定（图2-8）。 so:ci .R:O R:o R. N- +H N-C-C0O H.C HHHHH DNS-CI 多 7 R0 R O R. HE. 《》sO2-NH-C C-N-C-Coo- N DNS. -coo H-coo H -coo- N》 DNS氢基酸 游离氢基酸 图2-8丹磺酰氯法(DNS法) 测定C末端氨基酸常用的方法有肼解法和还原法等。肼解法的原理为：多肽链和过 量的无水肼在100℃反应5 所有肽键被水解，除C末端氨基酸自由存在外， 其他 氨基酸都转变为氨基酸酰肼。向反应体系中加入苯甲醛，氨基酸酰肼转变为不溶于 二苯基衍生物，离心分离后C末端氨基酸在水相，向水相中加入2,4二硝基氟苯，使其 与C端氨基酸反应，经色谱分析可鉴定其种类（图2-9）。 NH:-CH-CO NH-CH-CO-NH-CH-CO-NH- -NH-CH-COOH R R. NH:一CH一CO-NHNH NH:-CH-CO-NHNH R NH一CHCO-NHNH NH,CH-COOH DNFB DNP.氨基酸 C.H,CH-N-CH-CO-NH-N-CHCHs (二亚苄衔生物，不溶于水) 图2-9C末端分析 肼解法 3030 定（图 2-8）。 图 2-8 丹磺酰氯法（DNS 法） 测定 C-末端氨基酸常用的方法有肼解法和还原法等。肼解法的原理为：多肽链和过 量的无水肼在 100℃反应 5～10h，所有肽键被水解，除 C-末端氨基酸自由存在外，其他 氨基酸都转变为氨基酸酰肼。向反应体系中加入苯甲醛，氨基酸酰肼转变为不溶于水的 二苯基衍生物，离心分离后 C-末端氨基酸在水相，向水相中加入 2,4-二硝基氟苯，使其 与 C-端氨基酸反应，经色谱分析可鉴定其种类（图 2-9）。 图 2-9 C 末端分析 肼解法