PCR是 Polymerase chain reaction的缩写,中文译作聚合酶链式反应。其特点是可以 在几小时内方便、快捷地将微量DNA(含由微量RNA反转录成的cDNA)扩增达10 倍,得到ug级的DNA!该技术发明于八十年代中期,到了八十年代末,由于引用了耐热 DNA聚合酶,使这一技术得以蓬勃发展,成为分子生物学中应用最为广泛的技术之一,发 挥着日益重要的作用 由于其方便快捷,在中医药实验研究和临床检测中应用十分广泛

1.鉴定。鉴定所培养的单菌落中是否含有重组质粒,或仅含有自身环化的质粒。如 前所述,前者电泳后会出现大小不等的两条DNA条带,一条为线性质粒载体的DNA,另 条为插入的目的基因;后者仅有一条载体的DNA条带。比如 DDPCR、 RACEPCR、细 胞库筛选、基因重组,等

要在分子生物学领域进行计算分析,从公共数据库( DDBJ/EMBL/GenBank)中获得DNA序列记录 是其必需条件。借助于和一个已了解其生物学功能而被分离出来并测序的基因比较相似性的 方法,我们可以尝试确定某疾病基因的功能,这种方法要求序列记录有精确并且富于信息的 生物学注解。对于将其作为 BLAST或Eηtrez的检索结果来硏究的科学家来说,编码的蛋白质 产物的名称或功能、基因座位的名称以及和该序列最初的公布之间的联系(它因何被测 序?)构成了序列记录的直接的确切涵义 本章的内容是提交DNA序列及其注解到公共数据库,重点介绍了与国际核苷酸序列协作数据 库:DDBJ、EMBL和 Gen Bank密切相关的核苷酸序列数据库

1.Definitions: topoisomerase, ribozyme, double helix, DNA denaturation, Tm, linking number, pseudoknot. 2.What are the structural differences between DNA and RNA? How the structural properties of DNA and RNA determine their distinct biological functions

一、DNA是遗传信息的携带分子 (一)细胞内含有恒定量的DNA (二)DNA是细菌的转化因子 (三)病毒是游离的遗传因子

复制(replication) 是指遗传物质的传代,以母链DNA为模板合成子链DNA的过程

基因重组(genetic recombination)整段DNA在细胞内或细胞间,甚至不同物种间进行交换,并能在新的位置上复制,转录和翻译 一、DNA的重组的分类 同源重组、特异位点重组和转座重组等类型 二、自然界的基因转移和重组 自然界的基因转移和重组是无目的基因工程有目的

一、基因信息的传递 (一)DNA是生物遗传的物质基础—遗传信息的载体 遗传信息以密码的形式编码在DNA分子上,表现为 特定的核苷酸排列顺序——三联体密码

RNA的生物合成包括转录和RNA的复制 转录( transcription):以一段DNA的遗传信息为模板,在RNA聚合酶作用下,合成出对应的RNA 的过程,或在DNA指导下合成RNA。 转录产物:mRNA、RNA、tRNA、小RNA 除某些病毒基因组RNA外,绝大多数RNA分子都来自DNA转录的产物

核酸(nucleic acid) 是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子,携带和传递遗传信息。 一、核酸的发现和研究工作进展 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和 Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和 Baltimore发现逆转录酶 1981年 GilbertSanger和建立DNA测序方法 1985年 Mullis发明PCR技术 1990年美国启动人类基因组计划(HGP) 1994年中国人类基因组计划启动 2001年美、英等国完成人类基因组计划基本框架