和乙型血友病的基因治疗。但腺相关病毒载 体的制备因需要辅助病毒的参与，有污染的可能性。 ３. 其他 慢病毒（如 HIV）、Ｉ型单纯性疱疹病毒、痘病毒和杆状病毒等都被研究发展作为转移基 因的载体。 （三）脂质体