I. Genes and Gene Experession 7.1 Macromolecules and Genetic Information II. DNA STRUCTURE 7.2 DNA Structure: The Double Helix 双螺旋 7.3 DNA Structure: Supercoiling 超螺旋结构

一、实验目的 1. 了解 DNA 的存在状态，增加感性认识。 2. 掌握 DNA 的制备方法以及细胞分级，细胞核制备，细胞膜裂解和解离 DNA-蛋白复合体（DNP）的技术

一、中心法则 二、DNA复制的半保留性 三、DNA的复制过程 四、 DNA的损伤和修复 五、反转录

实验一：移液器使用. 4 实验二：质粒DNA的限制性内切酶消化.9 实验三：琼脂糖凝胶电泳检测DNA.11 实验四、五：目的片段的切胶回收与 DNA 重组.14 实验六、七：大肠杆菌感受态细胞的制备及转化.17 实验八：（重组）质粒 DNA 的提取.21 实验九：PCR 基因扩增技术筛选重组子.24 实验十：外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测.26

执行生命功能、表现生命特征的主要物质是蛋白质分子。DNA贮存着决 定生物特征的遗传信息,只有通过蛋白质才能表达出它的生命意义,直接决 定蛋白质合成及蛋白质特征的不是RNA而是DA,因而人们确定DNA是 遗传信息贮存者后就推测DNA是通过RNA去决定蛋白质合成的。50年代 末RNA聚合酶的发现开始证实了这一推测。以DNA为模板合成RNA的过 程称为转录(transcription)

教学内容 备注 一、2DNA的组成、结构 二、2天然DA的制备、限制性核酸内切酶及DNA的片段化 三、2特异性DNA片段的PCR扩增 四、2DNA片段的化学合成及凝胶电泳检测

1、概述 2、DNA损伤的类型 3、DNA损伤修复机制 4、DNA损伤修复的意义

《分子生物学》课程教学课件（PPT讲稿）第三章 DNA复制 DNA Replication（2/3）原核生物DNA复制、真核生物的DNA复制

实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化. 2 实验二 碱变性法提取质粒 DNA . 6 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA . 11 实验四 DNA 的限制性内切酶酶切 . 15 实验五 DNA 的回收与连接 . 18 实验六 基因的 PCR 扩增. 23 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因. 29 实验八 基因组合生物合成新化合物. 36 实验九 药用甘草片中甘草酸含量的分析及其质量评价. 47 实验十 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备. 48 实验十一 固定化细胞法生产 L-天冬氨酸和 L-丙氨酸. 50 实验十二 重组水蛭素Ⅲ的制备. 57 实验十三 酸醇提取法制备猪胰岛素. 65 实验十四 多肽缩宫素的 Fmoc 固相合成法. 70 实验十五 酵母 RNA 的制备和单核苷酸的离子交换柱层析分析. 76 实验十六 单核苷酸衍生物制备. 82 实验十七 胰弹性蛋白酶的制备及活力测定. 85 实验十八 超氧化物歧化酶的分离纯化. 89 实验十九 重组门冬酰胺酶Ⅱ的纯化与分析. 97

基本概念 复制:指以亲代DNA分子为模板合成一个新的与亲代模 板结构相同的子代DNA分子的过程。 转录:指以DNA或RNA(某些病毒中)为模板,以ATP 、GTP、CTP和UTP四种核糖核苷三磷酸(NTP)为 底物,在RNA聚合酶和其它蛋白质因子的作用下,按 碱基互补配对原则,从5′-3′合成RNA的过程。遗 传信息通过转录从DNA传递到RNA 翻译:又称蛋白质生物合成,是指在核糖体上,将 mRNA所含的遗传密码转译为多肽链中相应氨基酸的 过程