用色谱法分析,即可知道N端为何氨基酸。 ON-F+HaN-CH-CONH-CH-CONH-NazCO3 NO2 R NHN-CH-CONH-CH-CONH-.HCL NO2 R R NHN-CH-COOH+HaN-CH-COOH NO>R R 此法的缺点是所有的肽键都被水解掉了。 b异疏氰酸苯酯(Ph-N=C=S)法一一艾德曼(Edman)降解法. C-CHCOC 多肉 NH-CH R S* -N CH-R+多肤 测定咪唑衍生物的R,即可知是哪种氨基酸。 异疏氯酸苯酯法的特点是,除多肽N端的氨基酸外,其余多肽链会保留下来。这样就 可以继续不断的测定其N端 (2)测定C端 a多肽与肼反应 所有的肽键(酰胺)都与肼反应而断裂成酰肼,只有C端的氨基酸有游离的羧基,不 会与肼反应成酰肼。这就是说与肼反应后仍具有游离羧基的氨基酸就是多肽C端的氨基酸 b羧肽酶水解法 在羧肽酶催化下,多肽链中只有C端的氨基酸能逐个断裂下来。 4.肽链的选择性断裂及鉴定 上述测定多肽结构顺序的方法,对于分子量大的多肽是不适用的。对于大分子量多肽 顺序的测定,是将其多肽用不同的蛋白酶进行部分水解,使之生成二肽、三肽等碎片,再 用端基分析法分析个碎片的结构,最后将各碎片在排列顺序上比较并合并,即可推出多肽 中氨基酸的顺序 7