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试剂浓度%(gm)测定波长(nm)透光率% 碘化钠1.00% 220 <0.8 亚硝酸钠5.00% 280 <0.8 2.对溶剂的要求测定供试品前应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求;即用 m石英吸收池盛溶剂,以空 气为空白(即空白光路中不置任何物质)测定其 吸收度 溶剂和吸收池的 吸收度在220~240nm范围内不得超过0.40;在241~250nm范围内不得超过0.20;在251~300nm 范围内不得超过0.10,在300nm以上时不得超过0.05。 3.测定法测定时,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用1cm的石英吸收池,在规 定的吸收峰波长±2m以内测试几个点的吸收度,以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确,吸收峰 波长应在规定的波长2m以内,否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确度,并以吸收 度最大的波长作为测定波长 般供试品溶液的吸收度读数,以在0.3一0.7之间的误差较小。仪器的 狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半 否则测 吸收度会 低 狭缝宽度的选择, 应以减 小狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准,由于吸收池本身可能有空白吸收,因此测定供试品的 吸收度后应减去装有溶剂的吸收池在规定波长测得的吸收度,再计算含量。 紫外分光光度法可用于对药材及其制剂进行定性或定量实验,定性时吸收度读数范围可根据配制 供试液的准确度及制剂的实际含量确定。 用于含量测定的方法一般为: (1)对照品比较法分别配制供试品溶液和对照品溶液,对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品 溶液中 被 成分标示量的10010% 所用溶剂也应完全 致,在规定的波长测定供试品溶液和对照 品溶液的吸收度后,按下式计算供试品中被测溶液的浓度: Ci=Ai Cr/Ar 式中:C为供试品溶液的浓度, A为供试品溶液的吸收度 C为对照品溶液的浓度; Ar为对照品溶液的吸收度。 (2)吸收系数法配制供试品溶液,在规定的波长处测定其吸收度,再以该品种在规定条件下的吸收 系数计算含量。用本法测定时,应注意仪器的校正和检定。 (3)计算分光光度法采用计算分光光度法应慎重。本法有多种,使用时应注意选择,当吸收度处在 吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时,影响精度的因素较多,故对照品和供试品测试条件应尽 可能一致。若测定时不用对照品,则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。 二)北色法 用比色法测定时,应取对照品同时操作。比色法所用的空白系指用同体积的溶剂代替对照品或供 试品溶液,依次加入相应的同体积的各种试剂,并用同样方法处理。在规定的波长处测定对照品和 供试品溶液的吸收度后,按紫外分光光度法的对照品比较法计算式计算供试品浓度。 当吸收度和浓度关系不呈线性时,应取数份梯度量的对照品溶液,用溶剂补充至同 一体积,显色 后测定各份溶液的吸收度,然后以吸收度与相应浓度关系绘制标准曲线,再根据供试品的吸收度在 标准曲线上求出其含量。 (三)红外分光光度法 1.仪器的校正和检定绘制聚苯乙烯薄膜(厚度约为0.05mm)的光谱,用2851cm-1、1601cm-1、 1028cm-1、907cm-1处的吸收峰对仪器的波数进行校正,在2000~400cm-1区间允许相差±4cm-1 以内,在4000~2000cm-1区间允许相差±8cm-1以内. 上述光谱中,仪器的分辨率要求在3110~2850cm-1范围内应能清晰地分辨出7个峰,2924cm-1与 2851cm-1吸收带约分辨深度不小于18%透光率,1601cm-1与1583cm-1吸收带的分辨深度不小于 8%透光率。试剂 浓度%(g/ml) 测定波长(nm) 透光率% 碘化钠 1.00% 220 <0.8 亚硝酸钠 5.00% 280 <0.8 2.对溶剂的要求 测定供试品前应先检查所用的溶剂在供试品所用的波长附近是否符合要求;即用 1cm石英吸收池盛溶剂,以空气为空白(即空白光路中不置任何物质)测定其吸收度,溶剂和吸收池的 吸收度在220~240nm范围内不得超过0.40;在241~250nm范围内不得超过0.20;在251~300nm 范围内不得超过0.10,在300nm以上时不得超过O.05。 3.测定法 测定时,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用1cm的石英吸收池,在规 定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸收度,以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确,吸收峰 波长应在规定的波长±2nm以内,否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确度,并以吸收 度最大的波长作为测定波长。一般供试品溶液的吸收度读数,以在0.3~0.7之间的误差较小。仪器的 狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度会偏低;狭缝宽度的选择,应以减 小狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准,由于吸收池本身可能有空白吸收,因此测定供试品的 吸收度后应减去装有溶剂的吸收池在规定波长测得的吸收度,再计算含量。 紫外分光光度法可用于对药材及其制剂进行定性或定量实验,定性时吸收度读数范围可根据配制 供试液的准确度及制剂的实际含量确定。 用于含量测定的方法一般为; (1)对照品比较法 分别配制供试品溶液和对照品溶液,对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品 溶液中被测成分标示量的100±10%,所用溶剂也应完全一致,在规定的波长测定供试品溶液和对照 品溶液的吸收度后,按下式计算供试品中被测溶液的浓度: Ci= Ai Cr / Ar 式中:Ci为供试品溶液的浓度; Ai为供试品溶液的吸收度, Cr为对照品溶液的浓度; Ar为对照品溶液的吸收度。 (2)吸收系数法 配制供试品溶液,在规定的波长处测定其吸收度,再以该品种在规定条件下的吸收 系数计算含量。用本法测定时,应注意仪器的校正和检定。 (3)计算分光光度法 采用计算分光光度法应慎重。本法有多种,使用时应注意选择,当吸收度处在 吸收曲线的陡然上升或下降的部位测定时,影响精度的因素较多,故对照品和供试品测试条件应尽 可能一致。若测定时不用对照品,则应在测定时对仪器作仔细的校正和检定。 (二)比色法 用比色法测定时,应取对照品同时操作。比色法所用的空白系指用同体积的溶剂代替对照品或供 试品溶液,依次加入相应的同体积的各种试剂,并用同样方法处理。在规定的波长处测定对照品和 供试品溶液的吸收度后,按紫外分光光度法的对照品比较法计算式计算供试品浓度。 当吸收度和浓度关系不呈线性时,应取数份梯度量的对照品溶液,用溶剂补充至同一体积,显色 后测定各份溶液的吸收度,然后以吸收度与相应浓度关系绘制标准曲线,再根据供试品的吸收度在 标准曲线上求出其含量。 (三)红外分光光度法 1.仪器的校正和检定 绘制聚苯乙烯薄膜(厚度约为0.05mm)的光谱,用2851cm-1、1601cm-1、 1028cm-1、907cm-1 处的吸收峰对仪器的波数进行校正,在2000~400cm-1区间允许相差±4cm-1 以内,在4000~2000cm-1区间允许相差±8cm-1以内。 上述光谱中,仪器的分辨率要求在3110~2850cm-1范围内应能清晰地分辨出7个峰,2924cm-1与 2851cm-1吸收带约分辨深度不小于18%透光率,1601cm-1与1583cm-1吸收带的分辨深度不小于 8%透光率
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