9 浙江大学 遗传学第十二章 49 ③. Western 杂交分析： 用于蛋白质的分析。 浙江大学 遗传学第十二章 50 ⑶. 核酸序列测定： 测定克隆后的DNA片段核酸序列 。 一般采用Sanger(1977)发明的双脱氧核糖核酸 终止法测定核酸序列。 浙江大学 遗传学第十二章 51 在Sanger双脱氧法中，可用荧光标记来代替放射性标记： ⑷. 核酸序列分析： 测定的核酸序列是否为基因、 有什么功能，需用计算机软件或 生物学实验进一步分析。 ①. 同源序列的分析： }同源性比较： 将待测序列在核酸和蛋白质两个水平上比较基因间的同源性， 将序列发送到Blast等DNA Data数据库进行比较。 }阅读框架的分析： 一个ORF是一条能编码一条多肽链的DNA序列，具有翻译起 始信号和终止信号等。 cDNA 序列可分析内含子等。 浙江大学 遗传学第十二章 53 ②. 无任何同源性的新序列： 进行基因功能性研究的方法： } 将基因导入生物体进行基因失活或过量表达，根据 表型推测基因作用； } 用噬菌体显现(phage display)技术； } 酵母双杂交系统进行蛋白质的功能分析。 浙江大学 遗传学第十二章 54 ㈡、PCR扩增基因： 聚合酶链式反应 (polymerase chain reaction，PCR)可以 体外快速扩增DNA。 美国Mullis(1986)发明 (现代生物学发展史上的里程碑)。 ƒ PCR仪 离心机9 浙江大学 遗传学第十二章 49 ③. Western 杂交分析： 用于蛋白质的分析。 浙江大学 遗传学第十二章 50 ⑶. 核酸序列测定： 测定克隆后的DNA片段核酸序列 。 一般采用Sanger(1977)发明的双脱氧核糖核酸 终止法测定核酸序列。 浙江大学 遗传学第十二章 51 在Sanger双脱氧法中，可用荧光标记来代替放射性标记： ⑷. 核酸序列分析： 测定的核酸序列是否为基因、 有什么功能，需用计算机软件或 生物学实验进一步分析。 ①. 同源序列的分析： }同源性比较： 将待测序列在核酸和蛋白质两个水平上比较基因间的同源性， 将序列发送到Blast等DNA Data数据库进行比较。 }阅读框架的分析： 一个ORF是一条能编码一条多肽链的DNA序列，具有翻译起 始信号和终止信号等。 cDNA 序列可分析内含子等。 浙江大学 遗传学第十二章 53 ②. 无任何同源性的新序列： 进行基因功能性研究的方法： } 将基因导入生物体进行基因失活或过量表达，根据 表型推测基因作用； } 用噬菌体显现(phage display)技术； } 酵母双杂交系统进行蛋白质的功能分析。 浙江大学 遗传学第十二章 54 ㈡、PCR扩增基因： 聚合酶链式反应 (polymerase chain reaction，PCR)可以 体外快速扩增DNA。 美国Mullis(1986)发明 (现代生物学发展史上的里程碑)。 ƒ PCR仪 离心机