上，用右手食指将棉花从中央压入团孔中制成棉塞。然后直接压入试管或三角瓶口。也可借 用玻璃棒塞入，也可用折叠卷塞法制作棉塞。 制作的棉塞应紧贴管壁，不留缝 以防外界微生物沿缝隙侵入，棉塞不宜过紧或过松 塞好后以手提棉塞，试管不下落为准。棉塞的2/3在试管内，1/3在试管外。目前也有采 用硅胶塞代替棉塞直接盖在试管口上。 将装好培养基并塞好棉塞或硅胶塞的试管捆成一捆，外面包上一层牛皮纸。用记号笔注 明培养基名称及配制日期，灭菌待用。 图83棉寒的制作 图84正确与不正确的棉塞 1,金属塞2正确3、4不正 2.三角瓶棉塞制作 通常在棉塞外包上一层纱布，再塞在瓶口上。有时为了进行液体振荡培养加大通气量， 则可用8层纱布代替棉塞包在瓶口上，目前也有采用硅胶塞直接盖在瓶口上。 在装好培养基并塞好棉塞或包扎八层纱布或盖好硅胶塞的三角瓶口上，再包上一层牛皮 纸并用线绳捆好，灭菌待用。 (五)培养基的灭菌 培养基经分装包扎后，应立即按配制方法规定的灭菌条件进行进行高压蒸汽灭菌。 (六)斜面和平板的制作 1.斜面的制作 将已灭菌装有琼脂培养基的试管，趁热置于木棒或玻棒上，使成适当斜度，凝固后即成 斜面。斜面长度不超过试管长度1/2为宜。如制作半团体或固体深层培养基时，灭南后则 应垂直放置至凝固。 2.平板的制作 将装在 角瓶或试管中已灭菌的琼脂培养基融化后，待冷至50℃左右倾入无菌培养皿 中。温度过高时，皿盖上的冷凝水太多：温度低于50℃，培养基易于凝固而无法制作平板 平板的制作应在火旁进行，左手拿培养皿，右手拿三角瓶的底部或试管，左手同时用小 指和手掌将棉塞打开，灼烧瓶口，用左手大拇指将培养皿盖打开一缝，至瓶口正好伸入，倾 入1015mL培养基，迅速盖好皿盖，置于桌上，轻轻旋转平皿，使培养基均匀分布于整个 平皿中，冷凝后即成平板 )培养基的灭菌检 灭菌后的培养基，一般需进行无菌检查。最好取出1~2管（瓶），置于37℃温箱中培养 上，用右手食指将棉花从中央压入团孔中制成棉塞．然后直接压入试管或三角瓶口。也可借 用玻璃棒塞入，也可用折叠卷塞法制作棉塞。 制作的棉塞应紧贴管壁，不留缝隙，以防外界微生物沿缝隙侵入，棉塞不宜过紧或过松， 塞好后以手提棉塞，试管不下落为准。棉塞的 2／3 在试管内，1／3 在试管外。目前也有采 用硅胶塞代替棉塞直接盖在试管口上。 将装好培养基并塞好棉塞或硅胶塞的试管捆成一捆，外面包上一层牛皮纸。用记号笔注 明培养基名称及配制日期，灭菌待用。 2．三角瓶棉塞制作 通常在棉塞外包上一层纱布，再塞在瓶口上。有时为了进行液体振荡培养加大通气量， 则可用 8 层纱布代替棉塞包在瓶口上，目前也有采用硅胶塞直接盖在瓶口上。 在装好培养基并塞好棉塞或包扎八层纱布或盖好硅胶塞的三角瓶口上，再包上一层牛皮 纸并用线绳捆好，灭菌待用。 （五）培养基的灭菌 培养基经分装包扎后，应立即按配制方法规定的灭菌条件进行进行高压蒸汽灭菌。 （六）斜面和平板的制作 1．斜面的制作 将已灭菌装有琼脂培养基的试管，趁热置于木棒或玻棒上，使成适当斜度，凝固后即成 斜面。斜面长度不超过试管长度 l／2 为宜。如制作半团体或固体深层培养基时，灭菌后则 应垂直放置至凝固。 2．平板的制作 将装在三角瓶或试管中已灭菌的琼脂培养基融化后，待冷至 50℃左右倾入无菌培养皿 中。温度过高时，皿盖上的冷凝水太多；温度低于 50℃，培养基易于凝固而无法制作平板。 平板的制作应在火旁进行，左手拿培养皿，右手拿三角瓶的底部或试管，左手同时用小 指和手掌将棉塞打开，灼烧瓶口，用左手大拇指将培养皿盖打开一缝，至瓶口正好伸入，倾 入 10~15mL 培养基，迅速盖好皿盖，置于桌上，轻轻旋转平皿，使培养基均匀分布于整个 平皿中，冷凝后即成平板。 （七）培养基的灭菌检查 灭菌后的培养基，一般需进行无菌检查。最好取出 1~2 管(瓶)，置于 37℃温箱中培养 图 8-3 棉塞的制作 图 8-4 正确与不正确的棉塞 1.金属塞 2 正确 3、4 不正确