盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混合均匀,制成1:100的稀释液。 3)另取1m灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递増稀释液,如此毎递增稀释 次即换用1支1m灭菌吸管。 2.无菌操作 操作中必须有“无菌操作”的概念,所用玻璃器皿必须是完全灭菌的。所用剪刀、 镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装,应用75‰乙醇在包装开口处擦拭 后取样 操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露15 分钟,每个平板不得超过15个菌落。 3.采样的代表性:如系固体样品,取样时不应集中一点,宜多采几个部位。固 体样品必须经过均质或硏磨,液体样品须经过振摇,以获得均匀稀释液 4.稀释液:样品稀释液主要是灭菌生理盐水,有的采用磷酸盐缓冲液(或0.1% 蛋白胨水),后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食 品(如酱油)进行稀释,可以采用灭菌蒸馏水。 (二)倾注培养 1.操作方法 1)根据标准要求或对污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制10倍 递增稀释的同时,以吸取该稀释度的吸管栘取1m稀释液于灭菌平皿中,毎个稀释度 两个平皿 2)将凉至46°℃营养琼脂培养基注入平皿约15ml,并转动平皿,混合均匀。同 将营养琼脂培养基倾入加有1m稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。 3)待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1C温箱内培养48±2h,取出计算平板内菌9 盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混合均匀，制成 1：100 的稀释液。 3）、另取 1ml 灭菌吸管，按上项操作顺序，制 10 倍递增稀释液，如此每递增稀释 一次即换用 1 支 1ml 灭菌吸管。 2．无菌操作： 操作中必须有“无菌操作”的概念，所用玻璃器皿必须是完全灭菌的。所用剪刀、 镊子等器具也必须进行消毒处理。样品如果有包装，应用 75%乙醇在包装开口处擦拭 后取样。 操作应当在超净工作台或经过消毒处理的无菌室进行。琼脂平板在工作台暴露 15 分钟，每个平板不得超过 15 个菌落。 3．采样的代表性：如系固体样品，取样时不应集中一点，宜多采几个部位。固 体样品必须经过均质或研磨，液体样品须经过振摇，以获得均匀稀释液。 4．稀释液：样品稀释液主要是灭菌生理盐水，有的采用磷酸盐缓冲液（或 0.1％ 蛋白胨水），后者对食品已受损伤的细菌细胞有一定的保护作用。如对含盐量较高的食 品（如酱油）进行稀释，可以采用灭菌蒸馏水。 （二）倾注培养 1．操作方法： 1）、根据标准要求或对污染情况的估计，选择 2~3 个适宜稀释度，分别在制 10 倍 递增稀释的同时，以吸取该稀释度的吸管移取 1ml 稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做 两个平皿。 2）将凉至 46℃营养琼脂培养基注入平皿约 15ml，并转动平皿，混合均匀。同时 将营养琼脂培养基倾入加有 1ml 稀释液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。 3）、待琼脂凝固后，翻转平板，置 36±1℃温箱内培养 48±2h，取出计算平板内菌