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表明溶液中有残存的盐和小分子杂质,如核苷酸、氨基酸、酚等。 2.3琼脂糖凝胶电泳检测DNM质量:琼脂糖是一种天然聚合长链状分子, 沸水中溶解,45℃开始形成多孔性刚性滤孔,凝胶孔径的大小决定于琼脂 糖浓度。DNA分子在碱性环境中带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动。 DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应和分子筛效应。不同DNA, 其分子量大小及构型不同,电泳时的泳动率就不同,从而分出不同的区带。 琼脂糖凝胶电泳法分离DNA,主要是利用分子筛效应,迁移速度与分子量 的对数值成反比关系。溴化乙锭(EB)为扁平状分子,在紫外光照射下发 射荧光。EB可与DNA分子形成EB-DNA复合物,其发射的荧光强度较游 离状态EB发射的荧光强度大I0倍以上,且荧光强度与DNA含量成正比。 用肉眼观察,可检测到5ng以上的DNA。 3实验材料 每个学生做1个老师已经准备的幼嫩、健康的园艺植物叶片。 4仪器设备 高速冷冻离心机(Ependorf Centrifuge5810R)、高速台式离心机 (Ependorf Centrifuge5415D)、入电泳装置(包括BIO-RAD Sub-Cell192电 泳槽和PAC300电泳仪)、凝胶成像系统(BIO-RAD)、Biophotometer核酸 蛋白测定仪、MicroBio Mixer Genius、液氮罐、振荡器、电子天平、恒温水 浴锅、烘箱、微波炉等。3 表明溶液中有残存的盐和小分子杂质,如核苷酸、氨基酸、酚等。 2.3 琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 质量:琼脂糖是一种天然聚合长链状分子, 沸水中溶解,45℃开始形成多孔性刚性滤孔,凝胶孔径的大小决定于琼脂 糖浓度。DNA 分子在碱性环境中带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动。 DNA 分子在琼脂糖凝胶中泳动时,有电荷效应和分子筛效应。不同 DNA, 其分子量大小及构型不同,电泳时的泳动率就不同,从而分出不同的区带。 琼脂糖凝胶电泳法分离 DNA,主要是利用分子筛效应,迁移速度与分子量 的对数值成反比关系。溴化乙锭(EB)为扁平状分子,在紫外光照射下发 射荧光。EB 可与 DNA 分子形成 EB-DNA 复合物,其发射的荧光强度较游 离状态 EB 发射的荧光强度大 10 倍以上,且荧光强度与 DNA 含量成正比。 用肉眼观察,可检测到 5ng 以上的 DNA。 3 实验材料 每个学生做 1 个老师已经准备的幼嫩、健康的园艺植物叶片。 4 仪器设备 高速冷冻离心机(Ependorf Centrifuge 5810R)、高速台式离心机 (Ependorf Centrifuge 5415D)、电泳装置(包括 BIO-RAD Sub-Cell 192 电 泳槽和 PAC300 电泳仪)、凝胶成像系统(BIO-RAD)、Biophotometer 核酸 蛋白测定仪、MicroBio Mixer Genius、液氮罐、振荡器、电子天平、恒温水 浴锅、烘箱、微波炉等
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