42.3x-光衍射分析法 通过多种方法相互印证,可得出正确的结论 43组成酶活性中心的重要化学基团 酶活性中心有7种氨基酸残基参加的频率最高,它们是Ser、Hs、Cys、Iyr、Asp、Glu、Ly 同一类酶往往含有相同的活性中心基团。如胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶活性中心含有丝氨酸残 基,称为丝氨酸蛋白酶;胃蛋白酶和木瓜蛋白酶活性中心含有半胱氨酸残基,称为半胱氨酸蛋白 酶。在脱氢酶活性中心往往含有酪氨酸残基。这些知识可以为未知活性中心基团的酶的研究提供 线索。 同位素标记活性中心基团后,用蛋白酶部分水解,得到同位素标记的肽段,分析其氨基酸顺 序,可以了解活性中心附近的氨基酸顺序 实验表明,同类酶不仅有相同的活性中心基团,而且附近的氨基酸顺序也很相似 表、一些丝氨酸蛋白酶活性中心丝氨酸附近的肽链组成 酶 活性中心附近的氨基酸顺序 胰蛋白酶(牛) .Asp-Ser-Cys-GIn-Gly-Asp-"Ser-Gly-Gly-Pro-Val-Val-Cys-Ser-Gly-Lys 胰凝乳蛋白酶(牛)… Ser-Ser-Cys-Met-Gly- Asp-"Ser-Gly-Gly- Pro-Leu- Val-Cys-Lys-Lys-Asn… 弹性蛋白酶(猪)|… Ser-Gly- CvS-Gln-Gly-Asp- Ser-Gly-Gly-Pro-leu- His-Cys-Leu-al-Asin 凝血酶(牛) Asp-Ala-Cys-Glu-Gly-Asp-"Ser-Gly-Gly-Pro-Phe-Val-Met-Lys-Ser- Pro 蛋白酶( S. griseus)|…… hr-Cys-Glu-Gly-Asp-* Ser-Gly- Gly-Pro- Met-Phe 表示有催化活性的丝氨酸残基 表、一些半胱氨酸蛋白酶活性中心的半胱氨酸残基附近的氨基酸顺序 酶 活性中心附近的氨基酸顺序 木瓜蛋白酶…Pro-l- LyS-Asn- Glu-GIv- Ser-CyS-Gly-Ser" Cys-Trp… 无花果蛋白酶…o- lle-Arg-Gln- Glu-GIy- GIn-CyS-Gly-Ser-+ Cys-Trp 菠萝蛋白酶 Asn-GIn-Asp-Pro-Cys-Gly-Ala- Cys-Trp *表示有催化活性的半胱氨酸残基7 4.2.3 x-光衍射分析法 通过多种方法相互印证，可得出正确的结论。 4.3 组成酶活性中心的重要化学基团 酶活性中心有 7 种氨基酸残基参加的频率最高，它们是 Ser、His、Cys、Tyr、Asp、Glu、Lys。 同一类酶往往含有相同的活性中心基团。如胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶活性中心含有丝氨酸残 基，称为丝氨酸蛋白酶；胃蛋白酶和木瓜蛋白酶活性中心含有半胱氨酸残基，称为半胱氨酸蛋白 酶。在脱氢酶活性中心往往含有酪氨酸残基。这些知识可以为未知活性中心基团的酶的研究提供 线索。 同位素标记活性中心基团后，用蛋白酶部分水解，得到同位素标记的肽段，分析其氨基酸顺 序，可以了解活性中心附近的氨基酸顺序。 实验表明，同类酶不仅有相同的活性中心基团，而且附近的氨基酸顺序也很相似。 表、一些丝氨酸蛋白酶活性中心丝氨酸附近的肽链组成 酶 活性中心附近的氨基酸顺序 胰蛋白酶（牛） …Asp-Ser-Cys-Gln-Gly-Asp-*Ser-Gly-Gly-Pro-Val-Val-Cys-Ser-Gly-Lys… 胰凝乳蛋白酶（牛） …Ser-Ser-Cys-Met-Gly-Asp-*Ser-Gly-Gly-Pro-Leu-Val-Cys-Lys-Lys-Asn… 弹性蛋白酶（猪） …Ser-Gly-Cys-Gln-Gly-Asp-*Ser-Gly-Gly-Pro-Leu-His-Cys-Leu-Val-Asn… 凝血酶（牛） …Asp-Ala-Cys-Glu-Gly-Asp-*Ser-Gly-Gly-Pro-Phe-Val-Met-Lys-Ser-Pro… 蛋白酶（S. griseus） ………Thr-Cys-Glu-Gly-Asp-*Ser-Gly-Gly-Pro-Met-Phe…… *表示有催化活性的丝氨酸残基 表、一些半胱氨酸蛋白酶活性中心的半胱氨酸残基附近的氨基酸顺序 酶 活性中心附近的氨基酸顺序 木瓜蛋白酶 …Pro-Val-Lys-Asn-Glu-Gly-Ser-Cys-Gly-Ser-*Cys-Trp… 无花果蛋白酶 …Pro-Ile-Arg-Gln-Glu-Gly-Gln-Cys-Gly-Ser-*Cys-Trp… 菠萝蛋白酶 …Asn-Gln-Asp-Pro-Cys-Gly-Ala-*Cys-Trp… *表示有催化活性的半胱氨酸残基