植物生理学实验指导 莱阳农学院生命科学学院 植物生理学教研室 2005年8月21日
植物生理学实验指导 莱阳农学院生命科学学院 植物生理学教研室 2005 年 8 月 21 日
前言 植物生理学是研究植物生命活动规律和机理的一门实验科学。它的一切结论都是通过严格 的科学实验得出的。近年来现代生物技术的发展日新月异,新的实验技术、方法和仪器设备层 出不穷,我校的实验装备水平也有明显改善。因此,原用实验教材中的不少内容异显得陈旧, 为了适应课程建设的要求我们编了这本实验指导。 本实验指导由莱阳农学院生命科学学院植物生理学教研室的刘新、车永梅、杨德翠、柏素 花、战淑敏、马晓柯、刘洪庆和赵方贵负责编写完成。莱阳农学院硏究生处的郑国生对全书进 行了审读、修改和补充。全部编写人员均具有多年从事植物生理学教学和研究的实践经验,曾 经多次编写此类教材,在使用中反应良好 鉴于编者的水平有限,编写时间较仓促,本指导难免有不足之处,敬请读者和专家指正 编者 2005年8月
1 前 言 植物生理学是研究植物生命活动规律和机理的一门实验科学。它的一切结论都是通过严格 的科学实验得出的。近年来现代生物技术的发展日新月异,新的实验技术、方法和仪器设备层 出不穷,我校的实验装备水平也有明显改善。因此,原用实验教材中的不少内容异显得陈旧, 为了适应课程建设的要求我们编了这本实验指导。 本实验指导由莱阳农学院生命科学学院植物生理学教研室的刘新、车永梅、杨德翠、柏素 花、战淑敏、马晓柯、刘洪庆和赵方贵负责编写完成。莱阳农学院研究生处的郑国生对全书进 行了审读、修改和补充。全部编写人员均具有多年从事植物生理学教学和研究的实践经验,曾 经多次编写此类教材,在使用中反应良好。 鉴于编者的水平有限,编写时间较仓促,本指导难免有不足之处,敬请读者和专家指正。 编者 2005 年 8月
目录 1.实验基本常识 1.1几种常用实验仪器操作方法介绍 12实验材料的采取、处理与保存 339 1.3实验数据的处理 2.水分生理 21气孔运动及其影响因素 2.2露点法测定植物叶片水势和渗透势 4468 2.、3液体交换法测定植物组织水势(小液流法、折射仪法、电导法) 3.矿质营养 3.1植物溶容液培养和缺素培养 3.2植物伤流液的成分分析 33根系活力的测定(TTC法) 34硝酸还原酶(NR)活性的测定 4.光合作用和呼吸作用 4.1叶绿体色素的提取、分离、理化性质和定量测定 42红外线CO2气体分析仪法测定植物光合与呼吸速率 4.3抗坏血酸氧化物酶和多酚氧化酶活性的测定 44水溶性碳水化合物的测定 5.植物激素 51植物组织培养技术 52酶联免疫法( ELISA)测定植物激素含量. 6.植物生长发育 6.1种子萌发和活力测定 62花粉活力测定 7.逆境生理 71电导法测定植物细胞透性 72植物组织中超氧物歧化酶活性的测定 73植物体内游离脯氨酸含量的测定 74植物组织中丙二醛含量的测定 7.5植物体内氧自由基的测定和清除 8.综合性实验
2 目 录 1. 实验基本常识………………………….…………………………………………………...3 1.1 几种常用实验仪器操作方法介绍………………………………………………………3 1.2 实验材料的采取、处理与保存…………………………………………………………9 1.3 实验数据的处理……………………………………………………………………….12 2. 水分生理……………….………………………………………………………………….14 2.1 气孔运动及其影响因素……………………………………………………………...14 2.2 露点法测定植物叶片水势和渗透势………………………………………………….16 2.3 液体交换法测定植物组织水势(小液流法、折射仪法、电导法)……………….18 3. 矿质营养……………….………………………………………………………………….20 3.1 植物溶液培养和缺素培养………………….………………………………………………20 3.2 植物伤流液的成分分析………………………………………………………………...22 3.3 根系活力的测定(TTC 法)………….................................................................................24 3.4 硝酸还原酶(NR)活性的测定…….…………………………………………………….25 4. 光合作用和呼吸作用…….……………………………………………………………….26 4.1 叶绿体色素的提取、分离、理化性质和定量测定………………………………….26 4.2 红外线 CO2气体分析仪法测定植物光合与呼吸速率………………………………..30 4.3 抗坏血酸氧化物酶和多酚氧化酶活性的测定………………………………………..39 4.4 水溶性碳水化合物的测定………………………………………………………..……41 5. 植物激素………………………………………………………………………………….44 5.1 植物组织培养技术…………………………………………………………………….45 5.2 酶联免疫法(ELISA)测定植物激素含量……………………………………….….50 6. 植物生长发育…………………………………………………………………………….54 6.1 种子萌发和活力测定……………………………………………………………………54 6.2 花粉活力测定……………………………………………………………………………56 7. 逆境生理……………….……………………………………………………………...……58 7.1 电导法测定植物细胞透性………………………………………………......................58 7.2 植物组织中超氧物歧化酶活性的测定………………………………………………..59 7.3 植物体内游离脯氨酸含量的测定……………………………………………………..60 7.4 植物组织中丙二醛含量的测定………..........................................................................62 7.5 植物体内氧自由基的测定和清除…..................................................................……....63 8. 综合性实验............……………………………………………………………………….64
1.实验基本常识 1.1几种常用实验仪器操作方法介绍 wAY-/2S阿贝折射仪 测定原理 数字阿贝折射仪测定透明或半透明物质的折射率原理是基于测定临界角,由目视望远镜 部件和色散校正部件组成的观察部件来瞄准明暗两部分的分界线,即瞄准临界角的位置,并由 角度二数字转换部件将角度量转换成数字量,输入微机系统进行数据处理,而后数字显示出被 测样品的折射率或锤度 仪器结构 AnNJA-2S 1.目镜2.色散校正手轮 显示窗4 "PowR"电源开关5."READ读数显示键6 "BX-TC"经温度修正锤度显示键7."n"折射率显示 键8."BX"未经温度修正锤度显示键9.调节手轮 10.聚光照明部件11.折射榜镜部件12."TEMP 操作步骤及使用方法 1.按下" POWER"波形电源开关(4),聚光照明部件(10中照明灯亮,同时显示窗(3)显示00000 有时显示窗先显示"",数秒后显示00000 2.打开折射棱镜部件(11),移去擦镜纸,这张擦镜纸(单层)是仪器不使用时放在两棱镜之间, 防止在关上棱镜时,可能留在棱镜上细小硬粒弄坏棱镜工作表面。 3.检查上、下棱镜表面,并用水或酒精小心清洁其表面。测定每一个样品后也要仔细清洁两 块棱镜表面,因为留在棱镜上少量的原来样品将影响下一个样品的测量准确度 4.将被测样品放在下面的折射棱镜的工作表面上。如样品为液体,可用干净滴管吸12滴液体 样品放在棱镜工作表面上,然后将上面的进光棱镜盖上。如样品为固体,则固体样品必须有 个经过抛光加工的平整表面。测量前需将这抛光表面擦净,并在下面的折射棱镜工作表面上滴 1-2滴折射率比固体样品折射率高的透明的液体,然后将固体样品抛光面放在折射棱镜工作表 面上,使其接触良好(测固体样品时不需将上面的进光棱镜盖上)。 5.旋转聚光照明部件的转臂和聚光镜筒使上面的进光棱镜的进光表面(测液体样品)或固体样 品前面的进光表面(测固体样品)得到均匀照明 6.通过目镜(1)观察视场,同时旋转调节手轮(⑨),使明暗分界线落在交叉线视场中。如从目镜 3
3 1. 实验基本常识 1.1 几种常用实验仪器操作方法介绍 一、WAY-1/2S阿贝折射仪 测定原理 数字阿贝折射仪测定透明或半透明物质的折射率原理是基于测定临界角,由目视望远镜 部件和色散校正部件组成的观察部件来瞄准明暗两部分的分界线,即瞄准临界角的位置,并由 角度二数字转换部件将角度量转换成数字量,输入微机系统进行数据处理,而后数字显示出被 测样品的折射率或锤度。 仪器结构 操作步骤及使用方法 1. 按下"POWER"波形电源开关(4),聚光照明部件(10)中照明灯亮,同时显示窗(3)显示00000。 有时显示窗先显示"-",数秒后显示00000。 2. 打开折射棱镜部件(11),移去擦镜纸,这张擦镜纸(单层)是仪器不使用时放在两棱镜之间, 防止在关上棱镜时,可能留在棱镜上细小硬粒弄坏棱镜工作表面。 3. 检查上、下棱镜表面,并用水或酒精小心清洁其表面。测定每一个样品后也要仔细清洁两 块棱镜表面,因为留在棱镜上少量的原来样品将影响下一个样品的测量准确度。 4. 将被测样品放在下面的折射棱镜的工作表面上。如样品为液体,可用干净滴管吸1-2滴液体 样品放在棱镜工作表面上,然后将上面的进光棱镜盖上。如样品为固体,则固体样品必须有一 个经过抛光加工的平整表面。测量前需将这抛光表面擦净,并在下面的折射棱镜工作表面上滴 1-2滴折射率比固体样品折射率高的透明的液体,然后将固体样品抛光面放在折射棱镜工作表 面上,使其接触良好(测固体样品时不需将上面的进光棱镜盖上)。 5. 旋转聚光照明部件的转臂和聚光镜筒使上面的进光棱镜的进光表面(测液体样品)或固体样 品前面的进光表面(测固体样品)得到均匀照明。 6. 通过目镜(1)观察视场,同时旋转调节手轮(9),使明暗分界线落在交叉线视场中。如从目镜 9. 调解手轮 11. 折射棱镜部件 1. 目 镜 2. 色 散 校 正 手 轮 3. 显 示 窗 4. "POWER" 电 源开 关 5. "READ"读 数显 示 键 6. "BX-TC"经温度修正锤度显示键 7. "nD"折射率显示 键 8. "BX"未经温度修正锤度显示键 9. 调节手轮 10. 聚光照明部件 11.折射棱镜部件 12. "TEMP" 温度显示键 13. RS232接口(有RS232系指WYA-2S, 下同) 1 2 11 10 3 2 9 11 13 9 10 4 5 1
中看到视场是暗的,可将调节手轮逆时针旋转。看到视场是明亮的,则将调节手轮顺时针旋转 明亮区域是在视场的顶部。在明亮视场情况下可旋转目镜,调节视度看清晰交叉线。 7.旋转目镜方缺口里的色散校正手轮(2),同时调节聚光镜位置,使视场中明暗两部分具有良好 的反差和明暗分界线具有最小的色散 8.旋转调节手轮,使明暗分界线准确对准交叉线的交点。 9.按"READ"读数显示键(5),显示窗中0000消失,显示"-",数秒后"-"消失,显示被测样品的 折射率。 如要知道该样品的锤度值,可按"BX"未经温度修正的锤度显示键(8)或按"BX-IC"经温度 修正锤度(按 IGUMSA)显示键(6)。"n()"、BX-TC(6)”及"BX(8)"三个键是用于选定测量方式。 经选定后,再按"READ"键,显示窗就按预先选定的测量方式显示。有时按"READ"键,显示” 数秒后""消失,显示窗全暗,无其他显示,反映该仪器可能存在故障,需进行检查修理。当 选定测量方式为"BX-TC"或"BX"时,如果调节手轮旋转超出锤度测量范围(0-95%),按"READ" 后,显示窗将显示”"。 10.检测样品温度,可按"TEMP"温度显示键(12)显示窗将显示样品温度。除了按READ"键后, 显示窗显示"-"时,按"TEMP"键无效,在其它情况下都可以对样品进行温度检测。显示为温度 时,再按"n(7)"、"BX-TC(6)"或"BX(8)"键,显示将是原来的折射率或锤度。为区分显示值是 温度还是锤度,在温度前加"t"符号,在"BX-TC"锤度前加"C"符号,在"BX"锤度前加"b"符号。 11.样品测量结束后,必须用酒精或水(样品为糖溶液)进行小心清洁。 12.本仪器折射棱镜部件中有通恒温水结构,如需测定样品在某一特定温度下的折射率,仪器 可外接恒温器,将温度调节到你所需温度再进行测量 13.计算机可用RS232连接线与仪器连接。首先,送出一个任意的字符,然后等待接收信息(参 数:波特率2400,数据位8位,停止位1位,字节总长18)。 二、752型紫外可见分光光度计 测定原理 利用物质对不同波长光的选择性吸收现象对物质进行定性和定量分析,通过对吸收光谱分 析,判断物质的内部结构及化学组成 仪器结构 S3-样品3 S2-样品2 ●●●。0 S参比样品 Specrum 操作步骤及使用方法 1.开机前,先确认仪器样品室内是否有东西挡在光路上。光路上有东西将影响仪器自检甚至 造成仪器故障。 2.打开电源开关,使仪器预热20分钟:仪器接通电源后,仪器即进入自检状态,自检结束后 波长自动停在546m处,测量的方式自动设定在透射比方式(%D,并自动调100%T和0%T
4 中看到视场是暗的,可将调节手轮逆时针旋转。看到视场是明亮的,则将调节手轮顺时针旋转。 明亮区域是在视场的顶部。在明亮视场情况下可旋转目镜,调节视度看清晰交叉线。 7. 旋转目镜方缺口里的色散校正手轮(2),同时调节聚光镜位 置,使视场中明暗两部分具有良好 的反差和明暗分界线具有最小的色散。 8. 旋转调节手轮,使明暗分界线准确对准交叉线的交点。 9. 按"READ"读数显示键(5),显示窗中00000消失,显示"-",数秒后"-"消失,显示被测样品的 折射率。 如要知道该样品的锤度值,可按"BX"未经温度修正的锤度显示键(8)或按"BX-TC"经温度 修正锤度(按IGUMSA)显示键(6)。"nD(7)"、BX-TC(6)"及"BX(8)"三个键是用于选定测量方式。 经选定后,再按"READ"键,显示窗就按预先选定的测量方式显示。有时按"READ"键,显示"-", 数秒后"-"消失,显示窗全暗,无其他显示,反映该仪器可能存在故障,需进行检查修理。当 选定测量方式为"BX-TC"或"BX"时,如果调节手轮旋转超出锤度测量范围(0-95%),按"READ" 后,显示窗将显示"-"。 10. 检测样品温度,可按"TEMP"温度显示键(12)显示窗将显示样品温度。除了按"READ"键后, 显示窗显示"-"时,按"TEMP"键无效,在其它情况下都可以对样品进行温度检测。显示为温度 时,再按"nD(7)"、"BX-TC(6)"或"BX(8)"键,显示将是原来的折射率或锤度。为区分显示值是 温度还是锤度,在温度前加"t"符号,在"BX-TC"锤度前加"C"符号,在"BX"锤度前加"b"符号。 11. 样品测量结束后,必须用酒精或水(样品为糖溶液)进行小心清洁。 12. 本仪器折射棱镜部件中有通恒温水结构,如需测定样品在某一特定温度下的折射率,仪器 可外接恒温器,将温度调节到你所需温度再进行测量。 13.计算机可用RS232连接线与仪器连接。首先,送出一个任意的字符,然后等待接收信息(参 数:波特率2400,数据位8位,停止位1位,字节总长18)。 二、752型紫外可见分光光度计 测定原理 利用物质对不同波长光的选择性吸收现象对物质进行定性和定量分析,通过对吸收光谱分 析,判断物质的内部结构及化学组成。 仪器结构 操作步骤及使用方法 1. 开机前,先确认仪器样品室内是否有东西挡在光路上。光路上有东西将影响仪器自检甚至 造成仪器故障。 2. 打开电源开关,使仪器预热20分钟;仪器接通电源后,仪器即进入自检状态,自检结束后 波长自动停在546nm处,测量的方式自动设定在透射比方式(%T),并自动调100%T和0%T。 S3-样品 3 S2-样品 2 S1-样品 1 S0-参比样品 S3 S2 S1 S0
透射比参数测定样品时透射比方式) 3.按"”方式键"(MODE)将测试方式设置为透射比方式:显示器显示" XXXnm,XXXX%T 4.按"波长设置"键(ⅴ▲)设置分析波长,如340nm;按波长设置键"ˇ"或"▲"直到显示器显示 340m为止。此时显示器显示"340 nmXXXX%。每当波长被重新设置后,请不要忘记调整 100.0%T 5.将您的参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中:比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米, 大约2.5毫升,被测试的样品中不能有气泡和漂浮物,否则,会影响测试参数的精确度 6.打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,盖上样品室盖。被测样品的测 试波长在340nm-10nm范围内时,建议使用玻璃比色皿,190nm-340nm范围内时,建议使用 石英比色皿。 仪器所附比色皿的透射率已经过测试和匹配,未经匹配处理的比色皿将影响样品的测试精 度。比色皿的透光部分表面不能有指印、溶液痕迹。否则,将影响样品的测试精度。 7.将参比溶液推入光路中,按"100%T键调整100%T。仪器在自动调整100%T的过程中,显示 器显示"340 nonblank..",100.0%调整完成后,显示器显示"340nm,100.0%T 8.将被测溶液推或拉入光路中,此时,显示器上所显示是被测样品的透射比参数。 注意:测定时要将比色皿的光面对准光路 吸光度参数测定样品时(吸光度方式) 2.(同上) 3.按"方式键"(MODE)将测试方式设置为吸光度方式:显示器显示" XXXnm, X.XXXAbs" 4.按"波长设置"键(ˇ▲)设置分析波长,如340nm:按波长设置键"v"或"▲"直到显示器显示 340m为止。此时显示器显示"340 nmX. XXXabs'"。每当波长被重新设置后,请不要忘记调整 零ABS 5.将您的参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中;比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米, 大约2.5毫升,被测试的样品中不能有气泡和漂浮物,否则,会影响测试参数的精确度 6.(同上) 7.将参比溶液推入光路中,按"100%T键调整零ABS。仪器在自动调整100%T的过程中,显示 器显示"340 nm Blank..",100.0%T调整完成后,显示器显示"340nm,0.000Abs 8.将被测溶液推或拉入光路中,此时,显示器上所显示是被测样品的吸光度参数。 浓度值参数测定样品时(浓度直读方式) 1)已知标准样品浓度值 1.2(同上) 3.按"方式键"(MODE)将测试方式设置为浓度直读方式:显示器显示" XXXnmXXXXC 4.按"波长设置"键(▲)设置分析波长,如340nm;按波长设置键"v"或"▲"直到显示器显 340m为止。此时显示器显示"340 nmX.XXXO"。每当波长被重新设置后,请不要忘记调整零 5.将您的参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中;比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米, 大约25毫升,被测试的样品中不能有气泡和漂浮物,否则,会影响测试参数的精确度。 6.(同上) 7.将参比溶液推入光路中,按"100%"键调整零ABS。仪器在自动调整100%T的过程中,显示 器显示"340 nm Blank..",100.0%T调整完成后,显示器显示"340nm,0000C 8.按"功能键",直至显示器上显示"STD/CONC=1000
5 透射比参数测定样品时(透射比方式): 3. 按"方式键"(MODE)将测试方式设置为透射比方式:显示器显示"XXXnm,XXX.X%T" 4. 按"波长设置"键(▼▲)设置分析波长,如340nm;按波长设置键"▼"或"▲"直到显示器显示 340nm为止。此时显示器显示"340nmXXX.X%T"。每当波长被重新设置后,请不要忘记调整 100.0%T。 5. 将您的参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中;比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米, 大约2.5毫升,被测试的样品中不能有气泡和漂浮物,否则,会影响测试参数的精确度。 6. 打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,盖上样品室盖。被测样品的测 试波长在340nm-1000nm范围内时,建议使用玻璃比色皿,190nm-340nm范围内时,建议使用 石英比色皿。 仪器所附比色皿的透射率已经过测试和匹配,未经匹配处理的比色皿将影响样品的测试精 度。比色皿的透光部分表面不能有指印、溶液痕迹。否则,将影响样品的测试精度。 7. 将参比溶液推入光路中,按"100%T"键调整100%T。仪器在自动调整100%T的过程中,显示 器显示"340nmBlank....",100.0%T调整完成后,显示器显示"340nm,100.0%T" 8. 将被测溶液推或拉入光路中,此时,显示器上所显示是被测样品的透射比参数。 注意:测定时要将比色皿的光面对准光路。 吸光度参数测定样品时(吸光度方式): 1. 2.(同上) 3. 按"方式键"(MODE)将测试方式设置为吸光度方式:显示器显示"XXXnm,X.XXXAbs" 4. 按"波长设置"键(▼▲)设置分析波长,如340nm;按波长设置键"▼"或"▲"直到显示器显示 340nm为止。此时显示器显示"340nmX.XXXAbs"。每当波长被重新设置后,请不要忘记调整 零ABS。 5. 将您的参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中;比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米, 大约2.5毫升,被测试的样品中不能有气泡和漂浮物,否则,会影响测试参数的精确度。 6.(同上) 7. 将参比溶液推入光路中,按"100%T"键调整零ABS。仪器在自动调整100%T的过程中,显示 器显示"340nmBlank....",100.0%T调整完成后,显示器显示"340nm,0.000Abs" 8. 将被测溶液推或拉入光路中,此时,显示器上所显示是被测样品的吸光度参数。 浓度值参数测定样品时(浓度直读方式): 1)已知标准样品浓度值: 1. 2(同上) 3. 按"方式键"(MODE)将测试方式设置为浓度直读方式:显示器显示"XXXnmXXXXC" 4. 按"波长设置"键(▼▲)设置分析波长,如340nm;按波长设置键"▼"或"▲"直到显示器显示 340nm为止。此时显示器显示"340nmX.XXXC"。每当波长被重新设置后,请不要忘记调整零 ABS。 5. 将您的参比溶液和被测溶液分别倒入比色皿中;比色皿内的溶液面高度不应低于25毫米, 大约2.5毫升,被测试的样品中不能有气泡和漂浮物,否则,会影响测试参数的精确度。 6.(同上) 7. 将参比溶液推入光路中,按"100%T"键调整零ABS。仪器在自动调整100%T的过程中,显示 器显示"340nmBlank....",100.0%T调整完成后,显示器显示"340nm,0000C"。 8. 按"功能键",直至显示器上显示"STD/CONC=1000
9.按参数设置键(▲)直至显示器上显示的参数与标准样品的浓度值相等,如标准样品浓 度值为200:此时显示器显示"STD/CONC=0200”。 10.按确认键,此时显示器显示"STD/CONC=0200”。 将被测溶液推或拉入光路中,此时,显示器上所显示是被测样品的浓度值 2)已知标准样品K因子: 1~7步,如方法1)。 8.按"功能键",直至显示器上显示" STD/FACTOR=1000 9.按参数设置键(V▲)直至显示器上显示的参数与标准样品的浓度值相等,如标准样品浓 度值为200;此时显示器显示" STD/FACTOR=0200°。 10.按确认键,此时显示器显示" SID/FACTOR=0200"。 将被测溶液推或拉入光路中,此时,显示器上所显示是被测样品的浓度值 、GXH-3051型红外线CO2气体分析仪(IRGA) 工作原理 许多由异原子组成的气体分子对红外线都有特异的吸收带。CO2的红外吸收带有四处,其 吸收峰分别在269μm、2.71um、426um和1499um处,其中只有426um的吸收带不与H2O 的吸收带重叠,红外仪内设置仅让426um红外光通过的滤光片,当该波长的红外光经过含有 CO2的气体时,能量就因CO2的吸收而降低,降低的多少与CO2的浓度有关,并服从朗伯一 比尔定律。分别供给红外仪含与不含CO2的气体,红外仪的检测器便可通过检测红外光能量 的变化而输出反映CO2浓度的电讯号。 目前应用于光合作用研究的红外线CO2气体分析仪,按照测量气室的数量一般分为两种 类型:单气室类型和双气室(或多气室)类型。单气室红外仪一般用于CO2浓度绝对值的测 定;在双气室(或多气室)红外仪中,一个气室为分析气室,另一个作为参比气室,可测定参 比气与分析气中CO2浓度之差。 仪器结构 仪器主机 干燥管 仪器后面板示意图 仪器前面板及连接示意图 仪器启动及操作 1.将仪器从包装箱内取出,接上外接电源,或者切换到内部蓄电池。打开仪器的电源。注意 仪器接通电源后,将发出2~3秒钟低电压峰呜报警声音,然后仪器正常运转。如果仪器使用蓄 电池连续工作若干小时后,仪器将再次长时间发出报警声音,则说明蓄电池电能已快用完,此 时应停止使用,待蓄电池充足电后再使用或改用市电220AC经直流电源转换成2V给仪器供 6
6 9. 按参数设置键(▼▲)直至显示器上显示的参数与标准样品的浓度值相等,如标准样品浓 度值为200;此时显示器显示"STD/CONC=0200"。 10. 按确认键,此时显示器显示"STD/CONC=0200"。 11. 将被测溶液推或拉入光路中,此时,显示器上所显示是被测样品的浓度值。 2)已知标准样品K因子: 1~7步,如方法1)。 8. 按"功能键",直至显示器上显示"STD/FACTOR=1000"。 9. 按参数设置键(▼▲)直至显示器上显示的参数与标准样品的浓度值相等,如标准样品浓 度值为200;此时显示器显示"STD/FACTOR=0200"。 10. 按确认键,此时显示器显示"STD/FACTOR=0200"。 11. 将被测溶液推或拉入光路中,此时,显示器上所显示是被测样品的浓度值。 三、GXH-3051型红外线CO2气体分析仪(IRGA) 工作原理 许多由异原子组成的气体分子对红外线都有特异的吸收带。CO2 的红外吸收带有四处,其 吸收峰分别在 2.69µm、2.77µm、4.26µm 和 14.99µm 处,其中只有 4.26µm 的吸收带不与 H2O 的吸收带重叠,红外仪内设置仅让 4.26µm 红外光通过的滤光片,当该波长的红外光经过含有 CO2 的气体时,能量就因 CO2 的吸收而降低,降低的多少与 CO2 的浓度有关,并服从朗伯一 比尔定律。分别供给红外仪含与不含 CO2 的气体,红外仪的检测器便可通过检测红外光能量 的变化而输出反映 CO2 浓度的电讯号。 目前应用于光合作用研究的红外线 CO2 气体分析仪,按照测量气室的数量一般分为两种 类型:单气室类型和双气室(或多气室)类型。单气室红外仪一般用于 CO2 浓度绝对值的测 定;在双气室(或多气室)红外仪中,一个气室为分析气室,另一个作为参比气室,可测定参 比气与分析气中 CO2 浓度之差。 仪器结构 仪器启动及操作 1. 将仪器从包装箱内取出,接上外接电源,或者切换到内部蓄电池。打开仪器的电源。注意: 仪器接通电源后,将发出2~3秒钟低电压峰呜报警声音,然后仪器正常运转。如果仪器使用蓄 电池连续工作若干小时后,仪器将再次长时间发出报警声音,则说明蓄电池电能已快用完,此 时应停止使用,待蓄电池充足电后再使用或改用市电220VAC经直流电源转换成l2V给仪器供 仪器前面板及连接示意图 仪器后面板示意图 气室 干燥管 连接胶管 仪器主机
电。一般充足电的蓄电池可使仪器连续工作4~5h 2.仪器接通电源后必须预热l5min,这时数显表头显示值为环境空气中CO2的浓度值,约为 300~350ppm。 3.仪器预热15min后,第一步要校准仪器零点。将仪器后面板的切换阀旋到左侧的调零位置上 打开泵的开关。约lmin后,数显表头的显示值趋向零点附近。此时,旋下零点电位器上的保护 盖,调节零点电位器,将显示值调至零点上。 4.第二步要校准仪器跨度。在仪器零点校准结束后,关上气泵的开关,待仪器前面板的切换 阀旋到右侧的测量位置上,将l升标准气瓶的出气嘴插入仪器的进气嘴内,轻轻压3次,每次约 1秒,然后等待lmin左右,待显示值稳定以后,调节跨度电位器使显示值与标准气浓度值一致(若 使用带减压阀的高压标准气瓶,应将标准气以0.5L/min的流量进入仪器内,约lmin左右,待显 示值稳定以后再进行跨度校准)。 5.测量:用橡胶软管将取样手柄与仪器进气嘴连接上,开泵即可抽取样气进行测量。不取样 时可把泵关闭。 6.测量完毕以后,关上电源开关及泵开关,拔下稳压电源插头,将仪器前面板的切换阀打到 右侧的测量状态;将仪器后面板的外接供电和电池供电切换开关旋到"外接"方向 7.用橡胶管短接样气的进出气口,将其他各连接器件卸下,并整理归位。 四、高速离心机 测定原理 将装有等量试液的离心管对称放置在转头四周的孔内,启动机器后,电动机带动转头高 速运转所产生的相对离心力(RCF)使试液分离,相对离心力的大小取决于试样所处的位置至轴 心的水平距离即旋转半径r和转速n,其计算公式如下: RCF=1118×10-5n2r×g;n转速转/分):r-旋转半径(厘米) 仪器结构 冒 仪器示意 仪器内转头 操作步骤 1.将样品等量放置在试管内,并将其对称放入转头。 2.拧紧转轴螺母,盖好盖门,将仪器按上电源后,打开仪器后面的电源开关,此时数码管显 示"000°,表示仪器已接通电源 3.如需调整仪器的运行参数(运转时间和运转速度),可按功能键,使相应的指示灯点亮,数码 管即显示该参数值,此时可用"ⅴ,▲,←"键调整该参数至需要的值,按记忆键确认贮存。 4.按开键启动仪器。仪器运行过程中数码管显示转速,当需要查看其他参数时,可按功能键, 使该参数对应的指示灯点亮,数码管即显示该参数值。当仪器到达设定的时间或中途停机,停 机过程中数码管闪烁显示转速,属正常现象 注意事项: 7
7 电。一般充足电的蓄电池可使仪器连续工作4~5h。 2. 仪器接通电源后必须预热15min,这时数显表头显示值为环境空气中CO2的浓度值,约为 300~350ppm。 3. 仪器预热15min后,第一步要校准仪器零点。将仪器后面板的切换阀旋到左侧的调零位置上, 打开泵的开关。约lmin后,数显表头的显示值趋向零点附近。此时,旋下零点电位器上的保护 盖,调节零点电位器,将显示值调至零点上。 4. 第二步要校准仪器跨度。在仪器零点校准结束后,关上气泵的开关,待仪器前面板的切换 阀旋到右侧的测量位置上,将l升标准气瓶的出气嘴插入仪器的进气嘴内,轻轻压3次,每次约 1秒,然后等待1min左右,待显示值稳定以后,调节跨度电位器使显示值与标准气浓度值一致(若 使用带减压阀的高压标准气瓶,应将标准气以0.5 L/min的流量进入仪器内,约1min左右,待显 示值稳定以后再进行跨度校准)。 5. 测量:用橡胶软管将取样手柄与仪器进气嘴连接上,开泵即可抽取样气进行测量。不取样 时可把泵关闭。 6. 测量完毕以后,关上电源开关及泵开关,拔下稳压电源插头,将仪器前面板的切换阀打到 右侧的测量状态;将仪器后面板的外接供电和电池供电切换开关旋到"外接"方向。 7. 用橡胶管短接样气的进出气口,将其他各连接器件卸下,并整理归位。 四、高速离心机 测定原理 将装有等量试液的离心管对称放置在转头四周的孔内,启动机器后,电动机带动转头高 速运转所产生的相对离心力(RCF)使试液分离,相对离心力的大小取决于试样所处的位置至轴 心的水平距离即旋转半径r和转速n,其计算公式如下: RCF=1.118×10-5n2r×g;n-转速(转/分);r-旋转半径(厘米) 仪器结构 操作步骤 1. 将样品等量放置在试管内,并将其对称放入转头。 2. 拧紧转轴螺母,盖好盖门,将仪器按上电源后,打开仪器后面的电源开关,此时数码管显 示"0000",表示仪器已接通电源; 3. 如需调整仪器的运行参数(运转时间和运转速度),可按功能键,使相应的指示灯点亮,数码 管即显示该参数值,此时可用"▼,▲,◄"键调整该参数至需要的值,按记忆键确认贮存。 4. 按开键启动仪器。仪器运行过程中数码管显示转速,当需要查看其他参数时,可按功能键, 使该参数对应的指示灯点亮,数码管即显示该参数值。当仪器到达设定的时间或中途停机,停 机过程中数码管闪烁显示转速,属正常现象。 注意事项: 仪器示意 仪器内转头
1.为确保安全和离心效果,仪器必须放置在坚固水平的台面上,塑料盖门上不得放置任何物 品:样品必须对称放置,并在开机前确保已拧紧螺母: 2.应经常检查转头及试验用的离心管是否有裂纹,老化等现象,如有就应及时更换 3.试验完毕后,需将仪器擦试干净,以防腐蚀 4.如样品比重超过1g/cm3,最高转速n按下式计算:n=nm×(1.2g/样品比重)2 5当电机碳刷长度小于6mm时,必须及时更换 6.在离心机未停稳的情况下不得打开盖门 7.仪器必须有可靠接地; 8.实验结束后,关闭后面电源开关,拔掉电源插头,下次实验插上电源插头时,勿忘打开后 面电源开关。 五、DDSJ-308A型电导率仪 DDSJ-308A型电导率仪是一台智能型的实验室常规分析仪器,适用于实验室精确测量水溶 液的电导率及温度、总溶解固态量(TDS)及温度,也可用于测量纯水的纯度与温度,以及海水 及海水淡化处理中的含盐量的测定(以NaC为标准)。 本仪器具有以下特点: (1)仪器可进行电导率、TDS、盐度及温度测量,测量范围 电导率:0~199×105pslm;TDs:0-19990mg/L 盐度:00-80.0p0:;温度:-5.0-105.0度 ②2)仪器采用微处理器技术,使仪器具有自动温度补偿、自动校准、量程自动切换等功能。 仪器具有断电保护功能,在仪器使用完毕关机后或非正常断电情况下,仪器内部贮存的测量数 据和设置的参数不会丢失。 (3)仪器的测量结果可以贮存、删除、查阅、保持、打印或传送到PC机。仪器最多可贮存 各50套电导率、TDS或盐度测量的实验数据,并提供两套打印模式供用户选择。 (4)具有标定功能,用户可用此功能标定电极常数或IDS转换系数。 (5)为方便操作,开机后,仪器将直接进入上次关机时的测量状态 (6)仪器带有RS-232接口,可接TP-16型打印机打印测量结果或与计算机通讯 (⑦)仪器采用点阵式液晶显示,全中文操作界面,使用简单方便。仪器采用新颖轻触键, 可靠性好 仪器结构 仪器面板上共有15个操作键,其功能如下: "打印1"键:用于打印当前的测量数据 "打印2"键:用于打印贮存的测量数据
8 1. 为确保安全和离心效果,仪器必须放置在坚固水平的台面上,塑料盖门上不得放置任何物 品;样品必须对称放置,并在开机前确保已拧紧螺母; 2. 应经常检查转头及试验用的离心管是否有裂纹,老化等现象,如有就应及时更换; 3. 试验完毕后,需将仪器擦试干净,以防腐蚀; 4. 如样品比重超过1.2g/cm3,最高转速n按下式计算:n=nmax×(1.2g/样品比重) 1/2 5. 当电机碳刷长度小于6mm时,必须及时更换; 6. 在离心机未停稳的情况下不得打开盖门; 7. 仪器必须有可靠接地; 8. 实验结束后,关闭后面电源开关,拔掉电源插头,下次实验插上电源插头时,勿忘打开后 面电源开关。 五、DDSJ-308A型电导率仪 DDSJ-308A型电导率仪是一台智能型的实验室常规分析仪器,适用于实验室精确测量水溶 液的电导率及温度、总溶解固态量(TDS)及温度,也可用于测量纯水的纯度与温度,以及海水 及海水淡化处理中的含盐量的测定(以NaCl为标准)。 本仪器具有以下特点: (1)仪器可进行电导率、TDS、盐度及温度测量,测量范围: 电导率:0~1.999×105μs/cm;TDS:0~19990mg/L 盐度:0.0~80.0ppt;温度:-5.0~105.0度 (2)仪器采用微处理器技术,使仪器具有自动温度补偿、自动校准、量程自动切换等功能。 仪器具有断电保护功能,在仪器使用完毕关机后或非正常断电情况下,仪器内部贮存的测量数 据和设置的参数不会丢失。 (3)仪器的测量结果可以贮存、删除、查阅、保持、打印或传送到PC机。仪器最多可贮存 各50套电导率、TDS或盐度测量的实验数据,并提供两套打印模式供用户选择。 (4)具有标定功能,用户可用此功能标定电极常数或TDS转换系数。 (5)为方便操作,开机后,仪器将直接进入上次关机时的测量状态。 (6)仪器带有RS-232接口,可接TP-16型打印机打印测量结果或与计算机通讯。 (7)仪器采用点阵式液晶显示,全中文操作界面,使用简单方便。仪器采用新颖轻触键, 可靠性好。 仪器结构 仪器面板上共有15个操作键,其功能如下: "打印1"键:用于打印当前的测量数据。 "打印2"键:用于打印贮存的测量数据
查阅"键:用于查阅仪器所贮存的测量数据 "贮存"键:用于贮存测量数据 删除"键:用于删除全部贮存的测量数据。 标定"键:用于标定电极常数或TDS转换系数 "电极常数"键:用于设置电极常数或TDS转换系数。 "温补系数"键:用于设置温度补偿系数。 ▲"键:用于调节参数 保持"键:用于锁定本次测量数据 确认"键:用于确认仪器当前的操作数据或操作状态。 "取消"键:用于从各种工作状态返回到测量状态。 " ON/OFF键:用于仪器的开机或关机。 仪器安装及使用 安装 1.将多功能电极架(9)插入电极梗座(3)内。 2.将电导电极(10)和温度传感器(12)夹在多功能电极架(9)上 3.分别将电导电极(10)和温度传感器(2)的插头插入测量电极插座(5)和温度传感器插座7)内。 4.用蒸馏水清洗电导电极和温度传感器,然后将电导电极和温度传感器浸入被测溶液中。 5.将通用电源器(1)输出插头插入仪器的电源插座(4)内。然后,接通通用电源器的电源,仪 器可以进行正常操作。 盐度测量电导电极选用 盐度测量时,一般选用电极常数10的电导电极 10ppt以下盐度也可选用电极常数1的铂黑电导电极 测定操作 1.开机:按下" ON/OFF"键,仪器将显示厂标、仪器型号、名称,即"DDSJ-308A型电导率仪" 几秒后,仪器自动进入上次关机时的测量工作状态,此时仪器采用的参数为用户最新设置的参 数。如果用户不需改变参数,则无需进行任何操作,即可直接进行测量。 2.按"模式"键可以在三种模式间进行转换(电导率-TDS-盐度)。 3.调节电极常数 每支电导电极出厂时,都标有一定的电极常数值,用户需将此值输入仪器 如电导电极的常数为0.98,则具体操作步骤如下 在电导率测量下,按"电极常数"键,用"ⅴ,▲"键调节常数至0.98值,按"确认"键,仪器 自动将电极常数值0.98存入并返回测量状态,在测量状态中即显示此电极常数值。 4.调节温度系数 在电导率或TDS状态下,按"温补系数"键,仪器进入温补系数调节状态。根据测量溶液的 温度系数,按"ˇ,▲"键修改,最后按"确认"键,仪器自动将修改好的温度补偿系数存入并返 回测量状态 5.测定 将电导电极浸入待测溶液中,待仪器读数稳定后,记录结果即可 6.测量结束后,按 ON/OFF"键,仪器关机。将电极卸下,清洗干净后,放回仪器保存箱中。 12实验材料的采取、处理与保存 植物材料的采集、处理和保存是否恰当是完成植物生理学硏究的重要环节之一。植物生理 实验使用的材料非常广泛,根据来源可划分为天然的植物材料(如植物幼苗、根、茎、叶、花 等器官或组织等)和人工培养、选育的植物材料(如杂交种、诱导突变种、植物组织培养突变型 9
9 "查阅"键:用于查阅仪器所贮存的测量数据。 "贮存"键:用于贮存测量数据。 "删除"键:用于删除全部贮存的测量数据。 "标定"键:用于标定电极常数或TDS转换系数。 "电极常数"键:用于设置电极常数或TDS转换系数。 "温补系数"键:用于设置温度补偿系数。 "▼,▲"键:用于调节参数。 "保持"键:用于锁定本次测量数据。 "确认"键:用于确认仪器当前的操作数据或操作状态。 "取消"键:用于从各种工作状态返回到测量状态。 "ON/OFF键:用于仪器的开机或关机。 仪器安装及使用 安装: 1. 将多功能电极架(9)插入电极梗座(3)内。 2. 将电导电极(10)和温度传感器(12)夹在多功能电极架(9)上。 3. 分别将电导电极(10)和温度传感器(l2)的插头插入测量电极插座(5)和温度传感器插座(7)内。 4. 用蒸馏水清洗电导电极和温度传感器,然后将电导电极和温度传感器浸入被测溶液中。 5. 将通用电源器(11)输出插头插入仪器的电源插座(4)内。然后,接通通用电源器的电源,仪 器可以进行正常操作。 盐度测量电导电极选用 盐度测量时,一般选用电极常数10的电导电极; 10ppt以下盐度也可选用电极常数1的铂黑电导电极。 测定操作 1. 开机:按下"ON/OFF"键,仪器将显示厂标、仪器型号、名称,即"DDSJ-308A型电导率仪"。 几秒后,仪器自动进入上次关机时的测量工作状态,此时仪器采用的参数为用户最新设置的参 数。如果用户不需改变参数,则无需进行任何操作,即可直接进行测量。 2. 按"模式"键可以在三种模式间进行转换(电导率-TDS-盐度)。 3. 调节电极常数 每支电导电极出厂时,都标有一定的电极常数值,用户需将此值输入仪器。 如电导电极的常数为0.98,则具体操作步骤如下: 在电导率测量下,按"电极常数"键,用"▼,▲"键调节常数至0.98值,按"确认"键,仪器 自动将电极常数值0.98存入并返回测量状态,在测量状态中即显示此电极常数值。 4. 调节温度系数 在电导率或TDS状态下,按"温补系数"键,仪器进入温补系数调节状态。根据测量溶液的 温度系数,按"▼,▲"键修改,最后按"确认"键,仪器自动将修改好的温度补偿系数存入并返 回测量状态。 5. 测定 将电导电极浸入待测溶液中,待仪器读数稳定后,记录结果即可。 6. 测量结束后,按"ON/OFF"键,仪器关机。将电极卸下,清洗干净后,放回仪器保存箱中。 1.2 实验材料的采取、处理与保存 植物材料的采集、处理和保存是否恰当是完成植物生理学研究的重要环节之一。植物生理 实验使用的材料非常广泛,根据来源可划分为天然的植物材料(如植物幼苗、根、茎、叶、花 等器官或组织等)和人工培养、选育的植物材料(如杂交种、诱导突变种、植物组织培养突变型