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实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化. 2 实验二 碱变性法提取质粒 DNA . 6 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA . 11 实验四 DNA 的限制性内切酶酶切 . 15 实验五 DNA 的回收与连接 . 18 实验六 基因的 PCR 扩增. 23 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因. 29 实验八 基因组合生物合成新化合物. 36 实验九 药用甘草片中甘草酸含量的分析及其质量评价. 47 实验十 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备. 48 实验十一 固定化细胞法生产 L-天冬氨酸和 L-丙氨酸. 50 实验十二 重组水蛭素Ⅲ的制备. 57 实验十三 酸醇提取法制备猪胰岛素. 65 实验十四 多肽缩宫素的 Fmoc 固相合成法. 70 实验十五 酵母 RNA 的制备和单核苷酸的离子交换柱层析分析. 76 实验十六 单核苷酸衍生物制备. 82 实验十七 胰弹性蛋白酶的制备及活力测定. 85 实验十八 超氧化物歧化酶的分离纯化. 89 实验十九 重组门冬酰胺酶Ⅱ的纯化与分析. 97
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第一节 复制的基本规律 第二节 DNA复制的酶学 第三节 DNA生物合成过程 第四节 逆转录和其他复制方式 第五节 DNA损伤(突变)与修复
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一、 一般特征 二、 DNA 聚合酶链反应 三、 细菌 DNA 的复制 1、E.coli 中的 DNA 聚合酶:3 种 2、复制起始点的特点:在 E.coli 中,只有一个复制点,oriC
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核酸分子杂交 (nucleic acid hybridization ) 在DNA复性过程中,如果把不同DNA单链 分子放在同一溶液中,或把DNA与RNA放在一 起,只要在DNA或RNA的单链分子之间有一定 的碱基配对关系,就可以在不同的分子之间形 成杂化双链(heteroduplex)
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第一节复制的基本规律 一、半保留复制的实验依据和意义 DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱基配对规律,合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA
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第一章 生物化学部分.1 实验一、双缩脲法测定血清蛋白质含量. 1 实验二、纸层析法观察转氨基作用. 2 实验三、血清醋酸纤维薄膜电泳. 4 实验四、血清丙氨酸氨基转移酶活性测定. 7 实验五、胰酶对蛋白质的消化和影响酶作用的因素. 10 实验六、酶的竞争性抑制作用. 13 实验七、血糖浓度的测定. 16 实验八、血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定. 18 第二章 分子生物学部分.25 实验一、质粒 DNA 的提取制备与检测. 25 实验二、PCR 技术. 28 实验三、DNA 的限制性酶切与电泳. 31 实验四、DNA 连接实验. 38 实验五、重组 DNA 转化与篮白斑筛选. 41 实验六、SDS-PAGE 测定蛋白质的相对分子量. 44
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第一节 碱基、核苷和核苷酸 第二节 磷酸二酯键与多核苷酸 第三节 碱基的性质影响核酸的结构 第四节 DNA的结构 第五节 RNA的种类和结构 第六节 核酸的变性, 复性和杂交 第七节 核酸的理化性质及化学反应 第八节 核酸酶和DNA限制性内切酶 第九节 DNA的一级结构的测定和化学合成 第十节 基因和基因组 第十一节 DNA超螺旋和染色体结构 第十二节 核酸的分离纯化和鉴定
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实验一、植物染色体DNA的提取及纯度鉴定 实验二、大肠杆菌质粒DNA的提取 实验三、琼脂糖凝胶电泳 实验四、DNA的限制性酶切 实验五、大肠杆菌感受态细胞的制备及外源DNA的转化 实验六、PCR基因扩增技术
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一、基因(组)与遗传 二、遗传物质染色体与DNA的区别与联系 三、DNA的组成与结构 四、原核与真核染色体DNA比较
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第一节 基本概念 第二节 遗传损伤的类型 一、基因突变 二、染色体畸变 三、基因组突变 第三节 致突变作用机制 一、DNA损伤与突变 二、非整倍体及整倍体的诱发 三、DNA损伤修复与突变 第四节 突变的不良后果 —、体细胞突变的不良后果 二、生殖细胞突变的不良后果 第五节 遗传毒理学试验 一、遗传毒理学试验的分类 二、常用的遗传毒理学试验 . 细菌回复突变试验(bacterial reverse mutation assay) . 哺乳动物细胞基因突变试验(mammalian cell gene mutation assay) . 染色体畸变试验(chromosome aberration test) . 微核试验(micronucleus assay) . 显性致死试验(dominant lethal assay) .程序外DNA合成试验(unscheduled DNA synthesis test,UDS) .姐妹染色单体交换试验(sister chromatid exchage assay) .转基因动物致突变试验(transgenic animal mutagenicity assay) .遗传毒理学试验中应注意的几个问题 第六节 遗传毒理学试验在预测致癌性及遗传危害性中的价值 第七节 遗传毒理学试验的组合应用
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