原位杂交(In situ hybridization) 1、同位素原位杂交(Isotopic in situ hybridization) 70年代。 2、非同位素原位杂交(Non--isotopic in situ ybridization) 80年代中后期 (1)免疫酶联 (2)荧光原位杂交(Fluorescence in situ ybridization,SH)

新陈代谢:发生在活细胞中的各种分解代谢 catabolism)和合成代谢( anabolism)的总和。 新陈代谢=分解代谢+合成代谢 分解代谢:指复杂的有机物分子通过分解代谢酶系 的催化,产生简单分子、腺苷三磷酸(ATP)形式的能 量和还原力的作用

实验一 质粒的制备 实验二 DNA 的琼脂糖凝胶电泳 实验三 外源 DNA 片段在质粒载体中的克隆 实验四 感受态细胞的制备 实验五 质粒的转化及转化子的鉴定 实验六 PCR 技术 实验七 植物总 DNA 的快速少量抽提（ CTAB 法） 实验八 总 DNA 质量检测及酶切 实验九 电泳、转膜 实验十 RNA Extraction (mini prep) 实验十一 RT-PCR 实验 附录 试剂配方 一 细菌培养试剂 二 质粒抽提试剂 三 DNA 操作试剂 四 RNA 操作试剂

1. 实验基本常识 1.1 几种常用实验仪器操作方法介绍 1.2 实验材料的采取、处理与保存 1.3 实验数据的处理 2. 水分生理 2.1 气孔运动及其影响因素 2.2 露点法测定植物叶片水势和渗透势 2.3 液体交换法测定植物组织水势（小液流法、折射仪法、电导法） 3. 矿质营养 3.1 植物溶液培养和缺素培养 3.2 植物伤流液的成分分析 3.3 根系活力的测定(TTC 法) 3.4 硝酸还原酶(NR)活性的测定 4. 光合作用和呼吸作用 4.1 叶绿体色素的提取、分离、理化性质和定量测定 4.2 红外线 CO2气体分析仪法测定植物光合与呼吸速率 4.3 抗坏血酸氧化物酶和多酚氧化酶活性的测定 4.4 水溶性碳水化合物的测定 5. 植物激素 5.1 植物组织培养技术 5.2 酶联免疫法（ELISA）测定植物激素含量 6. 植物生长发育 6.1 种子萌发和活力测定 6.2 花粉活力测定 7. 逆境生理 7.1 电导法测定植物细胞透性 7.2 植物组织中超氧物歧化酶活性的测定 7.3 植物体内游离脯氨酸含量的测定 7.4 植物组织中丙二醛含量的测定 7.5 植物体内氧自由基的测定和清除 8. 综合性实验

第一节　细胞膜的基本结构和物质转运功能 一、膜的化学组成和分子结构 （一）脂质双分子层 （二）细胞膜蛋白质 （三）细胞膜糖类 二、细胞膜的跨膜物质转运功能 （一）单纯扩散 （二）易化扩散 （三）主动转运 （四）出胞与入胞式物质转运 第二节　细胞的跨膜信号传递功能 一、由具有特异感受结构的通道蛋白质完成的跨膜信号传递 （一）化学门控通道 （二）电压门控通道 （三）机械门控通道 二、由膜的特异受体蛋白质、G-蛋白和膜的效应器酶组成的跨膜信号传递系统 第三节　细胞的兴奋性和生物电现象 一、兴奋性和刺激引起兴奋的条件 （一）兴奋性和兴奋含义及其变迁 （二）刺激引起兴奋的条件和阈刺激 （三）组织兴奋及其恢复过程中兴奋性的变化 二、细胞的生物电现象及其产生机制 （一）生物电现象的观察和记录方法 （二）细胞的静息电位和动作电位 （三）生物电现象的产生机制 三、兴奋的引起和兴奋的传导机制 （一）阈电位和锋电位的引起 （二）局部兴奋及其特性 （三）兴奋在同一细胞上的传导机制 第四节　肌细胞的收缩功能 一、神经-骨骼肌接头处的兴奋传递 二、骨骼肌细胞的微细结构 （一）肌原纤维和肌小节 （二）肌管系统 三、骨骼肌的收缩机制和兴奋-收缩耦联 （一）肌丝的分子组成和横桥的运动 （二）骨骼肌的兴奋-收缩耦联 四、骨骼肌收缩的外部表现和力学分析 （一）前负荷或肌肉初长度对肌肉收缩的影响枣长度-张力曲线 （二）肌肉后负荷对肌肉收缩的影响－张力-速度曲线 （三）肌肉收缩能力的改变对肌肉收缩的影响 （四）肌肉的单收缩和单收缩的复合 五、平滑肌的结构和生理特性 （一）平滑肌的微细结构和收缩机制 （二）平滑肌在功能上的分类 （三）平滑肌活动的控制和调节

教学要求：掌握线粒体、叶绿体的结构及主要功能。线粒体、叶绿体的半自主性细胞器特点，及其增开起源。 教学内容： 第一节 线粒体与氧化磷酸化 一、 线粒体的形态结构 二、 线粒体的化学组成及酶的定位 三、 线粒体的功能 四、 线粒体与人类疾病 第二节 叶绿体与光合作用 一、 叶绿体的形状、大小和数目 二、 叶绿体的结构和化学组成 三、 叶绿体的主要功能——光合作用 第三节 线粒体和叶绿体是半自主性细胞器 一、 线粒体和叶绿体的DNA 二、 线粒体和叶绿体的蛋白质合成 三、 线粒体和叶绿体蛋白质运输与装配 第四节 线粒体和叶绿体的增殖与起源 一、 线粒体和叶绿体的增殖 二、 线粒体和叶绿体的起源

实验一 植物基因组DNA的提取及其定性定量分析. 1 实验二 PCR扩增目的片段和胶回收. 8 实验三 目的片段和载体的连接. 15 实验四 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化效率检测. 18 实验五 重组质粒的转化. 20 实验六 重组质粒DNA的提取及酶切鉴定. 23 实验七 RNA的提取（TRIzol法）. 30 实验八 mRNA的分离与纯化. 36 实验九 RT-PCR技术. 38 实验十 用mRNA差异显示法分离特异表达的基因片段 . 40 实验十一 cDNA文库的构建. 46 实验十二 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） . 51 实验十三 Southern印迹杂交法（Southern blot）. 56 实验十四 RNA分子杂交（Northern blot）. 62 实验十五 固定化蛋白质的免疫生化鉴定（Western blot）. 67 实验十六 RFLP技术. 71 实验十七 RAPD技术. 74 实验十八 细胞分裂中期染色体的荧光原位杂交技术(FISH). 76 附录一 常用缓冲液及其配制. 80 附录二 常用抗生素溶液. 85 附录三 常用贮存液的配制. 85 附录四 常用核酸蛋白换算数据. 93 附录五 染料在凝胶中的迁移速度. 94 附录六 实验中的一些好习惯. 95

实验一 细菌的染色检查法 实验二 细菌的人工培养 实验三 细菌的生化反应 实验四 动物实验技术 实验五 细菌致病作用的测定 实验六 外界因子对细菌的作用 实验七 细菌的变异和药物的抗菌试验 实验八 细菌血清学试验 实验九 血液、骨髓的细菌学检查 实验十 脓液的细菌学检查 实验十一 粪便的细菌学检查 实验十二 尿液的细菌学检查 实验十三 结核病人痰标本的细菌学检查 实验十四 细菌感染后血清中抗体测定 实验十五 病毒感染后的形态学观察 实验十六 病毒组织培养及病毒对细胞致病作用的观察 实验十七 病毒的半数组织感染量（TCID50）和蚀斑分析 实验十八 病毒感染后血清抗体测定 实验十九 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg) 实验二十 细菌耐药基因的重组 实验二十一 细菌 DNA 限制性核酸内切酶分析 实验二十二 核酸探针和分子杂交技术 实验二十三 核酸扩增技术 实验二十四 蛋白质的分子检测方法 实验二十五 病原性真菌 实验二十六 病原性螺旋体

第一章蛋白质结构与功能 第二章核酸结构与功能 第三章酶 第四章糖代谢核 第五章脂代谢苷酸代谢 第六章生物氧化 第七章氨基酸代谢 第八章核苷酸代谢 第九章物质代谢的联系与调节 第十章DNA的生物合成 第十一章RNA的生物合成 第十二章蛋白质的生物合成 第十三章基因表达调空 第十四章基因重组与基因工程 第十五章细胞信息传导 第十六章血液的生物化学 第十七章肝的生物化学 第十八章维生素与微量元素 第十九章糖蛋白、蛋白聚糖和细胞外基因 第二十章基因与生长基因 第二十一章基因诊断与基因治疗 第二十二章常用分子生物学技术的原理及其应用 第二十三章基因组学与医学

第一节、实验室规则及安全防护 一、实验室规则 二、实验室安全防护 第二节、分子生物学常用研究技术 一、核酸分离纯化 二、聚合酶链反应技术 三、分子杂交技术 四、分子克隆技术 五、其它新技术 第三节、常用仪器使用 一、离心机 二、分光光度计 三、PCR 仪 第四节、如何撰写实验报告 第五节 核酸分离纯化技术 实验一、基因组 DNA 的提取制备与检测 实验二、总 RNA 的提取制备与检测 实验三、质粒 DNA 的提取制备与检测 第六节 PCR 技术 实验四、常规 PCR 技术 实验五、定量 PCR 技术 第七节 分子克隆技术 实验六、DNA 的限制性酶切与电泳 实验七、凝胶中 DNA 片断的纯化回收 实验八、DNA 连接实验 实验九、感受态细胞的制备 实验十、重组 DNA 转化与篮白斑筛选 第八节 分子杂交技术 实验十一、Southern 印迹杂交 实验十二、Northern 印迹杂交 实验十三、Western 印迹 实验十四、核酸原位杂交 第九节 综合性实验 实验十五、蛋白质双向电泳 实验十六、酵母双杂交实验 实验十七、RNA 干扰实验