(5)注入体内的酶,使之集中到某一部位以提高酶的疗效。如根据酶微囊颗粒的大小,可以使 微囊集中在某一器官或组织。用人白蛋白制成的酶微囊,直径在15~30μm以上,静注时可通 过心脏,进入肺部微血管,在此可集中99%的酶。如果是直径为1~3um的微囊,则静注后可 到达网状内皮系统,在此可集中90%的酶。再小于1um的颗粒则可在肝(80%)、脾(5~8%) 骨髓(1~2%)中依比例分布。还可以使微囊表面带上特殊物质(抗体、可识别物质)与特定组织细 胞表面的抗原或受体反应,达到定向给药的目的 112诊断用酶 诊断用酶是用来检测体内某些与疾病有关的代谢物质或与疾病有关的酶变化(化验),从而诊 断病情。酶法检测有快速、简便、正确、灵敏等优点,因而发展很快。对诊断用酶的要求比药用 酶低些,因其不用于体内,可以不考虑其抗原性和毒性;对纯度的要求是只要不含有能干扰所需 反应的物质即可,如脱氢酶中不能含有NADH氧化酶,激酶中不能含有肌激酶,葡萄糖-6-磷酸 脱氢酶中不能有6-磷酸葡萄糖酸。化验所用的酶可以是来自微生物,也可以是来自动植物。不同 来源的同一种酶往往反应性质不同,例如从酵母中提取的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶只能利用辅酶Ⅱ (NADP)为反应时的受氢体,而从肠膜状明串珠菌来的葡萄糖-6磷酸脱氢酶则能利用辅酶Ⅰ (NAD)或辅酶Ⅱ(NADP)为反应时的受氢体;微生物来源的尿酸酶的最适反应pH为6~7,而 从牛肾提取的尿酸酶最适pH为9~10 11.2.1酶反应系统的建立 在大多数情况下,酶法分析需要一个以上的酶和一个以上的反应,才能达到检测的目的。例 如要测定血清中的胆固醇含量,首先要找到一个能作用于胆固醇的酶,如胆固醇氧化酶,反应以 后,产物之一是H2O2,再用过氧化物酶通过偶联反应,将HO2定量地与显色底物反应,生成有 色物质,色泽的深浅与胆固醇的含量成正比关系,用比色计测出500nm的光密度,即可计算出 胆固醇在样品中的含量。上述催化第一步反应的酶称为始发反应酶,催化第二步反应的酶称为指 示反应酶 始发反应:胆固醇+O2 钽固醇氧化酶 胆甾酮+H2O2 指示反应:H2O2+显色底物过氧化有色物质+H2O 原合成一种有色物质,如酚和+氨基安替比林, 显色底物又叫色原,对于测H2O2来说色原有两类,第一类为单 色原,常用的有邻苯二酚、邻联(二)茴香胺及2,2-连氮基双(3-乙苯(= 并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐(ABIS)。第二类为双色素原,即由两种色素 4-氮基安替 3- methyl-2- benzothiazolinone hydrazone(MBTH)和二甲基苯胺。 指示反应的产物应便于检测,常用于检测的指示反应产物是:有色物质、有紫外吸收的物质(5) 注入体内的酶，使之集中到某一部位以提高酶的疗效。如根据酶微囊颗粒的大小，可以使 微囊集中在某一器官或组织。用人白蛋白制成的酶微囊，直径在 15～30μm 以上，静注时可通 过心脏，进入肺部微血管，在此可集中 99％的酶。如果是直径为 1～3μm 的微囊，则静注后可 到达网状内皮系统，在此可集中 90％的酶。再小于 1μm 的颗粒则可在肝(80％)、脾(5～8％)、 骨髓(1～2％)中依比例分布。还可以使微囊表面带上特殊物质(抗体、可识别物质)与特定组织细 胞表面的抗原或受体反应，达到定向给药的目的。 11.2 诊断用酶 诊断用酶是用来检测体内某些与疾病有关的代谢物质或与疾病有关的酶变化(化验)，从而诊 断病情。酶法检测有快速、简便、正确、灵敏等优点，因而发展很快。对诊断用酶的要求比药用 酶低些，因其不用于体内，可以不考虑其抗原性和毒性；对纯度的要求是只要不含有能干扰所需 反应的物质即可，如脱氢酶中不能含有 NADH 氧化酶，激酶中不能含有肌激酶，葡萄糖-6-磷酸 脱氢酶中不能有 6-磷酸葡萄糖酸。化验所用的酶可以是来自微生物，也可以是来自动植物。不同 来源的同一种酶往往反应性质不同，例如从酵母中提取的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶只能利用辅酶Ⅱ (NADP ＋ )为反应时的受氢体，而从肠膜状明串珠菌来的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶则能利用辅酶Ⅰ (NAD＋ )或辅酶Ⅱ(NADP＋ )为反应时的受氢体；微生物来源的尿酸酶的最适反应 pH 为 6～7，而 从牛肾提取的尿酸酶最适 pH 为 9～10。 11.2.1 酶反应系统的建立 在大多数情况下，酶法分析需要一个以上的酶和一个以上的反应，才能达到检测的目的。例 如要测定血清中的胆固醇含量，首先要找到一个能作用于胆固醇的酶，如胆固醇氧化酶，反应以 后，产物之一是 H2O2，再用过氧化物酶通过偶联反应，将 H2O2 定量地与显色底物反应，生成有 色物质，色泽的深浅与胆固醇的含量成正比关系，用比色计测出 500nm 的光密度，即可计算出 胆固醇在样品中的含量。上述催化第一步反应的酶称为始发反应酶，催化第二步反应的酶称为指 示反应酶。 始发反应： 胆固醇 ＋ O2 胆固醇氧化酶 —————→ 胆甾酮 ＋ H2O2 指示反应： H2O2 ＋ 显色底物 过氧化物酶 ————→ 有色物质 ＋ H2O 显色底物又叫色原，对于测 H2O2 来说色原有两类，第一类为单 一色原，常用的有邻苯二酚、邻联(二)茴香胺及 2,2'-连氮基-双(3-乙苯 并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐(ABTS)。第二类为双色素原，即由两种色素 原合成一种有色物质，如酚和 4- 氨基安替比林、 3-methyl-2-benzothiazolinone hydrazone(MBTH)和二甲基苯胺。 指示反应的产物应便于检测，常用于检测的指示反应产物是：有色物质、有紫外吸收的物质