自20世纪70年代以来,植物原生质体培养和体细胞融合操作技术不断趋于精密化、微量 化、高效化与多样化.文章侧重于实验操作技术和当前研究热点对植物原生质体培养和体细胞 杂交等关键技术环节的重要研究成果和研究进展进行了综述,并对其在理论和实践上的应用前 景及未来发展趋势进行了展望 关键词植物;原生质体培养;体细胞融合;研究进展

第一节细胞和组织培养在植物育种中的应用 第二节植物原生质体培养与体细胞杂交的意义 第三节基因工程在植物育种中的应用 第四节分子标记的特点

(一)基因工程的概念 1.遗传工程广义;细胞工程-体细胞、原生质体的培养与杂交细器---细胞核的移植:回交,克隆羊染色体----条染色体或染色体片断的切割或转移基因工程狭义:基因工程:体外不经过有性繁殖,有目的地使DNA发生重组的技术体系。故又称重组DNA技术

稳定表达：转化的目的基因和染色体整合到一起，但整合并不一定意味着表达，只有整合到表达区的基因才会表达，而且整合到不同的染色体区段的外源基因的表达的量也是不同的。瞬时表达：转化的目的基因不整合到染色体上，结果是短暂的高水平的表达，可以在24-96小时内检测表达效果，表达水平与位置无关，不会受到周围染色体元件的影响

第一节 分子杂交与印迹技术 Molecular Hybridization and Blotting Technique 第二节 PCR技术的原理与应用 The Principle and Application of PCR Technology 第三节 基因文库 Gene Library 第四节 生物芯片技术 Biological Chip Technique

第一章 实验室设置及技术原理 第二章 细胞全能性与形态发生 第三章 离体培养下的遗传与变异 第四章 植物组织和器官培养 第五章 植物细胞培养及次生代谢产物生产 第六章 原生质体培养 第七章 植物体细胞杂交 第八章 人工种子 第九章 植物种质资源离体超低温保存 第十章 动物细胞工程概述

• 第一节 显微技术 • 一、光学显微镜 • 二、电子显微镜 • 三、显微操作技术 • 第二节 生物化学与分子生物学技术 • 第三节 细胞分离技术 • 第四节 细胞培养与细胞杂交

核酸的基本操作技术： 1）核酸的简介 2）基因组DNA提取 3）质粒DNA提取 4）真核细胞总RNA提取 5）琼脂糖凝胶电泳 6）核酸分子杂交 7）聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR) 8） RT-PCR

第一节 免疫学检测 一、Ag-Ab反应的一般规律和特点 二、Ag-Ab反应的影响因素 三、免疫凝集试验 四、免疫沉淀试验 五、与补体相关的试验 六、酶联免疫吸附试验 七、荧光免疫技术 第二节 PCR技术 第三节 核酸分子杂交技术

不同基因通过不同机制导致疾病发生 血红蛋白结构 基因结构和表达与疾病的研究策略 核糖核酸酶切分析 基因表达系列分析 (Serial Analysis of Gene Expression, SAGE) 抑制性差减杂交 (suppressive subtractive hybridization, SSH) 核酶技术确定基因在疾病中的作用 RNAi现象的发现 定位克隆 HGP与疾病相关基因的研究 双向凝胶电泳技术的应用